张娅楠
- 作品数：6 被引量：8H指数：2
- 供职机构：上海海洋大学水产与生命学院更多>>
- 发文基金：国家现代农业产业技术体系建设项目国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生环境科学与工程更多>>
- 草鱼肾细胞电转条件的优化及草鱼呼肠孤病毒NS26蛋白的瞬时表达被引量：2
- 2014年
- 本研究先以pEGFP-N1载体质粒中的绿色荧光蛋白基因为报道基因进行电转实验,优化电压、脉冲时间、质粒添加量和电击次数等电转条件,确立最佳条件。实验表明,细胞密度为1.5×107/mL时,取200μl在0.2cm电击杯中进行电击转染,电压为200V,脉冲时间为45ms,添加质粒30μg,电击1次时,转染效果最佳。提取草鱼呼肠孤病毒基因组总RNA,以其逆转录的cDNA作为扩增模板,设计特异引物扩增出GCRV非结构蛋白NS26的基因片段,重组到pEGFP-N1载体上得到重组质粒pEGFP-NS26,将其导入CIK细胞中用电转法高效表达了EGFPNS26融合蛋白。本研究为进一步研究NS26的功能奠定了基础。
- 李炎张娅楠吕利群
- 关键词：电转染草鱼呼肠孤病毒重组质粒
- 一种环境友好的防治鲫鱼卵水霉病药物的临床应用研究
- 应用形态学和ITS rDNA序列分析的方法对鲫鱼卵上生长的疑似水霉菌进行分离鉴定,结果表明从患病的鱼卵上可以分离出一株丝状真菌,菌丝透明、无隔而有分支,15℃和20℃分别能进行有性繁殖和无性繁殖,确定其为水霉菌。通过药物...
- 张楠张娅楠王浩沈晓宝徐丽娟唐明虎吕利群
- 关键词：水霉
- 草鱼呼肠孤病毒NS26蛋白与宿主细胞相互作用的研究
- NS26 是水生呼肠孤病毒特有的蛋白质，在其他呼肠孤病毒中没有同源蛋白。为了研究NS26 在病毒侵染宿主过程的分子生物学机制，本研究采用酵母双杂交技术筛选与NS26 相互作用的蛋白，并进一步探讨筛选出的蛋白质与NS26 ...
- 鲁建飞王浩张娅楠吕利群
- 关键词：草鱼呼肠孤病毒相互作用
- 草鱼Ajuba蛋白在草鱼呼肠孤病毒感染CIK细胞过程中的表达及功能探讨
- Ajuba属于LIM蛋白第三类中的Zyxin蛋白家族，含有双锌指结构的LIM结构域，其主要作用是参与蛋白质之间的相互作用。Ajuba影响着生物体生长发育的基本过程——有丝分裂，调控细胞周期;是细胞骨架相关蛋白，参与细胞粘...
- 张娅楠
- 关键词：草鱼出血病呼肠孤病毒
- 利用酵母双杂交技术研究Ⅲ型草鱼呼肠孤病毒VP55蛋白的功能
- 草鱼是中国淡水养殖主要品种之一。引起草鱼出血病的草鱼呼肠孤病毒（GCRV）危害大、致死率高,是淡水养殖产业最为突出的问题之一。GCRV分为Ⅰ型、Ⅱ型、Ⅲ型,具有混合感染现象。由于不同呼肠孤病毒侵染与繁殖途径一致,抑制病毒...
- 张娅楠王浩吕利群
- 关键词：S7酵母双杂交
- 文献传递
- 草鱼呼肠孤病毒GCRV VP56相互作用蛋白的鉴定被引量：5
- 2016年
- 为研究Ⅱ型草鱼呼肠孤病毒外纤维蛋白VP56与宿主蛋白的相互作用,实验采用酵母双杂交Gal4系统鉴定与VP56相互作用的草鱼蛋白。首先利用RT-PCR技术从Ⅱ型GCRV感染的草鱼肾细胞中扩增目的基因VP56,构建p GBKT7-VP56诱饵表达载体;在酵母菌株中检测其自激活性后,以VP56为诱饵在草鱼酵母双杂交文库中筛选阳性菌株,并对阳性克隆的序列进行分析。实验也克隆了草鱼JAM-A(Gc JAM-A)基因,并构建p GADT7-Gc JAM-A载体,在酵母中研究草鱼Gc JAM-A与病毒蛋白VP56相互作用的可能性。研究表明构建的诱饵质粒p GBKT7-VP56无自激活作用,可以应用于酵母双杂交筛选;从草鱼肾细胞文库中筛选得到9株阳性克隆,基因测序及序列分析确定其中包含草鱼7个细胞内蛋白和1个细胞外基质蛋白;VP56蛋白与Gc JAM-A蛋白在酵母中不能发生相互作用。本研究初步确定了与Ⅱ型GCRV蛋白VP56存在潜在相互作用的宿主蛋白,为深入探讨VP56蛋白在Ⅱ型GCRV感染宿主过程中的生物学功能奠定了基础。
- 喻飞王浩宗乾坤张娅楠刘海云陈百朋吕利群
- 关键词：草鱼呼肠孤病毒酵母双杂交
