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韩晓建
作品数:
3
被引量:4
H指数:1
供职机构:
哈尔滨医科大学基础医学院
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发文基金:
国家自然科学基金
教育部留学回国人员科研启动基金
黑龙江省自然科学基金
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相关领域:
医药卫生
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合作作者
金艾顺
哈尔滨医科大学基础医学院免疫学...
毕冬梅
哈尔滨医科大学基础医学院免疫学...
刘晔
哈尔滨医科大学基础医学院免疫学...
石佳宁
哈尔滨医科大学基础医学院免疫学...
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作者
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金艾顺
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韩晓建
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石佳宁
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刘晔
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毕冬梅
传媒
3篇
国际免疫学杂...
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2018
1篇
2016
1篇
2015
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嵌合型抗原受体T细胞在实体肿瘤治疗的现状和展望
2016年
从1989年Gross与Eshhar提出嵌合型抗原受体(CAR)T细胞的理念,到2014年FDA授予CTL019“突破性治疗”荣誉,CAR-T细胞治疗肿瘤已走过25年。从早期的单-CD3ζ结构域到后来的串联CD28、CD137等,随着人类对肿瘤免疫研究的深入,以及临床试验研究开展,CART细胞治疗得到不断优化。虽然CD19为靶点的淋巴瘤治疗获得成功,但实体肿瘤治疗仍处于临床试验摸索阶段。基于促进CART细胞向肿瘤局部迁移浸润以及克服抗肿瘤微环境的免疫抑制作用等理念及技术优化,CART治疗实体肿瘤的研究越来越深入。未来CART治疗的适应症将不断扩大。
韩晓建
金艾顺
关键词:
CD19
实体肿瘤
细胞免疫治疗
肿瘤坏死因子相关诱导凋亡配体及其I型受体单克隆抗体联合体内外抗肿瘤作用
被引量:3
2018年
目的建立高效表达肿瘤坏死因子相关诱导凋亡配体(tumor necrosis factor related apoptosis—inducing ligand,TRAIL)单克隆抗体和TRAIL蛋白的方法,并验证抗体TR1-419与TRAIL的体内外联合抗肿瘤作用。方法利用Expi293蛋白表达系统表达抗体,采用ProteinG进行抗体蛋白的纯化。利用原核表达系统表达SUMO-Strep—TRAIL蛋白并通过N^2+“柱及Strep两步亲和层析获得高纯度的TRAIL蛋白。流式细胞术检测抗体与肿瘤细胞表面TRAIL—R1的特异性结合能力。采用MTT法验证制备的TRAIL联合TR1-419单抗蛋白对肿瘤细胞的杀伤活性。通过Western blot初步检测TRAIL联合TR1-419抗体体外杀伤肿瘤的机制。建立裸鼠肿瘤模型,验证TRAIL联合TR1-419体内抗肿瘤作用。结果成功建立了Expi293抗体蛋白高效表达系统及TRAIL蛋白原核表达系统。TR1-419单抗特异性结合表达TRAIL—R1的HeLa细胞;TRAIL显示抗肿瘤作用。TRAIL联合TR1-419作用于HeLa细胞,明显提高TRAIL杀伤肿瘤细胞的活性,同时激活Caspase8,启动凋亡信号转导通路。体内实验证明了TR1-419可增强TRAIL的抑制肿瘤生长作用。结论通过建立高效表达方法制备TR1-419抗体及TRAIL蛋白,并验证TR1-419可通过活化Caspase-8提高TRAIL在体内外抗肿瘤作用,为抗肿瘤免疫治疗提供新策略。
黄晶晶
孙欣
李亚英
韩晓建
金艾顺
关键词:
单克隆抗体
细胞凋亡
自外周血记忆B细胞体外活化和分化抗原特异性浆细胞的方法研究
被引量:1
2015年
目的建立自人外周血淋巴细胞(PBMCs)中的记忆B细胞活化和分化特异性抗体分泌细胞(如浆细胞)的体外活化方法,为抗体药物研发提供研究基础。方法采集两名接种过乙型肝炎疫苗3年和25年健康成年志愿者(z和L)外周血,分离PBMCs,通过白细胞介素(IL)-2、IL-4和Toll样受体诱导剂(CpG、R848)体外诱导活化记忆B细胞。采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测培养上清中总抗体和HBsAg特异性抗体的含量;通过酶联免疫斑点试验(ELISPOT)检测培养细胞中总抗体分泌细胞(ASC)数量的变化和HBsAg特异性抗体细胞数量。结果活化第6天,对照组和两个活化组[CpGDNA2006联合IL-2(C组)和R848联合IL-2(R组)]细胞培养上清总免疫球蛋白(Ig)G浓度分别为37.06ng/mL、80.87ng/mL和85.97ng/mL,两个活化组(C组和R组)均明显高于对照组(t=23.318,60.639,P均〈0.05)。ELISPOT检测ASC数量,结果显示,C组和R组数量均多于对照组,并且R组明显多于C组。两种活化方法均能在体外诱导B细胞活化,但R组活化效果更佳,确立R组为最佳活化方法。用该方法活化两名乙型肝炎疫苗接种者PBMCs,ELISA检测活化组特异性抗体浓度,R组显著高于对照组(t=5.031,11.561,P均〈0.05)。不同细胞数量诱导的分组,ELISPOT检测HBsAg特异性抗体分泌细胞数量,R组均明显多于对照组。结论确立诱导剂R848和细胞因子IL-2联合能够有效地诱导外周血记忆B细胞体外活化和分化抗原特异性浆细胞,为今后抗体药物研发提供了研究基础。
毕冬梅
韩晓建
石佳宁
刘晔
金艾顺
关键词:
外周血单个核细胞
体外活化
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