刘辉
- 作品数：9 被引量：14H指数：3
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- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- Notch3诱导人小细胞肺癌H446细胞G_0/G_1期阻滞及其机制被引量：2
- 2016年
- 目的探究Notch3对人小细胞肺癌H446细胞增殖和细胞周期的影响及其分子机制。方法将人Notch3真核表达质粒、人HES1真核表达质粒、人鼠双微基因2(MDM2)基因沉默表达质粒及其空质粒分别转染H446细胞,采用流式细胞术检测细胞周期,采用RT-PCR法检测Notch3和MDM2的mRNA水平,采用Western blotting方法检测Notch3、HES1、MDM2、Rb和P21蛋白表达水平。结果 Notch3可抑制H446细胞增殖并导致G_0/G_1期阻滞(P<0.05),上调HES1蛋白表达水平和下调MDM2蛋白表达水平(P<0.05);HES1高表达也能使MDM2蛋白表达水平下降(P<0.05),但对其mRNA水平无影响;沉默MDM2基因可抑制H446细胞增殖(P<0.05),并使H446细胞中Rb和P21蛋白表达水平升高(P<0.05)。结论 Notch3可通过HES1抑制MDM2蛋白表达,进而上调Rb和P21蛋白表达水平,抑制H446细胞增殖并阻滞H446细胞于G_0/G_1期。
- 刘辉陈红莲袁磊
- 关键词：NOTCH3小细胞肺癌H446细胞流式细胞术
- 恩替卡韦对CHB患者HBV DNA载量及生存质量的影响
- 2016年
- 目的:观察恩替卡韦对慢性乙型病毒性肝炎(CHB)患者外周血HBV DNA载量及生存质量的影响。方法:选择符合标准的患者80例,随机分为观察组和对照组,每组各40例。对照组患者应用拉米夫定治疗;观察组患者应用恩替卡韦治疗。治疗前后,比较两组患者外周血HBV DNA载量及生存质量。结果:治疗前,两组患者外周血HBV DNA载量相似(P>0.05);治疗6个月后,两组患者外周血HBV DNA载量较本组治疗前均降低(P<0.05),并且观察组患者较对照组降低更显著(P<0.05);观察组患者外周血HBV DNA转阴率40.00%,明显高于对照组的17.50%,差异有显著性(P<0.05)。治疗后,两组患者SF-36各项维度评分较治疗前均提高(P<0.05);观察组患者RP、BP、VT及RE改善幅度较对照组更大(P<0.05)。结论:恩替卡韦在降低CHB患者外周血HBV DNA载量,提高HBV DNA转阴率和生存质量均优于拉米夫定。
- 刘辉陈红莲
- 关键词：恩替卡韦拉米夫定慢性乙型病毒性肝炎
- 高尿酸诱导3T3-L1脂肪细胞胰岛素抵抗及其机制的研究被引量：6
- 2017年
- 目的探究高尿酸血症(HUA)对3T3-L1脂肪细胞IR的影响,并且探讨其分子机制。方法 3T3-L1脂肪细胞先经不同浓度UA单独预处理或与N-乙酰-L-半胱氨酸(NAC)共同预处理后再接受胰岛素刺激,采用CCK-8法检测3T3-L1脂肪细胞活力,采用葡萄糖氧化酶法检测葡萄糖消耗量,采用Western blot检测IRS-1和Akt蛋白磷酸化水平及GluT4蛋白水平。结果 HUA可抑制胰岛素诱导的葡萄糖消耗、Akt磷酸化(Thr308)和IRS-1去磷酸化(Ser307),以及GluT4蛋白表达(P<0.05),这些作用可被NAC可阻断(P<0.05)。结论 HUA可抑制胰岛素激活的IRS-1/Akt信号通路和GluT4蛋白表达,导致3T3-L1脂肪细胞发生IR。
- 徐宛玲刘辉袁磊
- 关键词：高尿酸胰岛素抵抗3T3-L1脂肪细胞胰岛素受体底物1葡萄糖转运子4
- 胰腺癌高表达抗原MUC4 CTL表位肽的筛选与改造被引量：4
- 2017年
- 目的:观察胰腺癌高表达抗原黏蛋白4(MUC4)的改造表位是否有HLA-A2限制性抗肿瘤能力。方法:首先运用RT-PCR和Western blot方法检测MUC4在胰腺癌细胞系CAPAN-2和ASPC-1的表达情况。通过Net CTL 1.2、BIMAS、SYFPEITHI和IEDB软件预测打分来选取MUC4的HLA-A2限制性表位;替换MUC4抗原锚定位点氨基酸获得改造肽;候选表位肽的合成方法为标准的Fmoc化学合成法,结合力实验用于检测候选表位与T2A2细胞表面HLA-A2分子的结合能力,ELISPOT实验检测候选表位肽诱导细胞毒性T淋巴细胞(CTL)分泌IFN-γ的能力,体外细胞毒实验活性检测候选肽诱导CTL的能力。结果:MUC4在胰腺癌细胞系CAPAN-2和ASPC-1均有表达。P1944-1Y、P1944-2L、P1944-1Y2L、P2004和P2004-1Y9V具有较好的结合力,且P2004-1Y9V、P1944-1Y2L等改造肽与HLA-A2的结合力高于原肽。ELISPOT实验结果显示表位肽P1944、P1944-1Y2L、P2004和P2004-1Y9V诱导的CTL具有分泌IFN-γ的能力。P1944-1Y2L和P2004-1Y9V诱导特异性T细胞免疫分泌的IFN-γ略高于原肽。细胞毒实验结果显示表位P1944、P1944-1Y2L、P2004和P2004-1Y9V对CAPAN-2细胞均有一定的杀伤作用。P1944-1Y2L和P2004-1Y9V特异性CTLs对CAPAN-2细胞杀伤率高于原肽特异性CTLs。结论:MUC4抗原改造表位P1944-1Y2L、P2004-1Y9V与天然表位P1944、P2004相比有更高的HLA-A2分子亲和力,保留了原有的免疫原性,并且改造肽抗肿瘤免疫效应强于天然表位。P1944-1Y2L和P2004-1Y9V是优秀的MUC4抗原的HLAA2限制性CTL候选表位,可以成为新的抗肿瘤多肽免疫治疗疫苗的候选表位。
- 范柳笛刘辉袁磊时冉冉
- 关键词：表位细胞毒性T淋巴细胞
- 小细胞肺癌的生物治疗研究
- 2016年
- 目的：探讨在小细胞肺癌患者临床治疗过程中，生物治疗方法的应用效果，旨在提升小细胞肺癌患者临床治疗有效率。方法选取2011年2月~2015年12月我校附属医院收治的小细胞肺癌患者60例，随机分成观察组和对照组，给予对照组常规化疗，观察组除常规化疗外，还予以生物治疗，将两组的临床治疗有效率进行比较。结果观察组临床治疗有效率高于对照组，观察组不良反应发生率低于对照组，且观察组的Karnofsky体能评分改善情况优于对照组。结论生物治疗在小细胞肺癌患者的临床治疗过程中应用效果良好，可提高治疗有效率、降低不良反应发生率，改善患者的功能状态。
- 刘辉陈红莲
- 关键词：小细胞肺癌生物治疗化疗
- 肺癌的早期诊断及西医治疗效果研究
- 2017年
- 目的研究肺癌患者的早期诊断方法和治疗效果。方法将早期肺癌患者30例作为研究对象,抽取静脉血液测定血清中的癌胚抗原、烯醇化酶、角蛋白、糖类抗原等肿瘤标志物水平,并和同期健康体检人员30例进行比较。对30例早期肺癌患者,在胸腔镜下行肺叶切除术,观察治疗效果,并测定治疗前后的CT值及SUV值。结果肺癌患者各肿瘤标志物水平均高于健康人员;术后治疗有效率达90.0%,手术用时(98.3±12.6)min,术中出血量(120.5±13.0)m L,住院时间(5.6±1.2)d,术后没有明显的并发症发生;治疗后CT值及SUV值均较治疗前明显降低[(42.5±7.4)vs(26.8±5.2)]、[(9.4±2.2)vs(6.8±1.7)](P<0.05)。结论肿瘤标志物的联合检测对肺癌的早期诊断具有较高的应用价值。对于早期肺癌,行胸腔镜肺叶切除术效果确切,能够提高治疗有效率,改善CT指标,值得临床推广。
- 陈红莲刘辉马永超
- 关键词：早期肺癌
- 地高辛对人胃癌SGC7901细胞生长和凋亡的影响被引量：1
- 2017年
- 目的:探究地高辛对人胃癌SGC7901细胞生长和凋亡的影响,并探讨其分子机制。方法:选取人胃癌细胞SGC7901作为研究对象,采用CCK-8法检测地高辛的细胞毒作用并测定IC_(50),采用流式细胞术检测细胞凋亡和细胞周期,采用Western blot法检测c-Src、p-c-Src(Tyr416)、Akt、p-Akt(Ser473)、ERK1/2和p-ERK1/2(Tyr204)的蛋白水平,采用RT-PCR法检测c-Src的mRNA表达水平。结果:随着地高辛浓度逐渐升高,自50nmol/L开始,SGC7901细胞的存活率逐渐降低(P<0.05),当地高辛浓度达到500 nmol/L时SGC7901细胞的存活率降至最低(P<0.05),地高辛作用24 h的IC_(50)为191.45 nmol/L;200 nmol/L地高辛作用SGC7901细胞24 h后,与对照组相比,细胞凋亡率显著升高(P<0.05),G_0/G_1期细胞比例明显升高(P<0.05),c-Src、ERK1/2和Akt蛋白的磷酸化水平显著下降(P<0.05),c-Src的mRNA和蛋白表达水平均明显降低(P<0.05),细胞迁移率降低(P<0.05)。结论:地高辛可在体外诱导人胃癌细胞SGC7901的凋亡和G0/G1期阻滞,这可能与其下调c-Src基因表达以及抑制ERK1/2和Akt蛋白磷酸化有关。
- 陈红莲刘辉袁磊王建国
- 关键词：地高辛细胞周期C-SRCSGC7901细胞
- Notch3信号通路介导SAHA诱导的小细胞肺癌H446细胞凋亡被引量：3
- 2016年
- 目的:观察辛二酰苯胺异羟肟酸(suberoylanilide hydroxamic acid,SAHA)对人小细胞肺癌H446细胞凋亡的影响,并探讨其分子机制。方法:选取人小细胞肺癌H446细胞作为研究对象,采用CCK-8法检测SAHA的细胞毒作用并测定IC50,采用流式细胞术检测细胞凋亡,转染N3ICD真核表达质粒构建高表达N3ICD的H446细胞系,采用RT-PCR法检测Notch3的mRNA水平,采用Western blot法检测Notch3、N3ICD、Puma和cleaved caspase-3的蛋白水平。结果:SAHA可显著降低H446细胞存活率且呈剂量依赖性(P<0.05),SAHA作用48 h的IC50为1.91μmol/L;SAHA可诱导H446细胞凋亡且具有剂量依赖性(P<0.05);H446细胞中Notch3基因表达呈阴性,SAHA可使H446细胞Notch3基因恢复表达并激活Notch3信号通路(P<0.05);沉默Notch3基因可抑制SAHA对H446细胞的促凋亡作用(P<0.05);N3ICD高表达使H446细胞中Puma和cleaved caspase-3蛋白水平升高(P<0.01)。结论:在体外SAHA可激活人小细胞肺癌H446细胞Notch3信号通路,上调Puma蛋白表达水平,诱导H446细胞凋亡。
- 陈红莲刘辉杨旭光袁磊
- 关键词：小细胞肺癌NOTCH3细胞凋亡H446细胞
- 肺癌治疗中靶向肽在递送siRNA中的应用价值
- 2016年
- 目的探讨肺癌治疗中靶向肽在递送siRNA中应用的价值,旨在提升肺癌患者临床治疗有效率。方法选取2011年1月至2015年2月我校附属医院收治的肺癌患者80例,随机分为观察组和对照组,各40例。给予对照组患者常规化疗和靶向治疗;对于观察组患者,除常规化疗和靶向治疗外,还应用必要的靶向肽,并将两组患者的最终治疗效果进行比较。结果观察组临床治疗有效率明显高于对照组(P<0.05);观察组不良反应发生率明显低于对照组(P<0.05);观察组白细胞和血小板减少的发生率显著低于对照组(P<0.05)。结论靶向肽可以起到递送siRNA的作用,能增强靶向性,从而增强肺癌的治疗效果,不仅能提高治疗有效率,还能在降低患者不良反应发生率的基础上延长患者生存期。
- 陈红莲刘辉马永超
- 关键词：肺癌靶向治疗SIRNA
