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罗艳云

作品数:3 被引量:5H指数:1
供职机构:中国医学科学院基础医学研究所更多>>
发文基金:国家自然科学基金全球变化研究国家重大科学研究计划国家重点基础研究发展计划更多>>
相关领域:医药卫生生物学更多>>

文献类型

  • 3篇中文期刊文章

领域

  • 2篇医药卫生
  • 1篇生物学

主题

  • 2篇基因
  • 2篇AAV
  • 1篇蛋白
  • 1篇蛋白质
  • 1篇调节蛋白
  • 1篇血睾屏障
  • 1篇支持细胞
  • 1篇特异
  • 1篇特异性
  • 1篇启动子
  • 1篇睾丸
  • 1篇睾丸组织
  • 1篇细胞
  • 1篇细胞间
  • 1篇细胞间连接
  • 1篇细胞连接
  • 1篇显微注射
  • 1篇腺相关病毒
  • 1篇相关蛋白
  • 1篇相关蛋白质

机构

  • 3篇中国医学科学...
  • 1篇山西医科大学

作者

  • 3篇罗艳云
  • 2篇王琳芳
  • 2篇宋伟
  • 2篇缪时英
  • 1篇付俊
  • 1篇杨涛

传媒

  • 2篇基础医学与临...
  • 1篇中国医学科学...

年份

  • 1篇2020
  • 1篇2019
  • 1篇2016
3 条 记 录,以下是 1-3
排序方式:
小鼠睾丸中细胞连接相关蛋白质的分析被引量:4
2016年
目的探讨细胞连接相关蛋白在不同发育阶段小鼠睾丸中的表达模式。方法 Western blot检测并分析1~6周龄小鼠睾丸、原代支持细胞以及小鼠精原细胞系GC1 spg、精母细胞系GC2 spg、间质细胞系TM3、支持细胞系TM4等4种生殖相关细胞系中细胞连接相关蛋白的表达水平。结果小鼠睾丸曲细精管中支持细胞间细胞连接相关膜蛋白连接黏附分子A、紧密连接蛋白Occludin和Claudin,以及支持细胞-生精细胞间细胞连接相关膜蛋白连接黏附分子C、连接蛋白Nectin-3和钙黏附蛋白E的表达表现出明显的阶段特异性。而参与细胞连接的调节蛋白紧密连接蛋白ZO-1、ZO-2、Afadin、β链蛋白和CD2相关蛋白在睾丸的不同发育阶段以及生殖细胞系中表达无差异。结论小鼠睾丸曲细精管中支持细胞间以及支持细胞-生精细胞间细胞连接相关的膜蛋白多表现出明显的阶段特异性。而参与细胞连接的调节蛋白在睾丸的不同发育阶段中表达无差异。
付俊罗艳云缪时英王琳芳
关键词:血睾屏障调节蛋白
小鼠生精细胞特异表达载体AAV-Dazl-RFP-Flag的构建及表达验证
2020年
目的构建含有生精细胞特异启动子Dazl的真核报告基因表达载体AAV-Dazl-RFP-Flag,研究生精细胞特异启动子Dazl在生精细胞中的启动效果。方法通过同源重组的方法对腺相关病毒载体AAV-CMV-RFP-Flag进行改造,构建小鼠生精细胞特异表达载体AAV-Dazl-RFP-Flag。在体外,转染GC1-spg野生型细胞和HEK-293T细胞,通过免疫荧光、q-PCR、Western blot验证AAV-Dazl-RFP-Flag在体外的表达特异性。在体内,将AAV-Dazl-RFP-Flag进行腺相关病毒(AAV)包装,通过显微注射技术将AAV注射到小鼠睾丸内,通过q-PCR检测AAV-Dazl-RFP-Flag在体内的表达特异性。结果成功构建了AAV-Dazl-RFP-Flag表达载体,并在体内、外水平验证了AAV-Dazl-RFP-Flag的表达。结论小鼠生精细胞特异表达载体AAV-Dazl-RFP-Flag可以在生精细胞中特异性表达,为雄性生殖不育的基因治疗提供更高效的载体工具。
李雅惠李凯罗艳云李梦真邙新雨宋伟杨涛
关键词:DAZL启动子基因治疗精子发生
腺相关病毒介导的体内睾丸组织基因特异性敲除系统的建立被引量:1
2019年
目的建立一套可用于体内睾丸组织特异性敲除基因的系统。方法利用同源重组技术将CRISPR/Cas9系统中sgRNA功能元件插入到AAV表达载体,将人源Wee1 2#sgRNA构建入改造的AAV-sgRNA(新版)载体中进行病毒包装,并感染稳定表达Cas9的HeLa-spCas9细胞验证该载体的基因敲除效率。筛选睾丸组织特异表达基因Sycp3的sgRNA靶点,构建入AAV-sgRNA(新版)载体中,进行病毒包装,利用显微注射技术将病毒注射入小鼠睾丸组织曲细精管内,通过T7E1分析体内细胞的基因敲除效果。结果构建成功的AAV-sgRNA载体能够进行病毒包装并在体外细胞水平上对人源Wee1进行基因编辑,与慢病毒介导的CRISPR/Cas9系统中的载体编辑效率相比无明显差异。同时,该系统能在体内水平对Sycp3进行基因编辑。结论成功建立一套可用于在体内睾丸组织中进行特异性敲除目标基因的系统,为生殖体内功能研究提供一个新的思路和方法。
邹定峰罗艳云李凯卢艳李永玲缪时英王琳芳宋伟
关键词:CRISPRAAV显微注射
共1页<1>
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