杨仕红
- 作品数：5 被引量：2H指数：1
- 供职机构：湖北民族学院附属民大医院更多>>
- 发文基金：湖北省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 靶向大鼠糖皮质激素诱导的亮氨酸拉链蛋白siRNA腺病毒载体的构建及对L6细胞的感染
- 2016年
- 目的构建靶向大鼠糖皮质激素诱导的亮氨酸拉链蛋白(GILZ)的siRNA腺病毒载体,并感染体外培养的大鼠L6成肌细胞,为进一步研究GILZ对脓毒症骨骼肌代谢的调控作用提供实验基础。方法 (1)设计3条靶向大鼠GILZ mRNA的特异性siRNA序列和1条阴性对照序列,合成各序列的Oligo DNA,退火形成双链后,插入AgeⅠ和EcoRⅠ双酶切的载体GV119,构建腺病毒穿梭质粒,经测序证实构建成功后,与腺病毒骨架质粒p BHG lox△E1,3 Cre共转染HEK293细胞,获得重组腺病毒,分别命名为Ad-siRNA-1-GILZ、Ad-siRNA-2-GILZ和Ad-siRNA-3-GILZ,扩增纯化后测定病毒滴度。(2)0.1、1.0、10.0μL重组腺病毒在不同类型培养液(完全培养液、Enhanced Infection Solution、含5μg/m L Polybrene的完全培养液、含5μg/m L Polybrene的Enhanced Infection Solution)中感染L6细胞,显微镜下观察L6细胞形态改变和绿色荧光蛋白表达情况,确定最佳感染条件。(3)分别以阴性对照病毒(阴性对照组)、Ad-siRNA-1-GILZ(Ⅰ组)、Ad-siRNA-2-GILZ(Ⅱ组)和Ad-siRNA-3-GILZ(Ⅲ组)感染L6细胞,Real time-PCR检测各组GILZ mRNA的表达量。结果 (1)经测序分析和PCR验证,成功构建重组腺病毒载体,经测定滴度为2.0×1010PFU/m L。(2)10μL重组腺病毒在Enhanced Infection Solution的感染效果最佳,感染效率达80%。(3)重组腺病毒感染L6细胞后,细胞无明显坏死,荧光显微镜下可见大量绿色荧光蛋白表达。(4)Real time-PCR结果显示,Ⅱ、Ⅲ组GILZ mRNA表达量与阴性对照组比较差异无统计学意义(P>0.05),Ⅰ组GILZ mRNA表达量较阴性对照组明显降低(P<0.01),其沉默效率为59.8%。结论成功构建靶向大鼠GILZ的siRNA腺病毒载体,并可在体外细胞水平明显下调GILZ的表达,为后续研究GILZ对脓毒症骨骼肌蛋白代谢的调控作用提供实验基础。
- 向方华夏燕杨仕红熊剑陈文革袁林杨朝晖
- 关键词：脓毒症SIRNARNA干扰腺病毒载体
- 无典型症状的髌骨痛风1例
- 2013年
- 患者,男,23岁,因右侧膝关节疼痛3年,加重半月于2012年6月8日入院。患者3年前无明显诱因出现右侧膝关节疼痛,行走和上下楼梯时加重,休息后缓解。偶有关节交锁症状,可自行复位,无发热盗汗等不适。未行特殊诊治,3年来右膝疼痛间断发作。
- 杨仕红许维亚杨朝晖
- 关键词：无典型症状膝关节疼痛髌骨上下楼梯关节交锁自行复位
- 恩施地区健康成年人股骨髁几何学测量及其临床意义
- 2015年
- 目的利用数字化技术对恩施地区健康成年人股骨髁进行解剖测量,初步获取恩施地区健康成年人股骨髁数字模型数据和相关解剖参数。方法对正常膝关节进行CT扫描,应用泰锐工作站进行膝关节三维重建,测量股骨远端各参数,用统计软件分析处理,得出各参数的均值、标准差。结果建立恩施地区健康成年人正常股骨髁形态数字模型数据库,股骨髁内外径为(75.13±3.86)mm;股骨髁内外侧前后径与内外径比值分别为(0.78±0.09)、(0.83±0.06);股骨后髁角为(3.66±0.77)°。结论建立恩施地区健康成年人股骨髁几何参数数据库,为膝关节假体设计及临床全膝关节置换(Total Knee Arthmpasty,TKA)操作提供形态学数据。
- 陈文革杨朝晖向辉华夏正东杨仕红黄高鄢含坤
- 关键词：膝关节全膝关节置换骨形态学假体设计
- 脓毒症大鼠骨骼肌GILZ表达与MHC表达关系的研究
- 目的：脓毒症是一种由感染引起的临床综合征,常导致一系列全身炎症反应,后期预后差,脓毒症时骨骼肌大量消耗,其机制尚未完全阐明,治疗效果也不够满意。本研究目的在于通过建立脓毒症大鼠模型,用Real time PCR和West...
- 杨仕红
- 关键词：脓毒症糖皮质激素受体骨骼肌代谢
- 文献传递
- 膝关节巨大滑膜软骨瘤并重度骨关节炎1例报道并文献复习被引量：2
- 2017年
- 目的探讨膝关节滑膜软骨瘤病国内外诊治经验并文献复习。方法笔者于2015-04诊治1例膝关节巨大滑膜软骨瘤并重度骨关节炎,采用人工膝关节表面置换+滑膜切除+游离体摘除术治疗。结果病理检查确诊为滑膜软骨瘤病,经1年随访膝关节功能良好,无感染、复发等不良事件发生。结论本例术中所摘除软骨瘤体积巨大,且合并重度骨关节炎,较为罕见,诊治上颇为特殊,需引起重视。X线片、CT、MRI及高频超声在诊断上均具有特征性,金标准仍系病理检查;膝关节滑膜软骨瘤并骨关节炎的治疗需综合病理分级、骨关节炎严重程度等因素,以期获得良好疗效。
- 向成浩夏正东舒舒杨朝晖陈文革杨仕红明玉祥
- 关键词：滑膜软骨瘤病骨关节炎膝关节疗效
