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二十二碳六烯酸对大鼠氧糖剥夺脑微血管内皮细胞Ang-2和VEGF表达的影响被引量：2: 2016年; 目的评价二十二碳六烯酸对大鼠氧糖剥夺脑微血管内皮细胞促血管生成素2（Ang-2）和血管内皮生长因子（VEGF）表达的影响。方法将原代培养大鼠脑微血管内皮细胞采用随机数字表法分为3组（n＝18）：对照组（C组）、氧糖剥夺组（OGD）组和二十二碳六烯酸组（DHA组）。OGD组和DHA组采用无糖、无血清DMEM培养液培养，DHA组加入二十二碳六烯酸40 μmol，在1%O2-5%CO2-94%N2低氧培养箱中孵育；C组在常糖和常氧条件下培养。培养时间为24 h。采用AnnexinV＆PI法检测细胞凋亡情况，ELISA法测定培养液上清液Ang-2、VEGF、前列腺素E2（PGE2）和前列腺素I2（PGI2）的浓度；RT-PCR法检测细胞Ang-2和VEGF的mRNA表达；Western blot法检测环氧化酶-2（COX-2）蛋白的表达。结果与C组比较，OGD组和DHA组细胞凋亡率升高，上清液Ang-2、VEGF、PGE2和PGI2的浓度升高，细胞Ang-2、VEGF的mRNA和COX-2蛋白表达上调（P〈0.05）；与OGD组比较，DHA组细胞凋亡率降低，上清液Ang-2、VEGF、PGE2和PGI2浓度降低，细胞Ang-2、VEGF的mRNA和COX-2蛋白表达下调（P〈0.05）。结论二十二碳六烯酸可抑制大鼠氧糖剥夺脑微血管内皮细胞Ang-2和VEGF的表达，减少细胞凋亡，其机制与降低COX-2蛋白表达有关。; 陈小波余艳丽方海滨夏中元; 关键词：内皮细胞脑血管损伤血管生成素2 血管内皮生长因子类

DHA调节人脑血管周细胞氧糖剥夺-复氧复糖时血管生成素表达的机制：与SSeCKS的关系被引量：1: 2017年; 目的评价二十二碳六烯酸（DHA）调节人脑血管周细胞（HBVPs）氧糖剥夺-复氧复糖时血管生成素（Ang）表达的机制与Src抑制的蛋白激酶C底物（SSeCKS）的关系。方法HBVPs以密度2×105个/ml分别接种于96孔板或6孔板，采用随机数字表法分为5组（n＝18）：正常对照组（C组）、氧糖剥夺-复氧复糖组（OGD/R组）、DHA组（D组）、SSeCKS基因沉默（S组）、SSeCKS基因沉默＋DHA组（SD组）。氧糖剥夺-复氧复糖损伤模型制备方法：采用无糖-无血清培养液，置于94%N2-5%CO2-1%O2条件下缺氧缺糖24 h，再置于高糖DMEM培养基常氧环境中复氧复糖6 h。D组于缺氧前1 h加入DHA，终浓度40 μmol/L。S组和SD组采用siRNA进行SSeCKS基因沉默，随后SD组于缺氧前1 h加入DHA，终浓度40 μmol/L。于复氧6 h时，采用CCK-8法确定细胞存活率，采用ELISA法检测LDH漏出量，采用Western blot法检测SSeCKS、Ang-1和Ang-2的表达。结果与C组比较，OGD/R组细胞存活率降低，LDH漏出量增加，SSeCKS和Ang-1表达下调，Ang-2表达上调，Ang-1/Ang-2比值降低，S组SSeCKS表达下调（P〈0.05）。与OGD/R组比较，D组细胞存活率升高，LDH漏出量降低，SSeCKS和Ang-1表达上调，Ang-2表达下调，Ang-1/Ang-2比值升高（P〈0.05），SD组上述指标差异无统计学意义（P〉0.05）。与D组比较，SD组细胞存活率降低，LDH漏出量升高，SSeCKS和Ang-1表达下调，Ang-2表达上调，Ang-1/Ang-2比值降低（P〈0.05）。结论DHA增加HBVPs氧糖剥夺-复氧复糖时Ang-1/Ang-2比值的机制可能完全与上调SSeCKS表达有关。; 余艳丽夏中元方海滨周斌雷少青; 关键词：周细胞

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方海滨

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