王淑静
- 作品数：18 被引量：63H指数：5
- 供职机构：哈尔滨医科大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金黑龙江省卫生厅科研项目黑龙江省教育厅科学技术研究项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 用鸡胚尿囊膜血管检测内皮抑素活性方法的建立被引量：5
- 2002年
- 刘秀萍王淑静刘兴汉
- 关键词：内皮抑素鸡胚血管检测活性
- 蛋白质转导技术及其应用被引量：2
- 2005年
- 蛋白质转导结构域(protein transduction domain,PTD)是指一类能将其他生物大分子导入多种哺乳动物细胞的小分子阳离子多肽,它可以用于研究细胞内某些蛋白质的功能,还可以与具有治疗作用的蛋白质、多肽等生物大分子偶联,在缺血、肿瘤等多种疾病的治疗中有潜在的应用价值。
- 陶站华王淑静刘兴汉
- 关键词：多肽缺血细胞内生物大分子哺乳动物细胞
- 改变结构、增强抗肿瘤活性的内皮抑素及其应用
- 改变结构、增强抗肿瘤活性的内皮抑素及其应用。内皮抑素通过抑制新生血管的生长，遏制肿瘤生长，达到治疗肿瘤的目的。国内专家孙汶生等构建的内皮抑素基因工程酵母菌，徐根兴教授等构建的内皮抑素双歧杆菌基因工程，都已申请了专利，以上...
- 刘兴汉王淑静任明华
- 文献传递
- 人内皮生长抑素基因在大肠杆菌中的高效表达及活性检测被引量：2
- 2002年
- 目的 获得具有抑制血管内皮细胞生长活性的人重组内皮生长抑素 (endostatin)蛋白 ,以研究其在治疗肿瘤及血管性疾病中的潜在应用价值。方法 从人的胎盘中分离总RNA经反转录聚合酶链反应 (RT PCR) ,得到en dostatin的全基因 ,并将其与质粒pUCm T重组 ,测序证明获及的人内皮生长抑素基因的序列与先前报道一致后 ,用限制性内切酶将其切下与表达载体pET 1 1a重组 ,转化受体菌BL 2 1 (DE3)中 ,用IPTG诱导以包涵体形式表达 ,经层析纯化 ,鸡绒毛尿囊膜血管 (CAM)检测活性。结果 经SDS PAGE检测 ,重组人内皮生长抑素蛋白的分子量为2 0KD ,表达量约占蛋白总量的 40 %。纯化后的内皮生长抑素对鸡的绒毛尿囊膜血管的生长有明显的抑制作用。结论 得到了具有生物活性的重组人内皮生长抑素蛋白 。
- 王淑静张雪峰刘兴汉赵炜明周凌云刘岩
- 关键词：大肠杆菌活性检测DNA重组
- 肿瘤抑素（Tumstatin）抗肿瘤活性相关肽的克隆、表达及活性研究
- 为了获得分子量小，可溶性高，使用安全的抗肿瘤活性肽，本文分别构建了19肽、21肽(T7肽改造)高水平表达的基因工程菌，建立了通过一次亲和层析直接纯化19肽、21肽的方法，19肽、21肽蛋白纯度达90％以上。体内外的活性检...
- 王淑静
- 关键词：肿瘤抑素血管生成抑制蛋白纯化肿瘤治疗
- 文献传递
- 肿瘤抑素抗肿瘤相关肽的克隆及生物活性被引量：7
- 2005年
- 为得到肿瘤抑素中具有直接抗肿瘤活性肽并检测其生物学活性,人工合成肿瘤抑素中185～2 0 3位氨基酸(19肽)所对应的核苷酸序列,将其连接到融合蛋白表达载体pTYB2中,酶切和测序鉴定后,转化到大肠杆菌BL 2 1(DE3)中诱导表达.表达的融合蛋白经几丁质亲和层析、二硫苏糖醇(DTT)的柱内还原,直接获得可溶性19肽.利用MTT法,细胞生长曲线,小鼠H2 2腹水型转移型肝癌实体瘤模型抑瘤实验并结合组织病理学切片,研究19肽的生物学活性.获得的19肽对B16小鼠黑色素瘤细胞、人SMMC 772 1肝癌细胞、人脐静脉内皮细胞的生长均具有抑制作用.小鼠H2 2腹水型肝癌抑瘤率达4 8 4 6 % .病理学切片显示,19肽可促使小鼠肿瘤组织坏死,血管数量减少.19肽具有较强的直接抗肿瘤活性,有可能成为肿瘤治疗的一种新的有前景的药物.
- 王淑静刘岩林雪松付雪徐建永刘兴汉
- 人内皮生长抑素基因在大肠杆菌中的高效表达和活性检测
- 目的：获得具有抑制血管内皮细胞生长活性的人重组内皮生长抑素（Endostatin）蛋白,以研究其在治疗肿瘤及血管性疾病中的潜在应用价值.方法：从人的胎盘中分离总的mRNA经反转录聚合酶链反应（RT-PCR）,得到Eodo...
- 王淑静
- 关键词：DNA重组
- 文献传递
- 重组人内皮抑素的纯化及抗肿瘤活性研究被引量：6
- 2005年
- [目的]从高效表达的基因工程菌中纯化重组人内皮抑素,对其抗肿瘤活性进行研究。[方法]经异丙基硫代鄄β鄄D鄄半乳糖苷(IPTG)诱导,重组人内皮抑素在大肠杆菌基因工程菌中以包涵体形式高效表达。通过凝胶层析纯化重组内皮抑素蛋白。应用鸡胚绒毛尿囊膜实验(CAM),肺癌细胞MTT试验及细胞迁移抑制实验,裸鼠皮下移植喉癌抑瘤实验、病理组织切片、免疫组化指标的测定等检测研究重组人内皮抑素的抗肿瘤活性。[结果]重组内皮抑素的复性率可达40%。重组内皮抑素在体外直接抑制肺癌细胞的增殖及迁移。用药21天,对裸鼠皮下移植喉癌的抑瘤率达到40.66%,HE染色、免疫组化及CAM实验表明其对肿瘤组织新生血管的生成有较强的抑制作用。[结论]重组人内皮抑素具有抑制肿瘤组织新生血管生成和直接抑制肿瘤细胞生长和迁移的双重抗肿瘤活性。
- 张广美王淑静任明华徐建永刘远莉陶占华李冀宏刘兴汉
- 关键词：内皮抑素蛋白表达蛋白纯化
- 肿瘤抑素相关肽抗肿瘤活性研究被引量：4
- 2005年
- [目的]评价肿瘤抑素相关肽19肽和21肽抗肿瘤活性。[方法]已构建好的19肽和21肽重组质粒在大肠杆菌BL-21(DE3)中表达,经几丁质亲和层析柱纯化出19肽和21肽。用SDS-PAGE聚丙烯酰胺电泳对表达及纯化结果进行初步鉴定,进行19肽、21肽和19肽+21肽的腹水型转移型小鼠H22肝癌实体瘤模型大体抑瘤实验,并做组织病理学切片分析。[结果]经一步亲和层析可获得可溶性19肽和21肽。19肽,21肽,19肽+21肽联合用药组在小鼠抑瘤实验中抑瘤率分别达48.46%,42.86%,53.94%。组织病理学切片结果可见3种给药方式都可促进小鼠肿瘤组织坏死,血管数量减少。
- 王淑静付雪徐建永李冀宏陶占华刘远莉刘兴汉
- 关键词：肿瘤抑素蛋白表达蛋白纯化肿瘤
- 成纤维细胞激活蛋白载体的构建及表达
- 2005年
- 目的建立成纤维细胞激活蛋白(FAP)表达系统,以获得完整蛋白。方法采用RT-PCR方法,自人新鲜胃癌组织中扩增FAP-cDNA,同时将FAP-cDNA克隆到pMD18-T中,表达正确后,再定向插入真核表达载体pQE30中,转化大肠埃希菌JM109,经异丙基-B-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达。结果测定FAP-cDNA序列与GeneBank(基因库)中的FAP序列相同;构建出重组表达载体pQE30-FAP;转化大肠埃希菌JM109,并获得完整蛋白,经验证为诱导后的表达蛋白。结论成功构建pQE30-FAP表达载体,Western-Blotting验证为完整蛋白,为进一步获得抗FAP抗体奠定了基础。
- 陈鹤王淑静戚基萍庄敏李冀宏徐建咏
- 关键词：成纤维细胞激活蛋白丝氨酸蛋白酶重组蛋白质类基因表达调控
