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孙淼

作品数：1 被引量：5H指数：1
供职机构：大连大学生命科学与技术学院更多>>
发文基金：辽宁省大学生创新创业训练计划项目国家自然科学基金更多>>
相关领域：生物学更多>>

合作作者

文献类型

  • 1篇中文期刊文章

领域

  • 1篇生物学

主题

  • 1篇原核表达
  • 1篇酶解
  • 1篇克隆
  • 1篇基因
  • 1篇基因克隆
  • 1篇几丁质
  • 1篇几丁质酶
  • 1篇纯化

机构

  • 1篇大连大学

作者

  • 1篇王晓辉
  • 1篇李美玉
  • 1篇孙淼

传媒

  • 1篇微生物学通报

年份

  • 1篇2016
共 1 条 记 录，以下是 1-1
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排序方式：
一种几丁质酶基因的克隆表达及酶解产物分析被引量：5
2016年
【目的】克隆耐冷菌假交替单胞菌(Pseudoalteromonas sp.DL-6)的几丁质酶基因并进行原核表达,纯化重组蛋白并研究其酶解产物。【方法】采用PCR扩增法从Pseudoalteromonas sp.DL-6中克隆几丁质酶基因(chi A),连接到表达载体p ET28a,导入Escherichia coli BL21(DE3)进行诱导表达。SDS-PAGE检测几丁质酶Chi A的分子量与纯度,4-甲基伞形酮荧光底物4MU-(Glc NAc)2测定酶活,电喷雾质谱(ESI-MS)检测酶解产物。【结果】chi A基因(Gen Bank登录号KF234015)在大肠杆菌中高效表达,Ni-NTA亲和层析柱纯化几丁质酶Chi A的总活力可达168.68 U。ESI-MS检测结果表明重组蛋白酶解1%胶体几丁质的产物为几丁寡糖。【结论】利用内切几丁质酶Chi A水解几丁质生产几丁寡糖,为其在食品、医药和农业等领域的潜在应用提供有利参考。
肖景惠李美玉孙淼王晓辉
关键词：几丁质酶基因克隆原核表达纯化
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