赵春华
- 作品数：10 被引量：0H指数：0
- 供职机构：中国科学院微生物研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：化学工程生物学更多>>
- 一种丁酸产量低且丁醇产量高的工程菌及其构建方法与应用
- 本发明公开了一种丁酸产量低且丁醇产量高的工程菌及其构建方法与应用。本发明提供了一种构建重组菌的方法，为抑制或沉默生产丁醇的出发菌的基因组上的硫酯酶基因yciA表达，得到重组菌。本发明通过将生产丁醇的出发菌EB228CGM...
- 赵春华董红军张延平李寅
- 文献传递
- 一种构建高产丁醇菌株的方法与应用
- 本发明公开了一种构建高产丁醇菌株的方法与应用。本发明提供一种构建重组菌的方法，为抑制或沉默生产丁醇的出发菌的基因组上的丙酮酸激酶pykA基因表达，得到重组菌。实验证明本发明的工程菌发酵产生的丙酮酸产量明显下降，丁醇产量明...
- 董红军赵春华林兆张延平李寅
- 文献传递
- 利用木糖生产丁醇的工程菌株及其构建方法和应用
- 本发明公开了利用木糖生产丁醇的工程菌株及其构建方法和应用。本发明提供了一种构建重组菌的方法，包括如下步骤：提高生产丁醇的出发菌的基因组中xylE、xylFGH、xylA、xylB、rpe、tktA、rpiA、talB的表...
- 赵春华张延平李寅珍保罗西努瓦张天瑞董红军
- 高效Rubisco羧化活性筛选体系的设计与构建
- 2020年
- 【背景】广泛存在于植物、藻类及其他自养微生物中的核酮糖-1,5-二磷酸羧化/加氧酶(Rubisco)是卡尔文循环中固定CO2的关键酶及限速酶,在生物质合成和全球碳循环中扮演着重要角色。鉴于Rubisco的重要性以及极低的固碳羧化活性,对Rubisco的筛选进化研究具有重要意义。【目的】构建一种适用于筛选高效Rubisco羧化活性的筛选体系。【方法】分析现有筛选体系对Rubisco羧化活性筛选压力缺失的原因,设计构建适用于高效Rubisco羧化活性的筛选体系,以BWLac产乳酸菌株为宿主,在含有5%CO2的N2环境下厌氧培养,比较不同羧化活性Rubisco对细胞生长的影响,通过HPLC及LCMS检测总乳酸及固定CO2生成乳酸的产量评估筛选体系。【结果】通过终端代谢产物乳酸产生下拉力,以及甘油代谢产生的剩余还原力需要平衡消耗掉的设计靶点,增强Prk和Rubisco的固碳支路代谢通量,加强RuBP对细胞的毒性抑制作用,使细胞生长与Rubisco活性有效偶联,构建高通量筛选办法。在新构建的筛选体系中,Rubisco失活突变体BWLac/197不能生长,Rubisco和Prk双失活突变体BWLac/197-2021生长未受影响,菌落大小约1.58 cm。粗酶液羧化活性相差2倍以上的RBC1和7002,其细胞生长在筛选条件下受不同程度抑制,菌落大小分别有1.06 cm和0.65 cm。通过检测乳酸产量及甘油消耗量对筛选体系验证评估,RBC1消耗甘油1.39 g/L,产乳酸2.82 g/L,其中来自于NaH13CO3的标记乳酸含量为18.05μmol/L,比7002的相应检测结果高1.3-1.6倍,检测结果与筛选体系设计原理相符,即乳酸产量越高,甘油消耗越多,Rubisco羧化活性越高,细胞生长得越好。【结论】成功设计构建了高效Rubisco羧化活性筛选体系,为进化或探索更高羧化活性Rubisco提供有效的高通量筛选办法。
- 王斐张君丽张君丽蔡真赵春华蔡真李寅
- 关键词：乳酸CO2固定
- 一种构建高产丁醇菌株的方法与应用
- 本发明公开了一种构建高产丁醇菌株的方法与应用。本发明提供一种构建重组菌的方法，为抑制或沉默生产丁醇的出发菌的基因组上的丙酮酸激酶pykA基因表达，得到重组菌。实验证明本发明的工程菌发酵产生的丙酮酸产量明显下降，丁醇产量明...
- 董红军赵春华林兆张延平李寅
- 利用木糖生产丁醇的工程菌株及其构建方法和应用
- 本发明公开了利用木糖生产丁醇的工程菌株及其构建方法和应用。本发明提供了一种构建重组菌的方法，包括如下步骤：提高生产丁醇的出发菌的基因组中xylE、xylFGH、xylA、xylB、rpe、tktA、rpiA、talB的表...
- 赵春华张延平李寅珍保罗西努瓦张天瑞董红军
- 一种提高大肠杆菌生产丁醇的方法
- 本发明公开了一种提高大肠杆菌生产丁醇的方法。本发明提供了一种构建重组菌的方法，为抑制或沉默生产丁醇的出发菌的基因组上的苹果酸脱氢酶基因mdh表达，得到重组菌。本发明的实验证明，本发明中可促进大肠杆菌生产丁醇的改造靶点为苹...
- 董红军赵春华张延平李寅
- 文献传递
- 一种提高大肠杆菌生产丁醇的方法
- 本发明公开了一种提高大肠杆菌生产丁醇的方法。本发明提供了一种构建重组菌的方法，为抑制或沉默生产丁醇的出发菌的基因组上的苹果酸脱氢酶基因mdh表达，得到重组菌。本发明的实验证明，本发明中可促进大肠杆菌生产丁醇的改造靶点为苹...
- 董红军赵春华张延平李寅
- 文献传递
- 高产丁醇的大肠杆菌基因工程菌及其构建方法与应用
- 本发明公开了高产丁醇的大肠杆菌基因工程菌及其构建方法与应用。本发明提供的重组菌，包括如下步骤：1)抑制生产丁醇的出发菌基因组上pykA基因表达和/或活性，且提高所述出发菌基因组上fdh基因的表达和/或活性，得到目的菌A；...
- 董红军赵春华张天瑞朱华伟林兆张延平李寅
- 文献传递
- 一种丁酸产量低且丁醇产量高的工程菌及其构建方法与应用
- 本发明公开了一种丁酸产量低且丁醇产量高的工程菌及其构建方法与应用。本发明提供了一种构建重组菌的方法，为抑制或沉默生产丁醇的出发菌的基因组上的硫酯酶基因yciA表达，得到重组菌。本发明通过将生产丁醇的出发菌EB228CGM...
- 赵春华董红军张延平李寅
- 文献传递
