刘贵然
- 作品数：2 被引量：1H指数：1
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- 相关领域：医药卫生更多>>
- 糖尿病对人体肾脏形态变化的模糊综合评判被引量：1
- 1997年
- 糖尿病对人体肾脏形态变化的模糊综合评判王敏彦刘贵然刘建梅霍会川（河北医科大学石家庄０５００１７）糖尿病是一种常见的内分泌代谢病，基本病理生理改变是由于胰岛素绝对或相对不足，引起糖、脂肪、蛋白质和继发的维生素、水、电解质代谢紊乱。随着病程的延长会引起...
- 王敏彦刘贵然刘建梅霍会川
- 关键词：糖尿病肾脏模糊综合评判
- 人黑色素瘤抗原MAGE-3肿瘤疫苗的构建及其诱导HLA-A*0201转基因小鼠CTL活性的观察
- 2007年
- 目的通过基因工程的方法获得人黑色素瘤抗原MAGE-3的DNA和蛋白疫苗,并观察其对HLA-A*0201转基因小鼠的CTL活性的影响。方法用RT-PCR的方法,从人黑色素瘤细胞株A375中扩增MAGE-3的cDNA片段,分别将其插入到pcDNA3.1/V5-His真核和pET32a原核表达载体。将pcDNA-MAGE-3转染B16肿瘤细胞观察其是否能在真核细胞中表达;将pET32a-MAGE-3转化大肠杆菌BL21,经IPTG诱导,SDS-PAGE观察融合蛋白表达情况。并用镍柱亲和层析的方法纯化融合蛋白。然后,采用DNA疫苗初次免疫和蛋白疫苗加强的策略免疫HLA-A*0201转基因小鼠,LDH方法检测CTL活性。结果酶切结果证实,成功地构建了pcDNA-MAGE-3真核表达载体和pET32a-MAGE-3原核表达载体,并在真核细胞B16和原核细胞大肠杆菌中获稳定表达,原核表达产物为融合蛋白且分布于包涵体。用DNA疫苗进行初次免疫,镍柱纯化的融合蛋白加强免疫后,可成功地诱导HLA-A*0201转基因小鼠CTL活性。结论成功地获得了MAGE-3肿瘤抗原,为进一步完善MAGE-3肿瘤疫苗打下了基础。
- 宋淑霞刘贵然郑龙王俊霞刘福英
- 关键词：CTL活性
