张蕾
- 作品数：1 被引量：1H指数：1
- 供职机构：西北民族大学生命科学与工程学院生物工程与技术国家民委重点实验室更多>>
- 发文基金：中央高校基本科研业务费专项资金长江学者和创新团队发展计划国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 靶向脑心肌炎病毒VP1基因的shRNA对脑心肌炎病毒复制的抑制作用被引量：1
- 2014年
- 选择脑心肌炎病毒(EMCV)VP1基因,探讨了shRNA对EMCV复制的影响。设计合成4对编码siRNA的VP1基因的DNA序列,分别构建pcDNA6.2-GW/EmGFP-miR干扰载体X109-1、X109-2、X109-3和X109-4,脂质体介导转染至BHK21细胞,接种EMCV。病毒TCID50和实时荧光定量PCR结果表明,4种重组EMCV VP1shRNA对EMCV的复制均有抑制作用,其中X109-2的抑制作用最显著。X109-2转染BHK21细胞后分别接种EMCV、口蹄疫病毒(FMDV)、乙型脑炎病毒(JEV),EMCV的lgTCID50为3.5,FMDV和JEV的lgTCID50均在7.0以上,说明重组shRNA质粒对EMCV复制的抑制具有明确的特异性和干扰的靶向性。X109-2和pEGFP-VP1真核表达载体共转染CHO-K1细胞后,RT-PCR和Western-blot检测结果表明,VP1shRNA可抑制pEGFP-VP1在细胞中的蛋白表达,进一步证明了干扰载体的靶向性。上述结果为进一步研究EMCV的感染和复制机制奠定了基础。
- 冯若飞李向茸张海霞张蕾马忠仁王永录
- 关键词：脑心肌炎病毒RNA干扰SHRNAVP1基因
