程成
- 作品数：10 被引量：4H指数：2
- 供职机构：齐鲁工业大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：轻工技术与工程化学工程生物学更多>>
- 一种调控产长链二元酸的基因及其应用
- 本发明涉及一种调控产长链二元酸的基因及其应用。一种长链脂肪酸转运蛋白基因pxa1p，核苷酸序列如SEQ？ID？NO.1所示；其表达的长链脂肪酸转运蛋白Pxa1p，氨基酸序列如SEQ？ID？NO.2所示。本发明还公开了上述...
- 王瑞明汪俊卿程成王腾飞杨晓慧马春玲杜鹏石莹
- 文献传递
- 一种联产长链二元酸和1,3‑丙二醇的工程菌及其构建方法
- 本发明涉及一种联产长链二元酸和1,3‑丙二醇的工程菌及其构建方法，通过转化重组质粒制备，重组质粒通过PCR扩增获得甘油脱水酶基因，与PCR扩增获得的启动子pGAPg重叠连接，获得pGAPg‑GD片段；通过PCR扩增获得1...
- 汪俊卿郭维伟彭健王瑞明杨晓慧石莹程成修翔
- 文献传递
- 热带假丝酵母ctpxa1基因缺失菌的构建及对长链二元酸积累的影响被引量：2
- 2017年
- Pxa1p为酿酒酵母Saccharomyces cerevisiae过氧化物酶体上的膜蛋白,与Pxa2p组成二聚体,参与转运长链脂肪酸进入过氧化物酶体过程。热带假丝酵母能够发酵烷烃和脂肪酸生产长链二元酸,而过氧化物酶体中发生的β-氧化会消耗产生的长链二元酸造成产率降低。本研究以热带假丝酵母Candida tropicalis 1798为宿主菌,通过基于PCR片段的同源单交换法,快速构建ctpxa1基因敲除菌株C.tropicalis 1798-pxa1。利用半定量RT-PCR技术,检测ctpxa1基因在C.tropicalis 1798、C.tropicalis 1798-pxa1的表达量,灰度值比值为2.03,表明ctpxa1在C.tropicalis 1798-pxa1中的表达被弱化。经144 h发酵,C.tropicalis 1798-pxa1比C.tropicalis 1798的十二碳二元酸产量明显提升,其产出浓度为10.3 g/L,比野生型菌株C.tropicalis 1798提高了94.3%。
- 程成汪俊卿王腾飞杨晓慧王瑞明
- 关键词：热带假丝酵母长链二元酸过氧化物酶体
- 热带假丝酵母在利用不饱和油脂产十二碳二元酸的应用
- 本发明涉及热带假丝酵母在利用不饱和油脂产十二碳二元酸的应用。所述热带假丝酵母(Candida tropicalis)来源于中国工业微生物菌种保藏管理中心，菌种编号为CICC 1798。本发明首次发现热带假丝酵母(Cand...
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- 热带假丝酵母pxa1基因敲除及对长链二元酸产量的影响
- 长链二元酸（Long chain dicarboxylic acid，DCA）是精细化工中有着重要作用的一类中间体。热带假丝酵母（Candida tropicalis）通过微生物发酵法氧化烷烃和脂肪酸产生DCA，但合成D...
- 程成
- 关键词：热带假丝酵母过氧化物酶体十二碳二元酸基因敲除微生物发酵法
- 一种调控热带假丝酵母的长链脂肪酸转运的基因及其应用
- 本发明涉及一种调控热带假丝酵母的长链脂肪酸转运的基因及其应用。所述调控热带假丝酵母的长链脂肪酸转运的基因fat1p，核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。所述长链脂肪酸转运蛋白Fat1p，氨基酸序列如SEQ ID NO...
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- 文献传递
- 热带假丝酵母在利用不饱和油脂产十二碳二元酸的应用
- 本发明涉及热带假丝酵母在利用不饱和油脂产十二碳二元酸的应用。所述热带假丝酵母(Candida？tropicalis)来源于中国工业微生物菌种保藏管理中心，菌种编号为CICC？1798。本发明首次发现热带假丝酵母(Cand...
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- 海藻糖合酶在毕赤酵母表面的展示被引量：2
- 2016年
- 海藻糖合酶能够利用麦芽糖一步法转化生产海藻糖,其底物专一性较高,该酶体系生产工艺简单,不受底物麦芽糖浓度的影响,是工业生产海藻糖的首选。为获得具有生产海藻糖合酶能力的毕赤酵母表面展示载体,实验以筛选的Pseudomonas putide P06海藻糖合酶基因为模板,PCR扩增得到海藻糖合酶基因(tres,2 064 bp),连接至pPICZαA质粒中,获得重组质粒pPICZαA-tres。以来自酿酒酵母的共价连接细胞壁的Pir系列蛋白的Pir1p成熟肽蛋白作为毕赤酵母表面展示的锚定蛋白,利用PCR技术扩增得到pir1p(847 bp),连接至重组质粒pPICZαA-tres中,获得重组质粒pPICZαA-tres-pir1p。将重组质粒电击转入毕赤酵母GS115中,利用α-factor信号肽将蛋白引导分泌至细胞壁展示于毕赤酵母表面。通过Zeocin抗性筛选,挑选出阳性克隆子并摇瓶发酵。发酵产物经离心、破碎并使用昆布多糖酶水解,洗脱,结果显示,SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳分析可见明显融合蛋白条带,表明海藻糖合酶已成功地锚定在毕赤酵母。将重组毕赤酵母使用p H 7.5的缓冲液清洗并重悬,与底物浓度为30%的麦芽糖在30℃~60℃水浴条件下作用2 h,反应产物利用HPLC检测,能够检测到酶学活性。在优化后的条件p H 7.5,50℃,表面展示海藻糖合酶酶活达到300.65 U/g。40℃~50℃酶活较稳定,保温60 min,残留酶活相对活力达75%以上;最适反应p H值为7.5,并在碱性环境下稳定。
- 李梦悦王腾飞汪俊卿赵一瑾程成王瑞明
- 关键词：海藻糖海藻糖合酶毕赤酵母
- 一种联产长链二元酸和1,3-丙二醇的工程菌及其构建方法
- 本发明涉及一种联产长链二元酸和1,3‑丙二醇的工程菌及其构建方法，通过转化重组质粒制备，重组质粒通过PCR扩增获得甘油脱水酶基因，与PCR扩增获得的启动子pGAPg重叠连接，获得pGAPg‑GD片段；通过PCR扩增获得1...
- 汪俊卿郭维伟彭健王瑞明杨晓慧石莹程成修翔
- 文献传递
- 一种调控热带假丝酵母的长链脂肪酸转运的基因及其应用
- 本发明涉及一种调控热带假丝酵母的长链脂肪酸转运的基因及其应用。所述调控热带假丝酵母的长链脂肪酸转运的基因fat1p，核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。所述长链脂肪酸转运蛋白Fat1p，氨基酸序列如SEQ ID NO...
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