陈锡
- 作品数：10 被引量：22H指数：3
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- 发文基金：贵州省科技计划项目国家自然科学基金贵州省科技厅重大专项更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 高羊茅FaCCA1基因克隆、表达分析及基因编码蛋白的亚细胞定位被引量：1
- 2021年
- 生物钟节律基因(circadian clock gene)CCA1在植物光周期途径中具有十分重要的作用。以高羊茅‘黔草1号’cDNA为模板,利用同源扩增结合cDNA末端快速扩增(rapid amplification of cDNA ends,RACE)技术从高羊茅中获得与拟南芥CCA1高度同源的cDNA全长序列,命名为FaCCA1。利用BLAST在线软件对该基因进行生物信息学分析,通过农杆菌介导的烟草瞬时表达,观察Fa CCA1基因编码蛋白的亚细胞定位,并利用RT-qPCR技术分析不同光照条件下FaCCA1基因表达水平。结果表明,该序列cDNA全长为2433bp,含有一个完整的开放阅读框,长度为2148 bp,编码蛋白含有715个氨基酸,蛋白分子量为77.80 kDa,理论等电点为5.91。亚细胞定位结果显示FaCCA1基因所编码的蛋白定位于细胞核。系统进化树分析表明FaCCA1与禾本科植物的CCA1蛋白亲缘关系较近,其中与大麦亲缘关系最近,达到80%以上。FaCCA1基因表达量在长日照高于短日照,表达水平出现昼夜节律钟变化模式,表明高羊茅FaCCA1表达量受光周期调控。这为高羊茅FaCCA1基因的功能研究提供参考资料,为高羊茅的分子育种利用提供了改良靶标。
- 陈锡陈锡刘晓霞舒健虹舒健虹王小利
- 关键词：高羊茅亚细胞定位
- 高羊茅FaFT2基因克隆及表达分析被引量：5
- 2017年
- 以高羊茅(Festuca arundinacea)‘黔草1号’为材料,利用c DNA末端快速扩增(RACE)技术克隆了调控植物开花关键基因FLOWERING LOCUS T(FT),命名为FaFT2。序列分析结果表明,FaFT2基因cDNA全长1 073 bp,具有开放阅读框为537bp,编码一条含178个氨基酸残基的蛋白质。该蛋白序列比对发现,所推测的FaFT2氨基酸序列具有1个保守的磷脂酰乙醇胺结合蛋白(PEBP)结构域。系统遗传进化树分析表明FaFT2与黑麦草、节节麦和二穗短柄草的FT亲缘关系较近。利用实时荧光定量PCR技术分析高羊茅苗期FaFT2表达水平,发现该基因在光照时段表达水平持续上调,黑暗时段表达水平下调。由此推测,FaFT2基因与高羊茅光周期敏感性具有一定的相关性,可能在光周期调控开花途径中发挥作用。
- 陈锡陈锡赵德刚李小冬李小冬吴佳海
- 关键词：高羊茅基因克隆生物信息学分析
- 朝仓花椒叶水浸提物对白菜种子萌发及幼苗生长的影响被引量：8
- 2016年
- 就朝仓花椒(Zanthoxylum piperitum DC.var.inerme Makino)叶水浸提物对4种白菜种子萌发和幼苗生长的影响进行了研究。结果表明,花椒叶水浸提物显著抑制白菜种子萌发和幼苗生长,且水浸提液浓度越高,抑制作用越强。水浸提液稀释4倍,白菜幼苗生长仍受到显著抑制,过氧化氢酶(CAT)、过氧化物酶(POD)、超氧化物歧化酶(SOD)活性均显著降低,丙二醛(MDA)含量显著增高。说明白菜萌发及幼苗生长受到抑制是由于白菜幼苗的酶系统遭受破坏所致。
- 陈锡曾晓芳赵德刚
- 关键词：浸提液白菜种子萌发
- 高羊茅FaGST1基因克隆、亚细胞定位及表达分析被引量：3
- 2020年
- 【目的】克隆高羊茅谷胱甘肽-S-转移酶(GST)基因FaGST1,并进行亚细胞定位及表达分析,为深入研究该基因的抗逆分子调控提供理论依据。【方法】采用RT-PCR和RACE从高羊茅黔草1号中克隆FaGST1基因,对其进行生物信息学分析,构建植物融合表达载体pCAMBIA1300-FaGST1-GFP,通过农杆菌介导转入烟草叶片表皮细胞,观察FaGST1基因亚细胞定位情况,并利用实时荧光定量PCR检测高盐、高温、干旱及低氮胁迫处理下高羊茅叶片中该基因的表达情况。【结果】克隆获得FaGST1基因cDNA全长序列为1003 bp,开放阅读框(ORF)为681 bp,编码227个氨基酸残基,其编码蛋白的分子量约25.60 kD,理论等电点(pI)为5.58,亲水指数平均值-0.342,不稳定系数32.96,为稳定的亲水蛋白,定位于细胞核。FaGST1蛋白二级结构中,α-螺旋占50.44%,β-转角占5.75%,无规则卷曲占30.54%,延伸链占13.27%。FaGST1蛋白的保守结构区域为含有G位点的N末端结构域和含有H位点的C末端结构域。FaGST1蛋白与黑麦草GST蛋白(AMY26594.1)的氨基酸序列相似性最高,为93%,其次是海滨雀稗GST蛋白(AMN87043.1),为91%,与玉米(ACG39365.1)和小米(KQK86785.1)GST蛋白氨基酸序列相似性均在80%以上,与系统发育进化树分析结果基本相符,即FaGST1蛋白与黑麦草、海滨雀稗、玉米和小米等禾本科植物GST蛋白亲缘关系较近。高羊茅FaGST1基因在干旱、高温、高盐胁迫和低氮胁迫处理下均出现抑制表达。【结论】FaGST1基因负向调控高羊茅逆境胁迫响应。
- 陈锡陈锡陈莹赵德刚袁暘暘吴佳海
- 关键词：高羊茅基因克隆亚细胞定位非生物胁迫
- 高羊茅FaCONSTANS基因的表达及功能分析被引量：2
- 2021年
- 植物由营养生长向生殖生长转变过程中光周期调控起着重要的作用。CONSTANS (CO)是光周期途径中的特有基因,为探讨高羊茅FaCONSTANS (FaCO)基因响应日照长短从而启动植物开花的机理,利用实时荧光定量qRT-PCR技术分析在长日照、短日照、持续光照、持续黑暗条件下FaCO基因的表达水平。构建过表达载体p1300-FaCO,利用农杆菌介导法遗传转化拟南芥,构建沉默载体p1300-FaCO-RNAi遗传转化高羊茅。结果表明,FaCO基因的表达受光周期调控,与生物钟控制的昼夜节律相关。在长日照条件下FaCO基因促进拟南芥开花,且恢复拟南芥突变体开花表型。RNAi沉默FaCO基因的高羊茅转基因植株晚花或者一直处于营养生长阶段。本研究初步探究高羊茅FaCO基因对开花过程的调控,这将有助于更进一步了解该基因的生物学功能。
- 陈锡陈锡刘晓霞舒健虹王小利舒健虹
- 关键词：高羊茅
- FaGST基因过量表达获得拟南芥转基因植株被引量：1
- 2022年
- 【目的】探明FaGST基因的功能和分子调控机制,为其后期的抗性利用与研究提供科学依据。【方法】利用前期构建的pCAMBIA1300-35S空载体和pCAMBIA1300-35S-FaGST过表达载体,将其转化感受态(DH5α)细胞后导入农杆菌GV3101,利用花序侵染法转化拟南芥,通过潮霉素(Hyp)进行筛选、PCR鉴定,并利用实时荧光定量PCR检测其表达量。【结果】FaGST基因成功导入拟南芥中,获得6株空载体转基因拟南芥植株和8株转FaGST基因拟南芥植株;8株转基因拟南芥植株的FaGST基因表达量为1.31~2.06,较野生型拟南芥植株表达量(1.00)显著或极显著提高。【结论】成功获得拟南芥转基因纯合植株,FaGST基因在拟南芥植株中已过量表达。
- 陈锡陈锡刘晓霞刘重阳吴溪姚文琴王小利
- 关键词：拟南芥表达量
- 黎平杂边禾dss-1突变体光合生理特性及基因定位研究
- 水稻作为重要的粮食作物，株高是其重要的农艺性状之一，研究水稻株高对水稻的稳产及高产具有重要意义，因此，鉴定和创制水稻新的矮秆突变体，对进一步揭示水稻株高生长发育的分子调控机制具有重要意义。本研究利用化学诱变剂甲基磺酸乙酯...
- 陈锡
- 关键词：油菜素内酯突变体光合生理特性基因定位
- 文献传递
- FaGST基因改良菊苣新种质创制
- 2022年
- 谷胱甘肽转移酶(glutathione transferases,GSTs)在植物抵御逆境胁迫中具有非常重要的作用。从高羊茅叶片中克隆获得FaGST基因,对其进行酶切位点分析,设计酶切引物,通过BamHI和PstI双酶切将目的基因片段连接在真核表达载体pCAMBIA 1300-35 S上,成功构建pCAMBIA 1300-35 S-FaGST过表达载体。将过表达载体转化感受态(DH 5α)细胞,利用农杆菌介导法遗传转化菊苣,通过潮霉素(Hyp)进行筛选后获得阳性植株。经PCR鉴定呈阳性,结果表明,pCAMBIA 1300-35 S-FaGST过表达载体已成功导入菊苣中,获得转基因菊苣阳性苗9株,利用实时荧光定量PCR对其表达量进行检测,发现该基因表达量明显提高。这将为下一步分析该基因的抗逆性研究奠定基础。
- 陈锡陈锡刘晓霞刘重阳吴溪姚文琴赵德刚赵德刚
- 关键词：菊苣
- 高羊茅Fa6-SFT基因克隆、亚细胞定位及表达分析被引量：1
- 2020年
- 蔗糖:果聚糖-6-果糖基转移酶(sucrose:fructan 6-fructosyl-transferase, 6-SFT)是禾本科植物中果聚糖合成的关键酶,在植物抵御干旱、低温、盐胁及氮胁等非生物逆境胁迫中起着十分重要的作用。为了探讨‘黔草1号’高羊茅(Festuca arundinacea)中6-SFT基因的分子机制,利用RT-PCR结合RACE技术(rapid amplification of cDNA ends)从高羊茅中克隆了6-SFT基因。序列分析显示, cDNA全长为2 375 bp,包含一个完整的开放阅读框1 860 bp,编码蛋白含有620个氨基酸,命名为Fa6-SFT。理化性质分析显示,其蛋白分子质量为68.20 kDa,理论等电点pI为5.61,属于酸性蛋白。保守结构域分析发现,由该基因推导的氨基酸序列具有糖基水解酶32 (glycosyl hydrolase family 32, GH32)家族保守结构域。蛋白多重序列比对及进化树分析发现,高羊茅Fa6-SFT与猫尾草、黑麦草和毒麦亲缘关系最近。亚细胞定位显示Fa6-SFT主要定位于细胞核和细胞膜。实时荧光定量PCR检测分析表明,干旱、高温、盐胁迫和氮胁迫等非生物胁迫均能调控Fa6-SFT基因的表达,推测高羊茅Fa6-SFT可能与非生物逆境胁迫密切相关。
- 陈锡赵德刚陈锡赵德刚袁旸旸王小利
- 关键词：基因克隆生物信息学分析亚细胞定位
- 贵州黎平杂边禾突变体dss-1光合生理特性与保护酶活性研究被引量：1
- 2016年
- 为探讨经EMS处理后获得的贵州黎平杂边禾小粒矮秆突变体dss-1(dwarf small seed-1)表观性状和生理生化变化,我们观测了突变体的农艺性状,测定了保护酶活性,并以LI-6400XT光合系统进行了光合生理特性分析。结果表明,与野生型相比,dss-1突变体表现出植株矮化、株型直立、叶色深绿、第二节间极度缩短、籽粒小而圆、穗长增加等性状。该突变体成熟期的光合速率(8.9μmol·m^(-2)·s^(-1))和叶绿素含量(4.8 mg/g FW)比野生型(光合速率为6.7μmol·m^(-2)·s^(-1),叶绿素含量为3.0 mg/g FW)高24.72%和37.5%;分蘖期突变体光合速率(18.7μmol·m^(-2)·s^(-1))和叶绿素含量(5.7 mg/g FW)比野生型(光合速率是16.8μmol·m^(-2)·s^(-1)和叶绿素含量是4.5 mg/g FW)增加了10.16%、21.05%。突变体dss-1的初始荧光产量(Fo)是175.1,最大光合效率(Fv/Fm)为0.79,比野生型(Fo为141.01,Fv/Fm为0.78)高19.50%和1.3%,电子传递速率(ETR)、PSII的光化学效率(ΦPSII)和光化学淬灭(q P)分别是96.73、0.16、0.71,均低于野生型(ETR是106.13、ΦPSII是0.20及q P是0.75)。dss-1突变体MDA含量为0.90 nmol/mg(FW),比野生型增加58%,差异达到极显著水平。说明dss-1突变基因与该突变体生理生化变化和表型特征具有一定相关性。
- 陈锡曾晓芳赵德刚
- 关键词：光合生理特性
