唐莉
- 作品数：24 被引量：80H指数：5
- 供职机构：宁波大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划教育部长江学者奖励计划更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 输注脾细胞建立输血相关的移植物抗宿主模型被引量：3
- 2006年
- 目的探讨输注同种脾细胞建立小鼠输血相关的移植物抗宿主(TA-GVHD)模型及其特点。方法分离C57BL/6(H-2b)脾细胞,分别经静脉输注给Balb/c(H-2d)裸鼠与F1代(C57BL/6×Balb/c H-2b/d),建立输血相关的移植物抗宿主模型。活体染料羧基荧光素乙酰乙酸(5,6-carboxyfluorescein diacetate succini midyl ester,CFSE)标记供者脾细胞,通过流式细胞仪分析供者细胞在受者体内的增殖;免疫组化分析供者脾细胞survivin的表达;检测Balb/c裸鼠体内抗供者抗体及IL-10浓度;分析皮肤、小肠、肝脏的病理变化。结果输注同种脾细胞成功建立急性TA-GVHD模型。受者脾脏及外周可以检测到标记后增殖的供者细胞。小鼠的病理改变主要出现在肝脏,浸润细胞早期表达survivin。小肠及皮肤未见明显的病理改变。TA-GVHD裸鼠第7天IL-10、抗-Balb/c显著升高。结论输注同种脾细胞可以建立TA-GVHD模型,并具有简单、快速、稳定的特性,为诊断、治疗GVHD提供了良好的模型。
- 陈必成昌盛向芙莉郭晖唐莉金昊曾宁陈忠华
- 关键词：淋巴细胞
- 论人体器官有偿捐赠的可行性及伦理学问题被引量：22
- 2005年
- 唐莉袁劲陈忠华
- 关键词：伦理学问题和法人体器官器官捐献移植器官与国际接轨
- 预防肝移植后乙肝复发的研究进展被引量：1
- 2004年
- 乙型肝炎病毒相关的急慢性肝病是肝移植的适应证 ,肝移植术后乙肝复发感染是影响这些病人预后的重要因素之一。由于器官的短缺和经济条件的限制 ,不少移植中心很勉强的考虑为慢性乙肝患者行移植术。近十年来 ,对移植肝乙肝病毒复发感染的机制研究和预防有了突飞猛进的发展 ,乙型肝炎相关肝病的肝移植比例不断上升。但如何更有效低廉地防止乙肝复发仍是急待解决的问题。
- 唐莉陈知水
- 关键词：肝移植肝炎乙型复发
- 抗CD132抗体介导同种异型抗原激活的T细胞凋亡(英文)
- 2005年
- 目的研究抗CD132单抗在体外对T细胞增殖的抑制作用以及其可能的临床应用价值。方法分离BALB/c、C57BL/6小鼠的脾细胞进行双向混合淋巴细胞培养(MLC)。分别于第一天(组1)或第三天(组2)加入抗CD132单抗(终浓度达到100mg·L-1)。用流式细胞技术检测细胞增殖(CFSE),T细胞凋亡(PE-CD3,FITC-Annexin-v)以及细胞分裂周期(propidiumiodidestain)。T细胞Survivin的表达则用免疫化学染色法检测。结果混合淋巴细胞培养的结果显示CFSE标记的脾细胞出现了不同程度的荧光强度减弱,提示不同分裂次数的细胞存在。与MLC组比较,组1和组2中均未发现有进一步细胞分裂的迹象存在。在第3天时,组1可以检测到部分T细胞凋亡,而在培养的最初两天并无此现象。在组2中,第4天处于G2/M期的细胞出现减少而凋亡细胞增多。对照组无此现象发生(P<0.01)。同时,在MLC组中可检测到survivin在T细胞表达,而在组1和组2中则未能检测到。结论研究表明阻断CD132信号途径可以通过诱导同种异型抗原活化的T细胞凋亡而抑制T细胞增殖。因此,抗CD132单抗很有希望成为器官移植中抗排斥的临床药物。
- 陈必成昌盛唐莉张鑫向芙莉郭晖陈忠华
- 关键词：细胞培养抗体介导细胞凋亡T细胞器官移植
- 移植肝胆道缺血-再灌注损伤的机制被引量：4
- 2005年
- 唐莉
- 关键词：移植肝再灌注损伤血液循环障碍
- 反向克隆法大鼠anti-ERK2腺病毒载体构建被引量：4
- 2006年
- 目的正义基因反向克隆法构建大鼠anti-ERK2腺病毒载体。方法酶切质粒p3XFLAG-CMV7.1-ERK2,得到ERK2cDNA片段,连接到T载体进行测序,经测序正确反向克隆法插入质粒pShuttle中,最后转入AdEasy(tm)XLAdenoviralVectorSystem系统中得到anti-ERK2基因腺病毒载体。结果DraI和NotI双酶切鉴定anti-ERK2基因腺病毒载体,发现插入的基因序列与插入方向均符合预期目标。结论成功构建了大鼠anti-ERK2腺病毒载体,为研究移植排斥中ERK2基因治疗的作用提供了良好工具。
- 董冲刘云宫念樵陈曦林唐莉朱国超陈知水叶启发
- 关键词：腺病毒载体
- 抗HBsAg-Fab重组体在小鼠肝脏的表达被引量：2
- 2006年
- 目的:研究人抗HBsAg-Fab重组体在小鼠体内的表达分泌．方法:将所构建的pXXUF1-HBs-Fab质粒以 5、10、20和40μg的剂量分别利用尾静脉液压法转染C57BL／6小鼠,建立实验1-4组;同时设立pXXUF1质粒转染对照组和空白组．转染 3 d后采集血清和肝、肾、脾等组织标本,运用RT-PCR,ELISA和免疫组织化学染色等方法从基因和蛋白水平分析基因工程抗体人抗 HBsAg-Fab在体内的表达能力．结果:尾静脉液压注射pXXUF1-HBs-Fab组小鼠血清中证实了人源性Fab蛋白的分泌性表达,各实验组血清中表达量分别为201．3± 13．7、213．1±13．5、513．6±12．8和954．1± 12．7μg／L,并具有与HBsAg特异性结合的活性,蛋白表达与注射质粒剂量有正相关(r= 0．912,P<0．01);对照组和空白组血清中则未测到目的蛋白．实验组肝、肾、脾组织RT-PCR 检测可见肝组织中有Fd重链及κ轻链的mRNA 表达;免疫组织化学检测显示肝细胞胞质中有棕黄色阳性颗粒,且部分肾小球毛细血管腔内壁和肾脏集合管壁可见附着的Fab蛋白, 肾实质细胞及脾脏均未见Fd重链及κ轻链的 mRNA和目的蛋白表达;对照组和空白组均未检測到目的蛋白．结论:pXXUF1-HBs-Fab成功于小鼠肝脏分泌表达人抗HBsAg-Fab重组体,其表达水平与质粒DNA注射剂量存在正相关关系,并可通过肾小球滤过代谢．
- 唐莉曾志贵潘桃袁劲陈必成陈忠华陈知水
- 关键词：小分子抗体乙肝表面抗原小鼠
- 肝癌患者接受肝移植的价值评估被引量：5
- 2004年
- 目的 探讨肝癌患者接受肝移植治疗的价值。方法 对 5 0例肝癌患者施行肝移植 ,根据肿瘤的大小、数量和侵犯范围将肝癌分为三期 ,统计分析不同期患者肝移植后的存活率及医疗费用。结果 Ⅰ期患者共 4例 ,术后存活时间均超过 1年 ,最长者已达 3年 ,其半年医疗费用为 (2 1.6 8± 1.0 8)万元 ;Ⅱ期患者共 32例 ,有 7例存活时间超过 1年 ,6个月存活率为 6 8.8% ,半年医疗费用为(2 5 .2 2± 2 .6 0 )万元 ;Ⅲ期患者共 14例 ,仅 1例存活达 12个月 ,平均存活时间 4 .1个月 ,医疗费用为(2 8.4 5± 1.34)万元。结论 综合考虑治疗效果及医疗费用 ,Ⅰ期和Ⅱ期肝癌患者可接受肝移植治疗 ,而Ⅲ期肝癌患者由于肝移植的效果差 ,费用昂贵 ,不宜提倡。
- 陈知水曾凡军明长生张伟杰林正斌魏来蒋继贫朱学海刘敦贵唐莉陈忠华夏穗生
- 关键词：肝癌肝移植存活率肿瘤转移肿瘤复发
- 羧基荧光素乙酰乙酸在移植免疫研究中的应用被引量：4
- 2005年
- 目的:介绍和探讨活体荧光示踪染料羧基荧光素乙酰乙酸(CFDA SE)在移植免疫研究中的应用及价值。 方法:以不同浓度的CFDA SE标记小鼠脾细胞用于体内外实验。标记Balb/c(H2d)和C57BL/6小鼠(H2b)脾细胞 行混合淋巴细胞培养,流式细胞术观察标记细胞的增殖情况。Balb/c裸小鼠(H2d)构建移植物抗宿主(GVHR)、宿 主抗移植物(HVGR)模型;通过流式细胞术检测标记细胞在外周血及脾的增殖情况。 结果:荧光显微镜观察到 标记细胞。流式细胞术检测到标记细胞荧光强度出现倍减现象,表明细胞发生了增殖;无抗原刺激组荧光强度无 明显变化,抗原刺激后24～72h标记细胞停留在脾,第3天后增殖细胞进入外周血液。 结论:羧基荧光素琥珀酰 亚胺酯(CFSE)标记技术可应用于体内、体外实验,有助于对细胞增殖及定位进行检测,在移植免疫实验研究中具 有很高的应用价值。
- 陈必成昌盛杜敦峰唐莉张鑫袁劲周洁陈忠华
- 关键词：移植免疫流式细胞术
- 原代培养人肝细胞体外乙型肝炎病毒感染和乙型肝炎病毒表面抗原黏附模型初探被引量：1
- 2006年
- 目的研究建立人肝细胞体外乙型肝炎病毒(HBV)感染模型和乙型肝炎表面抗原(HBsAg)黏附模型,为后期研究小分子抗体Fab的作用打下基础。方法体外原代培养人肝细胞,对人原代肝细胞进行HBsAg黏附实验及HBV感染实验。采用正常人胎肝细胞系(L-02)及鼠原代肝细胞进行实验对照。倒置相差显微镜下观察细胞形态,生化法检测其白蛋白分泌功能。免疫组化法检测HBsAg黏附情况和HBV感染肝细胞内HBsAg的表达。酶联免疫吸附试验(ELISA)检测肝细胞感染HBV后HBsAg的持续表达。PCR检测肝细胞内HBV复制中间体-闭合环状双链DNA(cccDNA)。结果人原代肝细胞体外培养达2周以上。HBsAg黏附实验检测到HBsAg可黏附于人原代肝细胞、L-02、鼠原代肝细胞胞膜。HBV体外仅感染人原代肝细胞,从第2天起即可检测到细胞培养上清中存在HBsAg,并持续到观察结束第16天,免疫组化检测人原代肝细胞内HBsAg呈阳性;PCR检测到人原代肝细胞内存在HBV-cccDNA,而L-02及鼠原代肝细胞实验检测结果均为阴性。结论人原代肝细胞体外分离培养成功,HBsAg黏附和HBV感染模型初步建立于人原代肝细胞。
- 潘桃唐莉习东魏来明长生陈知水
- 关键词：乙型肝炎病毒表面抗原乙型肝炎病毒
