陈翠花
- 作品数：3 被引量：8H指数：2
- 供职机构：南京中医药大学基础医学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金江苏省“青蓝工程”基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- UPLC-CAD柱后补偿结合内参法测定三七中的总皂苷被引量：2
- 2016年
- 目的通过超高效液相色谱-电喷雾检测器（UPLC-CAD）柱后补偿结合内参法同时测定三七Panax notoginseng（Burk.）F.H.Chen中总皂苷的含有量。方法三七70%乙醇提取物的分析采用AcclaimTMRSLC 120 C18色谱柱（150 mm×2.1 mm,2.2μm）;流动相为0.2%甲酸-乙腈,梯度洗脱;柱温30℃;体积流量0.4 mL/min。内参物为人参皂苷Rg1、Re、Rb1、Rd,LC-MS法鉴定各皂苷结构。结果 4个内参物在各自范围内均呈良好的线性关系（r≥0.999 5）,平均回收率94.88%～106.32%,RSD 2.16%～4.74%。LC-MS色谱图中有20个峰,鉴定出10个人参皂苷、2个三七皂苷和绞股蓝皂苷XⅦ。总皂苷平均含有量454.9μg/m L,在0.496 mg/m L供试品溶液中的平均相对含有量91.72%。结论该方法无需校正因子就能分析三七中的总皂苷,可为该植物的质量控制提供参考。
- 陈翠花朱珂璇欧阳柳凤赵玉男郭盛
- 关键词：总皂苷LC-MS
- 人参总皂苷亲和"垂钓"脑内蛋白质靶点的研究被引量：5
- 2016年
- 目的:预测人参总皂苷在脑内的蛋白质作用靶点。方法:采用直接亲和法亲和"垂钓"出脑内可能与人参总皂苷相互作用的蛋白质;然后采用SDS-PAGE凝胶电泳对"垂钓"出的蛋白质进行分离、染色、挖取蛋白质斑点胶块,并采用MALDI-TOF/TOF串联二级质谱对未知蛋白质进行鉴定;采用生物膜层干涉技术(BLI)测定人参皂苷和疑似蛋白14-3-3之间的相互作用,来进一步确认疑似蛋白14-3-3是否与人参皂苷有直接的分子间相互作用,以及哪种人参皂苷单体与14-3-3蛋白的亲和力最强。结果:亲和"垂钓"和质谱共鉴定获得5个预测蛋白,分别为:14-3-3蛋白、肌动蛋白、肌酸激酶B型、ATP合成酶、未知蛋白质;动力学分析显示14-3-3蛋白与原人参二醇、原人参三醇存在分子间相互作用,并且KD值分别为7.8×10-4和5.62×10-4。结论:14-3-3蛋白是人参总皂苷脑内的作用靶点之一,人参皂苷体内代谢产物原人参二醇、原人参三醇可能是14-3-3蛋白的激活剂。
- 陈飞燕欧阳柳凤江玉翠顾玲陈翠花徐雁赵玉男
- 关键词：人参总皂苷原人参二醇
- 人参总皂苷多克隆抗体的制备和鉴定被引量：1
- 2016年
- 目的进行人参总皂苷(ginseng total saponins,GTS)多克隆抗体的制备,并用不同方法进行验证。方法首先在D101大孔吸附树脂纯化的基础上,采用阴阳离子交换树脂的方法进行人参皂苷高纯提取物的制备,香草醛-硫酸比色法估测人参总皂苷的含量;然后通过过碘酸钠法构建人参总皂苷和牛血清白蛋白(BSA)的偶联物作为抗原制备得到人参总皂苷多抗;使用Protein A/G琼脂糖纯化和抗原柱双纯化抗体;最后用免疫细胞化学和生物膜层干涉(biological membrane layer interference,BLI)技术验证抗体。结果得到高纯度的人参总皂苷;SDS-PAGE表明抗原GTS-BSA偶联物制备成功;ELISA法检测受试组效价为(29.52±4.31),亲和树脂纯化后得到较纯多抗;生物膜层干涉技术表明人参总皂苷多抗与人参总皂苷、人参皂苷Re、Rg1、Rh1、Rh2、原人参二醇、F1、化合物K、原人参三醇的亲和力分别为3.99×10^(-7)、4.69×10^(-9)、2.59×10^(-9)、2.40×10^(-6)、1.62×10^(-4)、2.64×10^(-7)、1.66×10^(-10)、1.08×10^(-7)和1.32×10^(-6);免疫细胞化学(ICC)从细胞学水平上验证了抗体的有效性。结论人参总皂苷多抗的效价和特异性较高,可为下一步研究人参总皂苷在脑中的分布做好铺垫。
- 顾玲欧阳柳凤陈飞燕江玉翠陈翠花徐雁赵玉男
- 关键词：人参总皂苷免疫细胞化学
