张学良
- 作品数：9 被引量：14H指数：2
- 供职机构：甘肃省肿瘤医院更多>>
- 发文基金：甘肃省自然科学基金甘肃省卫生行业科研计划项目甘肃省应用技术研究与开发专项计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 再生基因4(REG4)真核表达载体的构建及其蛋白在HEK293T细胞中的表达、纯化
- 2023年
- 目的构建再生基因4(regenerating gene 4,REG4)的真核表达载体,转染人胚肾细胞293T(human embryonic kidney 293T cells,HEK 293T),获得重组人再生胰岛衍生蛋白IV(regenerating islet-derived protein IV,Reg IV)。方法根据NCBI数据库REG4基因序列进行基因优化、合成,将其克隆至pCDNA3.4载体并进行双酶切和测序鉴定,通过转染试剂聚乙烯亚胺(polyethylenimine,PEI)将pCDNA3.4-REG4质粒瞬时转染至HEK 293T细胞(实验组),同时以pEGFP-C1质粒作为转染对照组,未转染重组质粒的HEK 293T细胞作为空白对照组。荧光显微镜观察转染对照组转染效率,分别收集实验组及空白对照组细胞和细胞培养液上清,十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳(sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gel electrophoresis,SDS-PAGE)与免疫印迹试验(Western-Blot,WB)检测Reg IV蛋白表达水平。通过镍柱及丙烯葡聚糖凝胶S-400(Sephacryl S-400)柱进行蛋白纯化,SDS-PAGE及WB对纯化后重组蛋白进行鉴定。结果经测序和双酶切鉴定,重组质粒pCDNA3.4-REG4构建成功。转染对照组(pEGFP-C1质粒)荧光显微镜观察结果显示转染效率约50%,表明转染成功。WB结果显示仅在实验组(pCDNA3.4-REG4质粒)的细胞中检测到RegIV蛋白。镍柱纯化时目的蛋白无法与镍柱填料有效结合,SephacrylS-400凝胶柱层析纯化获得了此重组蛋白。结论成功构建了REG4基因真核表达载体并在HEK 293T细胞中成功表达,为深入研究Reg IV蛋白的作用机理及开发潜在的抗癌靶向药物奠定了基础。
- 徐杨杜惠芬李克生柴丹丹石晓玲连晓雯张学良
- 关键词：真核表达瞬时转染蛋白纯化
- 埃克替尼联合胸部放疗与单独埃克替尼比较治疗EGFR突变阳性Ⅲ/Ⅳ期NSCLC的临床对照研究被引量：4
- 2020年
- [目的]比较埃克替尼联合胸部放疗与单独埃克替尼治疗Ⅲ/Ⅳ期EGFR突变阳性NSCLC的临床有效性及安全性。[方法]按照纳入排除标准,选择2012年1月至2017年12月在甘肃省肿瘤医院首次采用埃克替尼联合胸部放疗或单独埃克替尼治疗的EGFR突变阳性NSCLC患者,比较两种治疗模式在胸部原发灶的近期缓解率、无进展生存时间(PFS)、总生存时间(OS)、埃克替尼耐药时间及毒副反应发生方面的差异,并分析各临床因素对患者生存的影响。[结果]共纳入76例患者,其中埃克替尼联合胸部放疗组28例,单药埃克替尼组48例。两组比较,近期疗效方面存在统计学差异(P=0.009),特别是ORR方面埃克替尼+TRT组显著优于单独埃克替尼组(P=0.002);生存情况方面,1、2年PFS和OS两组差异均无统计学意义(P>0.05),但在中位OS(40.3个月vs 25.7个月)和中位PFS(34.2个月vs 19.9个月)方面,埃克替尼+TRT组均优于单独埃克替尼组;多因素分析显示,埃克替尼耐药时间及总应用时间与PFS和OS均成正相关(P=0.000),患者近期疗效与患者PFS和OS也密切相关(P=0.000)。毒副反应方面,急性放射性肺炎、放射性食管炎、白细胞减少、恶心呕吐两组间存在统计学差异(P<0.05),埃克替尼+TRT组高于单独埃克替尼组;而埃克替尼相关的皮疹、腹泻、口腔溃疡、肝功能异常、血栓形成以及贫血、血小板减少方面两组差异均无统计学意义(P>0.05)。[结论]埃克替尼联合胸部放疗与单独埃克替尼比较在治疗局部晚期或晚期EGFR突变阳性NSCLC中,能提高肺部原发灶的近期缓解率,改善无进展生存期和总生存期,且未增加TKI药物相关的毒副反应发生,是一种有效且安全的治疗模式。
- 刘锐锋刘锐锋魏世鸿张学良罗宏涛张学良宋海侠董玉梅王小虎
- 关键词：盐酸埃克替尼
- 再生基因4(RegⅣ)的原核表达、蛋白结构复性及纯化
- 2020年
- 目的:构建再生基因4(Reg Ⅳ)的原核表达载体,获得重组人Reg Ⅳ蛋白。方法:将已构建好的pEGFP-C1-Reg Ⅳ质粒进行酶切纯化获得目的基因,并构建到pET-30a原核表达载体上,经测序鉴定后将序列正确的重组质粒转化E.coli BL21(DE3),IPTG诱导表达,SDS-PAGE凝胶电泳鉴定,并用凝胶层析对表达产物进行复性纯化。结果:构建了pET-30a-Reg Ⅳ原核表达重组质粒,IPTG诱导表达出约22KD的重组蛋白,表达产物经复性纯化后获得纯度较高的目的蛋白。结论:成功构建了Reg Ⅳ原核表达载体,并成功表达了重组人Reg Ⅳ蛋白。
- 徐杨张学良杜惠芬柴丹丹连晓雯张瑞君李克生
- 关键词：原核表达纯化
- Tead4在实体瘤中研究进展
- 近年来研究发现TEAD4是Hippo信号通路中具有保守性的主要下游转录因子,是肿瘤发生的关键因子,在癌症状态下经常处于失衡状态,能够脱离YAP直接控制下游相关基因表达,在乳腺癌,口腔癌,直肠癌等肿瘤中具有促癌作用,加重肿...
- 张学良呼永华王涛
- 关键词：肿瘤
- 文献传递
- 糖皮质激素对非小细胞肺癌患者血清HIF-1α及VEGF表达的影响
- 2020年
- 目的:观察地塞米松对非小细胞肺癌患者血清中HIF-1α及VEGF表达的影响。方法:选取2010年10月至2016年5月我院呼吸内科收治的120例非小细胞肺癌患者,按治疗方案分为对照组与观察组,对照组50例,实施常规化疗,观察组70例,实施地塞米松辅助化疗。观察两组患者血清中低氧诱导因子-1α(HIF-1α)、人血管内皮生长因子(VEGF)表达及总有效率。结果:治疗前两组患者HIF-1a及VEGF的表达差异无统计学意义(P>0.05),治疗后观察组HIF-1a及VEGF的表达明显低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);观察组总有效率高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:地塞米松辅助化疗能抑制非小细胞肺癌患者的HIF-1α、VEGF的表达,提高临床疗效。
- 牛继国张学良江秀娟杨磊方岳张璐呼永华
- 关键词：非小细胞肺癌地塞米松糖皮质激素受体
- 缺氧诱导因子-1与恶性肿瘤关系的研究进展被引量：8
- 2021年
- 低氧是恶性肿瘤微环境的特征之一,缺氧诱导因子-1(HIF-1)是细胞适应低氧环境的重要调节因子。HIF-1是低氧环境下的氧调节型α亚基与组成型β亚基形成的稳定的异二聚体,其促进肿瘤血管生成、上调并激活基质金属蛋白酶及赖氨酸氧化酶等细胞因子及信号通路、诱导特异性微RNA生成,参与多种恶性肿瘤细胞的增殖、侵袭、转移等相关生物学行为。通过不同的方式抑制HIF-1α的活性,改变其结构稳定性,对于恶性肿瘤的治疗具有重要意义。但HIF-1α能否成为恶性肿瘤治疗的靶点及其预后判断的指标,有待于进一步的研究探索。
- 张璐方岳牛继国陈彻李海龙王功臣张学良梁艳呼永华张志明
- 关键词：恶性肿瘤缺氧诱导因子-1
- 锌原卟啉对非小细胞肺癌耐药细胞株A549/DDP的P-糖蛋白及化疗敏感性的影响被引量：1
- 2017年
- 目的:评估锌原卟啉(ZnPP)对肺癌耐药细胞株A549/DDP的P-糖蛋白(P-gp)的影响,探究ZnPP的耐药逆转作用及其可能的作用机理。方法:CCK8法检测不同浓度的ZnPP作用于A549/DDP细胞株后,顺铂作用的半数抑制浓度(IC_(50)),流式细胞术检测ZnPP作用细胞株后P-gp表达量,通过罗丹明123的潴留实验检测P-gp对药物的外排功能。结果:ZnPP作用A549/DDP细胞株24h后,顺铂的ICC_(50)值均显著降低,P-gp表达量显著降低(P<0.05),罗丹明123的蓄积量显著增加(P<0.05)。结论:ZnPP可通过降低P-gp蛋白的表达水平,减弱P-gp药物外排功能,使肺癌耐药细胞株的化疗敏感性降低;ZnPP可作为一种潜在的化疗耐药逆转剂。
- 王涛李海宁张永东张学良郭欢郭红云苏海翔
- 关键词：化疗耐药性非小细胞肺癌P-糖蛋白锌原卟啉
- 利妥昔单抗联合CHOP方案治疗卵巢弥漫大B细胞淋巴瘤1例被引量：1
- 2011年
- 目的:提高临床医生对卵巢非霍奇金淋巴瘤的认识,采取合适的治疗方法,提高患者的生存率。方法:报道1例卵巢非霍奇金淋巴瘤,观察R-CHOP方案疗效,并结合文献复习。结果:R-CHOP对该患者效果理想。结论:卵巢非霍奇金淋巴瘤罕见,确诊依赖于病理活检及免疫组织化学。本病的治疗方案尚未统一,首次彻底而有效的综合治疗是提高卵巢淋巴瘤生存率的重要措施。
- 李志虎张学良崔杰姜俊峰
- 关键词：淋巴瘤利妥昔单抗卵巢
- Tead4在实体瘤中研究进展
- 近年来研究发现TEAD4 是Hippo 信号通路中具有保守性的主要下游转录因子，是肿瘤发生的关键因子，在癌症状态下经常处于失衡状态，能够脱离YAP 直接控制下游相关基因表达，在乳腺癌，口腔癌，直肠癌等肿瘤中具有促癌作用，...
- 张学良呼永华王涛
- 关键词：肿瘤
