刘波
- 作品数：10 被引量：21H指数：2
- 供职机构：中国医学科学院北京协和医学院医学生物学研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金云南省应用基础研究基金国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生农业科学生物学更多>>
- 猴源GII.17型诺如病毒P结构域及其变体的目的蛋白
- 本发明公开猴源GII.17型诺如病毒P结构域及其变体的目的蛋白，按照大肠杆菌密码子使用的偏好性来设计VP1基因对应的核苷酸序列，通过人工方法合成相应的核苷酸序列，通过PCR得到其P结构域基因P‑RGD及变体基因P△R，然...
- 刘红旗刘波李超陶玉芬刘建生李昕潼
- EV71病毒中和表位和诺如病毒P结构域嵌合蛋白的原核表达被引量：1
- 2017年
- 目的:构建肠道病毒71型(Enterovirus71,EV71)的线性中和抗原表位与诺如病毒P结构域融合基因的重组质粒,在大肠杆菌中表达诺如病毒P结构域与EV71中和抗原表位的嵌合蛋白。方法:根据已报道的3个EV71线性中和抗原表位的氨基酸序列,按大肠杆菌密码子表达使用的偏好性优化和设计各线性中和抗原表位的核苷酸序列,将这些表位以单个或不同的组合克隆至含诺如病毒P结构域和GST标签的质粒中,经测序确认后,分别转化到E.coli BL21(DE3)感受态细胞中,通过IPTG诱导融合蛋白表达。用GST融合蛋白纯化磁珠对融合蛋白进行纯化,最后通过免疫印迹法确认融合蛋白的表达及嵌合蛋白的抗原性。结果:测序结果表明,成功地构建了含EV71病毒3个单表位和4个串联中和抗原表位的诺如病毒P结构域重组质粒,而且这7个含线性中和抗原表位的嵌合蛋白在大肠杆菌中都以可溶形式得到了表达。免疫印迹分析表达蛋白的抗原性结果表明,表达的嵌合蛋白都能与抗诺如病毒P结构域抗血清反应。除了含单表位的SP55和SP28嵌合蛋白外,其它的嵌合蛋白均能与抗EV71病毒的抗血清反应。结论:成功地在大肠杆菌中表达了诺如病毒P结构域和EV71病毒中和抗原表位的嵌合蛋白,且具有抗原性,这为诺如病毒和EV71病毒的二价疫苗及检测方法的研发奠定了基础。
- 李超刘波陶玉芬李昕潼刘建生刘红旗
- 关键词：肠道病毒71型诺如病毒亚单位疫苗
- 人乳头瘤病毒治疗性疫苗研究进展被引量：2
- 2007年
- 人乳头瘤病毒(HPV)感染引起的疾病流行广泛,但现有治疗手段有限。尽管HPV预防性疫苗即将在世界范围内推广,但从中受益还需数十年时间,而且对于已感染HPV且出现病变的患者,预防性疫苗作用不大。HPV治疗性疫苗主要是针对已感染HPV的患者,其类型有病毒/细菌载体疫苗、肽疫苗、蛋白疫苗、DNA疫苗、细胞疫苗等。
- 刘波赵清正
- 关键词：人乳头瘤病毒疫苗
- 阿司匹林诱导EB病毒转化的人B淋巴细胞凋亡被引量：1
- 2017年
- 目的探讨阿司匹林诱导EB病毒转化的人B淋巴细胞凋亡及其机制。方法 EB病毒转化的人B淋巴细胞经一定浓度的阿司匹林处理后,首先通过MTT法分析细胞的增殖情况;然后用光学显微镜和电子显微镜、PI染色和流式细胞术分析以及琼脂糖凝胶电泳等方法对细胞凋亡进行评价;最后,通过免疫印记法检测凋亡相关蛋白、mTOR信号通路和PU.1-Bim信号通路蛋白表达情况。结果阿司匹林能抑制EB病毒转化的人B淋巴细胞增殖。形态学和超微结构观察发现,阿司匹林处理的细胞固缩变小、数目减少、细胞核畸形、染色质边缘化和细胞质空泡化。阿司匹林处理导致细胞膜通透性增加、细胞存活率明显下降和细胞DNA的弥散现象。免疫印迹分析显示,阿司匹林处理抑制了细胞的mTOR信号和转录因子PU.1的表达水平,激活了细胞凋亡相关蛋白caspase-3、PARP和Bim。结论阿司匹林可能通过抑制EB病毒转化的人B淋巴细胞增殖和诱导细胞凋亡表现一定的抗淋巴瘤效应,mTOR信号途径和PU.1-Bim轴可能参与了阿司匹林抗肿瘤作用机制。
- 陶玉芬刘波李超李昕潼刘建生杨昭庆刘红旗
- 关键词：阿司匹林凋亡MTOR
- 猴源GII.17型诺如病毒P结构域及其变体的目的蛋白
- 本发明公开猴源GII.17型诺如病毒P结构域及其变体的目的蛋白，按照大肠杆菌密码子使用的偏好性来设计VP1基因对应的核苷酸序列，通过人工方法合成相应的核苷酸序列，通过PCR得到其P结构域基因P‑RGD及变体基因P△R，然...
- 刘红旗刘波李超陶玉芬刘建生李昕潼
- 文献传递
- EV71中和抗原表位与诺如病毒P结构域嵌合载体的构建和表达方法
- 本发明旨在提供肠道病毒EV71中和抗原表位与人诺如病毒P结构域嵌合蛋白，及表达载体的构建方法。通过免疫印迹法验证本发明的EV71中和抗原表位与诺如病毒P结构域的嵌合蛋白可用于EV71和诺如病毒的检测试剂盒及新型二价亚单位...
- 刘红旗李超刘波陶玉芬李昕潼刘建生
- 文献传递
- 猴源GII.17型诺如病毒P结构域及其变体的原核表达、纯化和抗原性鉴定
- 目的:表达、纯化和鉴定猴源GII.17型诺如病毒(NoV)基因组P结构域及其变体蛋白。方法:基于本实验室获得的猴源GII.17型NoV基因组P结构域的核苷酸序列,按大肠杆菌密码子使用的偏好性优化P结构域的核苷酸序列,人工...
- 刘波李超陶玉芬和占龙刘红旗
- 关键词：诺如病毒抗原性
- 文献传递
- 猴源GII．17型诺如病毒基因组P结构域及其变体的原核表达、纯化和抗原性鉴定被引量：3
- 2016年
- 目的 表达、纯化和鉴定猴源GII.17型诺如病毒（NoV）基因组P结构域及其变体蛋白.方法 基于本实验室获得的猴源GII.17型NoV基因组P结构域的核苷酸序列,按大肠杆菌密码子使用的偏好性优化P结构域的核苷酸序列,人工合成相应的基因.以此基因为模板,通过PCR方法扩增得到P结构域的变体基因.采用无缝连接的方法将P结构域基因及其变体克隆到原核表达载体,进行蛋白诱导表达和纯化.最后,通过免疫印迹法和ELISA法分析表达蛋白的抗原性.结果 测序结果表明,P结构域及其变体成功地克隆至原核表达载体.SDS-PAGE分析显示,P结构域在原核细胞的超声裂解上清和沉淀中都有表达,而其变体主要表达于上清.免疫印迹和ELISA结果显示,表达纯化得到的P结构域及其变体蛋白具有很好的抗原性.表达的蛋白免疫小鼠制备的相应抗体ELSIA效价可达到1∶32000.结论 成功地表达了猴源GII.17 NoV基因组P结构域及其变体蛋白,并且通过免疫小鼠得到了相应的抗体,为后期检测试剂盒的研发、病毒鉴定和病毒受体结合实验奠定了基础.
- 刘波李超陶玉芬李昕潼刘建生和占龙刘红旗
- 关键词：抗原性
- 猴源GⅡ.17型诺如病毒P结构域及其变体的原核表达、纯化和抗原性鉴定
- 目的：表达、纯化和鉴定猴源GⅡ.17型诺如病毒(NoV)基因组P结构域及其变体蛋白.方法：基于本实验室获得的猴源GⅡ.17型NoV基因组P结构域的核苷酸序列，按大肠杆菌密码子使用的偏好性优化P结构域的核苷酸序列，人工合成...
- 刘波李超陶玉芬和占龙刘红旗
- 关键词：诺如病毒抗原性
- 人诺如病毒最新研究进展被引量：14
- 2017年
- 人诺如病毒是导致人类非细菌性急性胃肠炎的主要原因,近年来其导致的发病率和致死率都在不断升高。人诺如病毒分子进化快、人群感染后持续排毒、低剂量感染及传播途径多样性等原因使得诺如病毒流行较为严重。然而,目前仍没有合适的动物模型以及有效的疫苗。本文主要介绍人诺如病毒的分子生物学特性、流行病学、分离培养、动物模型、检测技术及疫苗研发等方面的研究进展。
- 刘波刘红旗
- 关键词：诺如病毒流行病学动物模型疫苗
