王敏
- 作品数：5 被引量：15H指数：2
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- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 香椿细胞学研究——染色体数目鉴定被引量：4
- 1993年
- 一、目的与材料方法 香椿[Toona sinensis(A.Juss)Roem.],楝科香椿属,多年生落叶乔木。原产中国,分布于亚洲和大洋洲,我国栽培广泛。近年来,随市场需求增加,冬春保护地栽培香椿在各地也有发展。 香椿、古名(木屯)(木熏)、别名椿芽。营养丰富,且具有芳香气味,可炒食、凉拌、油炸、干制和淹渍,风味甚佳。我国古代就开始利用香椿,宋代《木草图经》(公元11世纪)记有“椿木实,而叶香,可(口敢)。”但迄今,对香椿研究甚少,香椿染色体数目至今尚未最后确定。为此,对香椿染色体数目进行了鉴定,为香椿进一步开发利用,开展遗传育种以及分类研究提供依据。 试验材料取自河北省,为华北地区栽培的香椿。 以香椿茎尖为试材,在室温下,按以下步骤处理:切取茎尖置于0.002M8-羟基喹啉水溶液中,处理 2～3小时,进行前处理—→将材料切碎成 1mm^3的小块,置于0.
- 郭振怀马德伟王敏
- 关键词：香椿细胞学染色体数目
- 灰葡萄孢致病力增强突变体BCt98的突变基因分析被引量：1
- 2015年
- 为获得灰葡萄孢的致病相关基因并研究其基因功能,筛选灰葡萄孢的T-DNA插入突变体库,获得了一株致病力增强的突变体BCt98。利用PCR和Southern Blotting技术,对突变体BCt98进行鉴定。利用TAIL-PCR技术结合生物信息学方法,确定了突变体BCt98中T-DNA插入位点位于BC1G_07014.1基因的第3个外显子上。利用RT-PCR技术,确定了突变体BCt98的突变基因为BC1G_07014.1。突变体BCt98生长速度较快,菌落颜色较浅,菌丝较为致密,不产生分生孢子和菌核,且胞壁降解酶(PMG、PG和Cx)及毒素活性较野生型明显增强。表明BC1G_07014.1基因在灰葡萄孢生长、发育和致病力调控方面发挥重要作用,且参与调控病菌的胞壁降解酶活性和毒素活性。
- 王敏董丽萍赵斌郑旭司贺龙张靖时翠平邢继红董金皋
- 关键词：灰葡萄孢致病力突变基因
- 灰葡萄孢菌核形成缺陷突变体的遗传分析
- 2016年
- 本研究通过筛选灰葡萄孢的ATMT突变体库,获得了1株不形成菌核,孢子产量明显减少,对番茄叶片的致病力明显增强的菌株BCt41。通过对该菌株进行PCR、Southern杂交鉴定,证明该菌株为遗传稳定的单拷贝T-DNA插入突变体。通过TAIL-PCR技术获得了T-DNA插入位点的侧翼序列,与灰葡萄孢数据库比对表明:T-DNA插入位点位于基因BC1G_02176.1的外显子2中。该基因编码区长1 206bp,含1个54bp内含子,编码383个氨基酸,基因功能未知。本研究结果为进一步研究该基因在灰葡萄孢分生孢子发育、菌核形成及致病过程中的作用奠定了基础。
- 董丽萍王敏张娇刘媛媛赵斌张静韩建民邢继红董金皋
- 关键词：灰葡萄孢T-DNA插入突变致病力突变基因
- 金银花染色体核型研究被引量：10
- 1993年
- 本试验采用去壁、低渗、火焰干燥法,对金银花茎尖细胞染色体核型进行了观察研究。结果表明:金银花染色体核型为2n=18=14Sm(3SAT)+2m+2S_t(2SAT),属于3A 型,有较强的对称性。
- 郭振怀王敏李三星
- 关键词：金银花染色体核型
- 灰葡萄孢BcKMO基因的原核表达分析
- 2017年
- 为构建灰葡萄孢犬尿氨酸单加氧酶(Bc KMO)基因的原核表达载体并进行高效表达,获得纯化的Bc KMO蛋白。以灰葡萄孢野生型BC22为试材,通过反转录PCR扩增Bc KMO基因,回收Bc KMO基因片段克隆到p MD19-T载体中,测序正确后,酶切p MD19-T-Bc KMO和带有GST标签蛋白的p GEX4T-1质粒,将目的片段进行连接,构建Bc KMO基因的原核表达载体p GEX4T-1-Bc KMO-GST。经酶切和测序鉴定正确后,将构建好的原核载体转化大肠杆菌BL21。经IPTG诱导,在大肠杆菌BL21菌株中成功表达了与GST标签蛋白融合的Bc KMO蛋白,大小约71 k Da。SDS-PAGE分析表明,该蛋白在0.2 mmol/L IPTG诱导12 h时高效表达;Western Blot结果发现目的蛋白能与GST特异性抗体起特异性反应,表明Bc KMO基因的体外诱导表达成功。
- 王敏刘媛媛周帆姜婷婷郑旭张靖时翠平邢继红董金皋
- 关键词：灰葡萄孢原核表达纯化PCR
