王江林
- 作品数:7 被引量:9H指数:3
- 供职机构:广州医科大学更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金广州市教育科学规划课题广东省高等教育教学改革项目更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学更多>>
- 天然反义转录本TSPAN31调控CDK4基因表达及其对肝癌细胞侵袭和迁移的影响
- 目的: 四跨膜蛋白超家族(transmembrane4 super family,TM4SF)是一类小分子糖蛋白,具有四个高度疏水的跨膜结构域,目前在人类中已发现33个不同的TM4SF成员。四跨膜蛋白家族成员之间或与细...
- 王江林
- 关键词:肝癌CDK4基因基因表达细胞侵袭细胞迁移
- 天然反义转录本Tetraspanin31调控CDK4的分子机制
- 2019年
- 目的:探讨天然反义转录本Tetraspanin31调控CDK4的分子机制。方法:针对TSPAN31设计合成靶向干扰的siRNA,转染肝癌细胞,qRT-PCR和免疫印迹检测肝癌细胞实验组与对照组细胞CDK4的转录和翻译水平,免疫印迹检测细胞周期蛋白Cyclin D1、转录因子E2F1蛋白表达水平;在HEK293T细胞、Hela细胞中转染过表达TSPAN31全长、编码区及3’末端非翻译区质粒,qRT-PCR及免疫印迹检测CDK4基因转录和翻译水平。结果:与对照组相比,肝癌细胞siRNA干扰后TSPAN31蛋白相对表达量显著降低,CDK4相对表达量显著升高,Cyclin D1、E2F1蛋白相对表达量升高(均P<0.05)。与对照组相比,HEK293T细胞、Hela细胞转染过表达TSPAN313’末端非翻译区质粒组及过表达TSPAN31全长质粒组CDK4转录及翻译的相对表达水平显著降低(均P<0.05),而转染过表达TSPAN31编码区质粒组没有显著差异(均P>0.05)。结论:TSPAN31可在肝癌细胞中调控信号通路蛋白Cyclin D1、CDK4及E2F1蛋白表达,TSPAN31对CDK4的调控作用可能主要是通过转录产物的3’末端非翻译区进行的。
- 吕敏佳古蕾陈子鹏王江林孙雪萌赵青
- 关键词:CDK4肝癌细胞宫颈癌细胞
- 大麻素WIN55,212-2抑制SMMC-7721肝癌细胞增殖和侵袭迁移被引量:3
- 2016年
- 目的研究大麻素WIN55,212-2(WIN)对SMMC-7721肝癌细胞增殖、侵袭和迁移能力的影响,并探讨其分子机制。方法应用CCK-8法分析(0、1、5、10、20)μmol/L WIN对SMMC-7721细胞活力的影响;Hoechst33258染色荧光显微镜下观察各组细胞形态改变;异硫氰酸荧光素标记的膜联蛋白Ⅴ/碘化丙啶(annexin V-FITC/PI)双标记结合流式细胞术检测细胞凋亡;Western blot法检测细胞凋亡相关蛋白P53、P21、Bcl-2、Bax和磷酸化蛋白激酶B(p-AKT)、磷酸化细胞外信号调节激酶(p-ERK)的表达;采用TranswellTM侵袭实验及划痕实验检测细胞侵袭、迁移的能力,Western blot法检测基质金属蛋白酶14(MMP-14)蛋白水平。结果 WIN抑制SMMC-7721细胞增殖并诱导其凋亡,两者都具有剂量依赖性;WIN处理后的细胞,经Hoechst33258染色,可发现细胞核浓缩、破碎,引起明显细胞凋亡;凋亡相关蛋白P53、P21、Bax激活,抗凋亡蛋白Bcl-2水平下降;AKT、p-AKT、p-ERK水平下降,而ERK总蛋白无明显变化;与对照组比较,WIN处理后的SMMC-7721细胞侵袭和迁移的能力均显著降低,MMP-14蛋白水平也下降。结论 WIN能抑制SMMC-7721细胞增殖和诱导其凋亡,与WIN激活P53,抑制AKT、p-AKT、p-ERK表达有关。WIN通过下调MMP-14蛋白水平,抑制SMMC-7721细胞侵袭和迁移。
- 王江林邓远斐谭茵李恪发温博冠赵青
- 关键词:SMMC-7721细胞细胞增殖迁移
- 大麻素受体激动剂WIN55,212-2联合金诺芬对人肝癌细胞HepG2增殖与凋亡的影响被引量:3
- 2016年
- 目的探讨大麻素受体激动剂WIN55,212-2(WIN)联合金诺芬(AF)对人肝癌细胞Hep G2增殖和凋亡的影响,并对其机制进行初步研究。方法分别用5μmol/L WIN、0.25μmol/L AF、5μmol/L WIN联合0.25μmol/L AF处理Hep G2细胞24 h和48 h后,MTS法检测细胞活力;采用Annexin V-FITC和PI双染色法并通过流式细胞仪分析细胞凋亡;Western blot检测凋亡相关蛋白(Bcl-2、Bip、ATF4、PARP、Caspase-3、Caspase-8、Caspase-9)表达的变化。分别用5μmol/L WIN联合0.25μmol/L AF、Z-VAD-FMK以及Z-VAD-FMK预处理1 h后再用5μmol/L WIN联合0.25μmol/L AF处理Hep G2细胞24 h,Western blot检测蛋白PARP、Caspase-3、Caspase-8、Caspase-9的变化。结果与两药单独使用相比,WIN联合AF明显抑制细胞增殖,诱导细胞凋亡,可以引起Bcl-2蛋白表达水平下调,内质网应激反应相关蛋白Bip、ATF4蛋白表达水平上调,以及活化Caspase-3、Caspase-8、Caspase-9,引起PARP蛋白的切割。加入Caspase广谱抑制剂Z-VAD-FMK处理细胞后,能部分逆转联合用药的细胞凋亡比例。结论大麻素受体激动剂WIN联合AF能有效诱导肝癌细胞凋亡,其机制可能与Bcl-2表达下调、内质网应激反应和Caspase系统活化相关。
- 邓远斐王江林李丹赵青
- 关键词:金诺芬凋亡内质网应激反应
- 药物基因组学实验教学方法初探被引量:3
- 2020年
- 药物基因组学(pharmacogenomics,PGx)是精准医疗的重要组成部分,也是临床药师参与药物治疗为患者提供个体化药学服务的主要手段。文章介绍了广州医科大学药学院临床药学专业首次开设PGx课程,采用自编教学大纲、实验教材,以培养学生的药物基因检测实验操作能力、创新能力和结果解读能力为目标,通过教学评价探讨如何提高临床药学专业PGx实验课教学质量,从实践教学与理论、临床、科研相结合;到运用多种教学方法,分享教学成效和不足之处,为临床药学专业本科教育提供借鉴和参考。
- 杨欣何进王江林罗骞朱莉娜班莉黎行山李咏梅
- 关键词:药物基因组学实验教学教学方法
- 制备心脏祖细胞的方法
- 本发明提供了一种基于内源基因转录激活的心脏祖细胞直接重编程方法。所述方法具有较好的操作可行性和理论创新性,首次通过CRISPR/Cas9系统激活内源心脏发育相关转录因子GATA4、HAND2、MEF2C、TBX5和MEI...
- 余细勇王江林张灵敏
- 文献传递
- 制备心脏祖细胞的方法
- 本发明提供了一种基于内源基因转录激活的心脏祖细胞直接重编程方法。所述方法具有较好的操作可行性和理论创新性,首次通过CRISPR/Cas9系统激活内源心脏发育相关转录因子GATA4、HAND2、MEF2C、TBX5和MEI...
- 余细勇王江林张灵敏
- 文献传递