曲磊
- 作品数：3 被引量：2H指数：1
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- 幽门螺杆菌对GES-1细胞自噬及凋亡的影响被引量：1
- 2020年
- 目的研究幽门螺杆菌(Hp)对胃上皮细胞GES-1自噬与凋亡的影响。方法Hp与自噬抑制剂3-MA、广谱凋亡抑制剂Z-VAD-FMK处理后的GES-1细胞共培养,流式细胞术检测细胞凋亡情况,Western blot检测LC3B-Ⅱ、Caspase-3及PARP蛋白的表达。结果3-MA处理后,与空白对照组相比,Hp组LC3B-Ⅱ蛋白相对表达量显著增高(t=7.54,P<0.01);3-MA+Hp组与Hp组相比,LC3B-Ⅱ蛋白相对表达量显著降低(t=-3.24,P<0.05);与空白对照组相比,Hp组、3-MA组GES-1细胞凋亡率均显著增加(t值分别为-9.71和-3.25,P<0.01或P<0.05)。Z-VAD-FMK处理后,与空白对照组相比,Hp组GES-1细胞凋亡率显著增加,(t=-9.29,P<0.01);Hp+Z-VAD-FMK组较Hp组GES-1细胞凋亡率显著下降(t=-8.47,P<0.01);与空白对照组相比,Hp组、Z-VAD-FMK组的LC3B-Ⅱ蛋白相对表达量均显著增加(t值分别为-12.98和-11.28,均P<0.01)。3-MA与Z-VAD-FMK共处理后,3-MA+Hp+Z-VAD-FMK组较3-MA+Z-VAD-FMK组和Hp+Z-VAD-FMK组的GES-1细胞凋亡率显著增加(t值分别为-4.91和-9.64,P<0.05或P<0.01);3-MA+Hp+Z-VAD-FMK组与3-MA+Z-VAD-FMK组相比,Caspase-3蛋白相对表达量显著增加,PARP蛋白相对表达量显著下降(t值分别为-5.16和3.02,均P<0.05);3-MA+Hp+Z-VAD-FMK组较Hp+Z-VAD-FMK组LC3B-Ⅱ蛋白相对表达量显著下降(t=4.63,P<0.05)。结论幽门螺杆菌既能上调GES-1细胞自噬也能诱导其凋亡,并通过增加Caspase-3表达的同时降低PARP的表达以增强自噬抑制引起的细胞凋亡。而在抑制凋亡后,幽门螺杆菌可能诱导GES-1细胞发生自噬性死亡。
- 张锐清杜运秋李菁佟小涵曲磊吴玉龙季晓飞张莹李波清
- 关键词：幽门螺杆菌自噬凋亡GES-1细胞
- 整合素β1通过ILK/FAK/F-actin通路影响幽门螺杆菌诱导的GES-1细胞自噬的研究被引量：1
- 2020年
- 目的观察整合素β1对ILK/FAK/F-actin通路的调节作用,分析其对幽门螺杆菌(Hp)诱导GES-1细胞自噬的影响。方法利用siRNA沉默GES-1细胞整合素β1的表达后与幽门螺杆菌共培养6 h,Western blot检测ILK的表达。以ILK特异性抑制剂Cpd22抑制细胞ILK的表达后与幽门螺杆菌共培养6 h,Western blot检测LC3B、p62、FAK、Paxillin的表达;制备细胞爬片,以iFluor-594标记的鬼笔环肽对F-actin进行染色,观察细胞形态。结果沉默整合素β1后,空白组、Hp组、沉默组、阴性对照组、沉默+Hp组、阴性对照+Hp组ILK相对表达量分别为1.012±0.073、0.637±0.216、0.727±0.173、1.173±0.177、0.712±0.160、0.983±0.119,与空白组相比,Hp组ILK的相对表达量降低(t=3.288,P<0.05),沉默组较阴性对照组,沉默+Hp组较阴性对照+Hp组ILK相对表达量均显著降低(t值分别为-4.420和-3.238,均P<0.01)。抑制ILK表达后,空白组、Cpd22组、Hp组、Cpd22+Hp组LC3B的相对表达量分别为0.437±0.064、0.808±0.116、0.812±0.130、1.247±0.201,p62相对表达量分别为0.904±0.141、1.121±0.105、1.392±0.110、0.960±0.103,与空白组相比,Cpd22和Hp组细胞内LC3B及p62相对表达量均显著增加(t值分别为-4.838、-4.479、-3.269、3.313,均P<0.01),Cpd22+Hp组较Hp组细胞LC3B的相对表达量增高(t=-3.147,P<0.05),p62相对表达量降低(t=2.907,P<0.05)。Cpd22组FAK、Paxillin相对表达量较空白组均增加(t值分别为-2.303、-3.460,均P<0.05),Cpd22+Hp组FAK、Paxillin相对表达量较Hp组均降低(t值分别为2.446、-2.648,P<0.05),Cpd22抑制ILK后感染Hp,细胞F-actin染色呈现明显杂乱碎丝状。结论整合素β1通过上调ILK的表达抑制幽门螺杆菌诱导的GES-1细胞自噬,其机制可能与FAK/Paxillin/F-actin通路有关。
- 杜运秋张锐清曲磊程雪吴玉龙赵慧琳张莹李波清
- 关键词：幽门螺杆菌整合素Β1GES-1细胞细胞自噬
