戊型肝炎病毒中和抗体8C11/8H3的协同作用机制和结构基础研究 戊型肝炎病毒(Hepatitis E virus,HEV)是一种无包膜的单链正义RNA病毒,具有四种基因型,其宿主范围极为广泛,由该病毒引起的戊型肝炎(HepatitisE,HE)是一种人畜共患疾病。戊型肝炎主要流行于发... 郑明华关键词:戊型肝炎 中和抗体 衣壳蛋白 免疫复合物 杆状病毒-昆虫细胞系统表达的戊型肝炎病毒衣壳蛋白p495的纯化、结构解析以及免疫原性分析 被引量:4 2016年 本研究目的是利用杆状病毒-昆虫细胞表达系统建立戊型肝炎病毒(HEV)p495蛋白的高效稳定表达和可放大纯化的方法,研究其理化性质和解析三维结构,与上市戊肝疫苗益可宁(Hecolin)进行免疫原性的比较。本研究选择基因1型HEV毒株的开放读码框2(ORF2)的aa112-606片段构建杆状病毒,感染昆虫细胞进行重组蛋白的表达,经过PEG沉淀和阴离子交换层析的纯化,获得纯度为95%以上的p495蛋白,每升细胞培养液最终获得15mg的目的蛋白。经ELISA、分析超离、分子排阻色谱和电镜负染等分析显示p495蛋白具有良好的抗原性且呈现为均一的病毒样颗粒(VLP),沉降系数为51.3S,颗粒直径约20nm。冷冻电镜三维结构解析获得分辨率为3.8的三维结构,揭示p495形成了T=1的等二十面体结构,与已报道的晶体结构相一致。小鼠免疫实验表明p495蛋白与益可宁中p239抗原的免疫原性相当。本研究为进一步开展HEV的受体鉴定、表位结构研究以及疫苗改进等奠定良好的基础。 林庆山 蒋婕 李婷婷 张玉云 张振勇 郑明华 王凯航 郑清炳 俞海 顾颖 夏宁邵 李少伟关键词:戊型肝炎病毒 病毒样颗粒 真核表达系统 免疫应答 戊型肝炎病毒衣壳蛋白及其中和表位的结构研究进展 被引量:1 2016年 戊型肝炎是由戊型肝炎病毒(Hepatitis E virus,HEV)引起的病毒性肝炎,被证实为人兽共患病,该病症对免疫力低下人群和已有基础性肝病的患者的危害更为显著。戊肝病毒主要通过粪口途径传播,猪是其主要的天然宿主。近年来,关于戊肝病毒的衣壳蛋白及其表位结构的研究取得了重要的进展,对于戊肝病毒的病毒学研究和戊肝疫苗的机制探讨起着重要的指导意义。本文将综述HEV病毒衣壳蛋白的结构研究和中和表位的结构基础,着重说明戊肝病毒中和表位存在型特异性和型交叉两种特征,提示型交叉表位与人兽共患现象的关系。 郑明华 王凯航 李琼 张晓 李少伟 夏宁邵关键词:戊型肝炎病毒 人兽共患 中和表位