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GST-pulldown联合质谱筛选EtAMA1相互作用蛋白: 顶复器门原虫是一群专性胞内寄生性原虫,目前研究认为,该类原虫入侵宿主细胞主要包括三个阶段,第一个阶段是虫体顶端与宿主细胞膜之间相互接触后的'滑行'运动;第二个阶段是运动接环的形成,即虫体顶端与宿主细胞形成的紧密接触点然后...; 崔晓霞黄兵赵其平韩红玉朱顺海徐帅兵谢雨翔唐敏杨志远董辉; 关键词：球虫相互作用蛋白; 文献传递

一种防治鸡球虫病的CHP317基因、疫苗及其制备方法: 本发明公开了一种柔嫩艾美耳球虫基因，该基因为Et CHP317基因，包含SEQ ID NO.1所示的氨基酸序列。同时提供一种防治鸡球虫病的疫苗的制备方法：将柔嫩艾美耳球虫保守蛋白Et CHP317的成熟肽与大肠杆菌或毕赤...; 董辉黄兵李聪韩红玉赵其平朱顺海朱雪龙王自文门启斐夏伟丽徐帅兵崔晓霞; 文献传递

柔嫩艾美耳球虫顶膜抗原-1潜在子孢子互作蛋白的筛选被引量：2: 2017年; 为了筛选与柔嫩艾美耳球虫顶膜抗原-1(Eimeria tenella apical membrance antigen 1,EtAMA1)存在互作的子孢子蛋白,以柔嫩艾美耳球虫子孢子c DNA为模板,PCR扩增EtAMA1基因胞外区,将扩增产物与p GEX-6P-1连接,构建原核表达质粒p GEX-6P-1-EtAMA1,表达、纯化重组蛋白EtAMA1-GST。纯化的重组蛋白经Western blot验证,结果显示在75 k Da处有单一的目的条带,证实了所获得的蛋白为EtAMA1-GST融合蛋白。将EtAMA1-GST蛋白、GST蛋白和PBS分别与谷胱甘肽琼脂糖珠孵育后,再分别与子孢子裂解物共孵育,洗脱液经SDS-PAGE分析后,结果显示三者之间的条带明显不同。将差异条带切下进行质谱分析,对获得的蛋白质肽段与Uniprot中鸡球虫蛋白质数据库进行Blast比对,初步获得了10个与EtAMA1存在潜在互作的柔嫩艾美耳球虫子孢子蛋白,包括微线体蛋白、糖酵解酶类、肌动蛋白相关因子以及一些保守蛋白等,他们广泛参与了虫体的入侵、发育、能量代谢等生物学过程。研究结果为进一步阐明EtAMA1在球虫入侵宿主细胞中发挥重要作用的分子机制奠定了基础。; 崔晓霞黄兵赵其平韩红玉朱顺海徐帅兵谢雨翔唐敏杨志远董辉; 关键词：柔嫩艾美耳球虫 GST 相互作用蛋白

中国畜禽寄生虫查询系统与开放接口的建立: 2018年; 随着互联网的发展,网络移动端和PC端的普及,互联网在信息获取中所占的比重不断增长。在畜禽寄生虫分类领域,至今还没有信息较为完整的查询系统可以在网上使用。通过采集《中国家畜家禽寄生虫名录(第二版)》、《中国畜禽寄生虫形态分类图谱》和《中国畜禽线虫形态分类彩色图谱》等系列书籍,作为数据库的信息来源,建立中国畜禽寄生虫数据库。在数据库和需求分析的基础上,开发了中国畜禽寄生虫查询系统,根据功能定义分为4大子系统,分别为搜索系统(核心)、前台系统(页面、用户)、管理系统、单点登录系统。该系统使用Java作为开发语言,应用了Spring、SpringMVC、Mybatis框架,使用Redis作为系统缓存、Solr作为虫种形态搜索服务。该系统的开发也是全文检索技术在寄生虫信息检索领域的首次应用,通过记录用户访问的数据,来完善虫种地区访问的记录,为虫种鉴定提供更多的数据支撑。; 杨志远朱顺海赵其平唐敏谢雨翔徐帅兵崔晓霞董辉韩红玉黄兵; 关键词：家畜家禽寄生虫查询系统开放接口

柔嫩艾美耳球虫子孢子酵母双杂交cDNA文库的构建: 2016年; 为了筛选柔嫩艾美耳球虫子孢子入侵相关的蛋白,利用酵母双杂交体系构建了柔嫩艾美耳球虫子孢子酵母双杂交cDNA文库。提取纯化的子孢子总RNA,经MMLV-RT反转录合成cDNA第一链后,利用LD-PCR扩增合成双链cDNA（ds cDNA）,dscDNA经纯化柱CHROMA SPINT＋TE-400 Columns纯化剔除小于200 bp的片段。将纯化后dscDNA、pGADT7-Rec及Carrier DNA共转化到已经制备好的酵母感受态细胞Y187中,dscDNA与pGADT7-Rec以同源重组的方式在细胞内进行连接,经过缺陷性培养基（SD/-Leu）的筛选得到酵母双杂交cDNA文库。结果显示,构建的柔嫩艾美耳球虫子孢子酵母双杂交cDNA文库的转化率为4.33×10^5/μg pGADT7-Rec,文库滴度为3.62×10^7 cfu/m L。随机挑取32个单克隆进行PCR检测,插入片段大小为200~2000bp,重组率为93.75%,并以该文库作为模板,用柔嫩艾美耳球虫5对特异性引物进行PCR扩增,获得了这5个基因片段。结果表明成功构建了柔嫩艾美耳球虫子孢子酵母双杂交cDNA文库,为进一步筛选和研究球虫入侵互作蛋白奠定了基础。; 徐帅兵黄兵赵其平董辉朱顺海崔晓霞谢雨翔唐敏杨志远韩红玉; 关键词：柔嫩艾美耳球虫子孢子同源重组

柔嫩艾美耳球虫2个抗药株的抗药性评估被引量：4: 2016年; 为检测实验室长期保存的柔嫩艾美耳球虫马杜拉霉素抗药株和地克珠利抗药株的遗传稳定性,采用鸡体试验法,以抗球虫指数、最适抗球虫活性百分率、病变记分减少率和相对卵囊产量4项指标,评价2个抗药株对地克珠利、癸氧喹酯、马杜拉霉素等3种抗球虫药物的抗药性,并以柔嫩艾美耳球虫敏感株为对照。结果显示,柔嫩艾美耳球虫敏感株对3种抗球虫药物均无抗药性,4项指标全部阴性。柔嫩艾美耳球虫马杜拉霉素抗药株对马杜拉霉素为完全耐药,4项指标全部阳性;对地克珠利、癸氧喹酯则表现为无抗药性,4项指标全部阴性。柔嫩艾美耳球虫地克珠利抗药株对地克珠利表现为完全耐药,4项指标全部阳性;对马杜拉霉素表现为中度耐药,2项指标阳性;对癸氧喹酯则表现为无抗药性,4项指标全部阴性。结果表明,在实验室已繁殖保存10余年的柔嫩艾美耳球虫2个抗药虫株对其诱导药物具有明显抗药性,实验室保种繁殖方法可行,虫株遗传稳定性良好,为利用该虫株进行球虫抗药性机制等相关研究奠定了基础。; 谢雨翔韩红玉赵其平王自文董辉徐帅兵朱顺海崔晓霞唐敏杨志远黄兵; 关键词：柔嫩艾美耳球虫地克珠利马杜拉霉素耐药性

一种防治鸡球虫病的CHP317基因、疫苗及其制备方法: 本发明为一种防治鸡球虫病的CHP317基因、疫苗及其制备方法，公开了一种柔嫩艾美耳球虫基因，该基因为Et？CHP317基因，包含SEQ？ID？NO.1所示的氨基酸序列。同时提供一种防治鸡球虫病的疫苗的制备方法：将柔嫩艾美...; 董辉黄兵李聪韩红玉赵其平朱顺海朱雪龙王自文门启斐夏伟丽徐帅兵崔晓霞

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崔晓霞