王振宇
- 作品数：2 被引量：2H指数：1
- 供职机构：暨南大学更多>>
- 相关领域：生物学环境科学与工程更多>>
- 基于省际贸易的2002-2012年间中国各省区碳排放转移测度及影响因素分析
- 在2015年11月召开的巴黎气候变化大会上,中国承诺将通过自主贡献的形式,在2030年左右把我国的二氧化碳排放控制到峰值,并争取早日达到这一峰值。同时又强调,2030年我国碳排放强度相比于2005年将下降60%-65%。...
- 王振宇
- 关键词：结构分解分析
- cTnI-linker-TnC融合蛋白的原核表达及鉴定被引量：1
- 2015年
- 从PUBMED中查找人心脏cTnI和cTnC的cDNA序列,在两者之间加上15个中性氨基酸残基(G4S)3的linker编码序列,并分别构建原核表达质粒pET32a-cTnI-linker-TnC和pET28a-cTnI-linker-TnC,转化入大肠杆菌表达菌株BL21(DE3)中,用异丙基硫代-β-D-半乳糖苷(IPTG)诱导其表达。通过SDS-PAGE电泳和间接ELISA对目的蛋白进行初步鉴定,并优化表达条件以实现目的蛋白的可溶性高表达。用标准抗cTnI单克隆抗体和标准抗cTnC单克隆抗体对目的蛋白进行Western blot鉴定和双抗体夹心ELISA鉴定,同时用八位心肌梗塞患者血清做间接ELISA鉴定。结果表明,cTnI-linker-TnC融合蛋白在表达载体pET32a中实现了可溶性高表达,最佳表达条件为28℃、0.4mmol/L IPTG、诱导表达5h;且融合蛋白具有较好的免疫原性,保存了cTnI和cTnC单体的天然结构,有望成为天然cTnI-TnC复合物的替代物,为下一步制备高特异性的抗cTnI-TnC复合物的单克隆抗体奠定了基础。
- 龚隆财罗镇明杨雁青王振宇向军俭王宏
- 关键词：融合蛋白原核表达双抗体夹心ELISA
