- GM-CSF对乳腺癌患者化疗后外周血B细胞CDR3库的影响
- 目的:利用高通量测序技术检测早期乳腺癌患者化疗期间使用GM-CSF前后BCR CDR3受体库变化水平,探讨GM-CSF对B细胞数目及功能的影响。方法:以活检确诊的T1N0M0期乳腺癌患者为研究对象,分别采集2例早期乳腺癌...
- 张天孙素红姚新生
- 关键词：GM-CSF高通量测序技术
- 文献传递
- GM-CSF对乳腺癌患者化疗后外周血B细胞CDR3库的影响
- 目的:利用高通量测序技术检测早期乳腺癌患者化疗期间使用GM-CSF前后BCR CDR3受体库变化水平,探讨GM-CSF对B细胞数目及功能的影响.方法:以活检确诊的T1N0M0期乳腺癌患者为研究对象,分别采集2例早期乳腺癌...
- 张天孙素红姚新生
- 关键词：GM-CSF高通量测序技术
- 乳腺癌患者化疗前后外周血B细胞BCRH链CDR3受体库动态变化特征
- 目的 :用高通量测序技术对早期乳腺癌患者化疗前后外周血B细胞BCR H链CDR3受体库进行分析,探讨化疗对乳腺癌患者外周血B细胞受体库的影响。方法 :以3例进行TAC 6期化疗方案的T1N0M0期乳腺癌患者(P1、P2、...
- 李月红张天姚新生
- 关键词：乳腺癌化疗高通量测序技术
- 文献传递
- 早期乳腺癌化疗前后TCRβ链CDR3受体库动态监测研究
- 目的：利用高通量测序技术检测早期乳腺癌患者化疗前后TCRβ链CDR3受体库变化水平,初步探讨化疗对T细胞功能的影响。方法：以活检确诊的T1N0M0期乳腺癌患者为研究对象,分别采集3例早期乳腺癌患者(P1、P2和P3)TA...
- 杨丽文张天姚新生
- 关键词：乳腺癌高通量测序
- 基于荧光定量PCRDNA熔解曲线技术分析浸润性导管乳腺癌患者外周血和肿瘤组织TCR beta链CDR3谱系（英文）被引量：4
- 2016年
- 目的采用TCR beta链CDR3谱系荧光定量PCR的DNA熔解曲线技术,探讨浸润性导管乳腺癌患者外周血T细胞和肿瘤组织T细胞之间TRBV基因表达情况。方法从遵义医学院附属医院甲乳外科采集乳腺癌志愿患者的乳腺肿瘤组织和外周血样本,选取病理诊断为浸润性导管癌的志愿患者23例,免疫组织化学检测ER、PR、PS2、C-erb B-2、nm23、P53和Ki-67的表达。分离每位志愿患者外周血单个核细胞(PBMCs),提取PBMCs和肿瘤部位组织总RNA,逆转录为c DNA,荧光定量PCR技术扩增各c DNA样本的TCR beta链CDR3区,DNA熔解曲线法对比分析各样本TRBV基因家族的表达情况。结果 23例浸润性导管乳腺癌志愿患者,外周血样本中TRBV6、TRBV8、TRBV12、TRBV14和TRBV24表达超过50%,肿瘤组织样本中TRBV6、TRBV12、TRBV14和TRBV24表达超过50%。选取的23例样本中的20例,其外周血和肿瘤组织均过表达相同的TRBV基因家族,但总TRBV基因家族的表达与ER、PR、PS2、C-erb B-2、nm2、P53和Ki-67的阳性或阴性没有明显的相关性。结论浸润性导管乳腺癌患者的外周血和肿瘤组织之间TRBV基因表达出现一致性,但表现出复杂多样性,与乳腺肿瘤相关抗原无明显相关,其机制可能与乳腺癌个体化的全身和局部免疫应答相关,对乳腺癌外周血和肿瘤组织部位特异T细胞TRBV基因表达探讨可为乳腺癌的免疫机制和个体化治疗提供理论基础。
- 贺晓燕孙素红杨伟明唐文台马锐张天姚新生
- 关键词：TCR
- 乳腺癌患者化疗前后外周血B细胞BCR H链CDR3受体库动态变化特征
- 目的：用高通量测序技术对早期乳腺癌患者化疗前后外周血B细胞BCR H链CDR3受体库进行分析,探讨化疗对乳腺癌患者外周血B细胞受体库的影响。方法：以3例进行TAC 6期化疗方案的T1N0M0期乳腺癌患者(P1、P2、P3...
- 李月红张天姚新生
- 关键词：乳腺癌化疗高通量测序技术
- esp1基因Tet-on载体的构建及在Hela中的可调控性表达
- 2014年
- 目的构建esp1-pTRE-d2EGFP可调控真核表达载体,检测其在Hela细胞内的表达情况。方法将esp1导入pTRE-d2EGFP载体中。用脂质体将pTet-on、PTK-Hyg和esp1-pTRE-d2EGFP共转染入Hela细胞,以不同浓度的DOX诱导,用Real-time PCR、Western blot检测esp1表达水平。结果我们构建的可调控性表达载体能在Hela细胞内表达,不同浓度药物诱导的esp1表达水平明显不同。结论成功构建了esp1-pTRE-d2EGFP真核表达载体,并可在Hela细胞内表达。为进一步观察esp1与肿瘤发生、发展的关系奠定了基础。
- 张天
- 关键词：HELA
- 乳腺癌患者化疗前后外周血B细胞BCR H-CDR3受体库动态变化特征被引量：1
- 2018年
- 本文利用高通量测序(high-throughput sequencing,HTS)技术对早期乳腺癌患者化疗前后,随着WBC总数及淋巴细胞的变化对外周血B细胞BCR H-CDR3受体库进行分析,探讨化疗对其的影响。分别采集和分离3例进行TAC化疗的乳腺癌患者在化疗前、中、后的PBMC,提取其总DNA并采用多重PCR建库和制备BCR H-CDR3受体库后Illumina检测CDR3序列并分析。结果发现:1.TAC化疗前患者WBC、淋巴细胞绝对值均正常,而化疗中、后WBC、淋巴细胞绝对值虽仍正常,但较化疗前下降;2.P2化疗中较化疗前受体库多样性有所下降,化疗后较化疗中稍升高,但仍明显低于化疗前;P1、P3化疗中多样性都比化疗前高;化疗后,P1较化疗中降低,但高于化疗前,而P3化疗后较化疗中明显升高;3.3例患者化疗后出现不同程度IGHV取用丢失。由此提示:1.化疗后随着WBC、淋巴细胞绝对值的下降,P2乳腺癌患者在化疗中及化疗后受体库的多样性在整体水平上较化疗前有所下降,考虑是TAC对受体库的多样性造成损伤;而P1、P3化疗中与化疗后B细胞受体库多样性整体上都较化疗前高,可能是机体对化疗药物产生的应激反应不一致,TAC杀伤了高频克隆的B细胞,间接增加了CDR3受体库的多样性;2.3例早期乳腺癌患者化疗后出现不同程度IGHV取用丢失,提示化疗可能对B细胞IGHV表达和取用产生了一定的影响,并且IGHV-IGHJ家族取用和配对在不同时间点存在优势配对(>0.03)现象,可能与乳腺癌相关抗原诱导有关;3.HTS检测化疗前后B细胞H-CDR3受体库变化可为揭示化疗对患者B细胞应答的影响及B细胞的免疫状态提供辅助。
- 段芳芳孙素红张天李月红姚新生
- 关键词：高通量测序技术乳腺癌化疗BCR
- 早期乳腺癌化疗前后TCRβ链CDR3受体库动态监测研究
- 目的 :利用高通量测序技术检测早期乳腺癌患者化疗前后TCRβ链CDR3受体库变化水平,初步探讨化疗对T细胞功能的影响。方法 :以活检确诊的T1N0M0期乳腺癌患者为研究对象,分别采集3例早期乳腺癌患者(P1、P2和P3)...
- 杨丽文张天姚新生
- 关键词：乳腺癌高通量测序
- 文献传递
- 早期乳腺癌患者化疗前、后及GM-CSF辅助治疗中外周血B细胞受体库的变化分析
- 目的：初步分析早期乳腺癌患者化疗前、后，随着白细胞总数下降，外周血B细胞受体库多样性、克隆性和组成特征等变化，以及患者在应用粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子（granulocyte-macrophage colony sti...
- 张天
- 关键词：早期乳腺癌高通量测序技术早期化疗
