李冰洁
- 作品数：13 被引量：25H指数：3
- 供职机构：江苏省人民医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金江苏省“六大人才高峰”高层次人才项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 支气管肺发育不良早产儿外周血清5-脂氧合酶激活蛋白、白三烯C4合成酶及半胱氨酰白三烯受体1的表达研究被引量：3
- 2019年
- 目的:探讨新生儿呼吸窘迫综合征(neonatal respiratory distress syndrome,NRDS)及支气管肺发育不良(bronchopul-monary dysplasia,BPD)患儿血清中5-脂氧合酶激活蛋白(5-lipoxygenase activating protein,FLAP)、白三烯C4合成酶(leukotriene C4 synthase,LTC4S)及半胱氨酰白三烯受体1(cysteinyl leukotriene receptor 1,CysLTR1)水平变化的意义,旨在寻找BPD早期敏感的生物学指标。方法:收集2015年8月—2017年12月在南京医科大学第一附属医院儿科收治入院的胎龄<37周、出生体重<2 500 g的新生儿病例。待其出院后根据患儿完整住院信息将病例整理为无肺部疾病的早产儿65例(对照组),不合并BPD的NRDS早产儿60例(NRDS组),BPD早产儿49例(BPD组)。采用酶联免疫吸附试验(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)检测新生儿生后3、7、14 d血清中FLAP、LTC4S、CysLTR1水平。比较3组各时间点各指标的浓度水平,采用方差分析、t检验及卡方检验等进行统计学分析。结果:生后3 d BPD组血清FLAP、CysLTR1水平均高于对照组和NRDS组(P均<0.05)。生后7 d BPD组血清FLAP、LTC4S、CysLTR1水平均高于对照组(P均<0.05),BPD组血清FLAP和CysLTR1水平分别高于NRDS组(P <0.05)。生后14 d BPD组仅血清LTC4S水平高于对照组(P <0.05)。结论:生后3 d血清PLAP、CysLTR1水平,生后7 d血清FLAP、LTC4S和CysLTR1水平,生后14 d血清LTC4S水平可作为BPD早期诊断的生物学指标。
- 张晓洁李冰洁孙中怡李淑君吴升华陈筱青
- 关键词：支气管肺发育不良新生儿呼吸窘迫综合征白三烯C4合成酶
- 脂氧素A_4对高氧损伤肺泡Ⅱ型细胞系MLE-12的保护作用
- 2018年
- 目的:探讨脂氧素A_4(Lipoxin A_4,LXA_4)对高氧损伤肺泡Ⅱ型细胞系MLE-12的保护作用及机制。方法:体外传代培养MLE-12细胞,随机分为:空气组、高氧组、高氧+LXA_4组、高氧+转化生长因了(TGF)-β1中和抗体组、高氧+LXA_4+TGF-β1中和抗体组。倒置相差显微镜下观察各组MLE-12形态学变化;实时荧光定量PCR(q RT-PCR)法检测Ⅰ型胶原(collagenⅠ)、肌腱蛋白C(tenascin-C)、TGF-βR1、TGF-βR2和Smad3的m RNA水平。Western blot检测TGF-β1/Smads信号(TGF-βR1、Smad2、Smad3、Smad4、p-Smad2和p-Smad3)蛋白表达。结果:(1)细胞形态:高氧组MLE-12明显失去原有正常细胞形态,细胞变圆,核固缩;药物干预组正常细胞数增多,大部分细胞形态与正常细胞形态基本相似;(2)细胞外基质(extracellular matrix,ECM)m RNA表达:LXA_4和TGF-β1中和抗体能抑制高氧介导的collagenⅠ和tenascin-C m RNA的表达量升高(P<0.05),其中高氧+LXA_4+TGF-β1中和抗体组作用最为显著(P<0.05);(3)TGF-β1/Smads信号m RNA和蛋白含量:LXA_4和TGF-β1中和抗体能抑制高氧介导的TGF-βR1、TGF-βR2和Smad3的m RNA水平以及下调TGF-β1/Smads信号相关蛋白的表达量(P<0.05),其中高氧+LXA_4+TGF-β1中和抗体组细胞的表达量下调最为显著(P<0.05)。结论:LXA_4对高氧损伤肺泡Ⅱ型细胞系MLE-12的保护可能与调控TGF-β1/Smads信号以及collagenⅠ和tenascin-C的表达有关。
- 李淑君李冰洁罗妍妍卢红艳吴升华陈筱青
- 关键词：细胞外基质
- 早期充分氨基酸营养在低出生体质量早产儿中的应用被引量：16
- 2018年
- 目的探讨早期充分氨基酸营养对低出生体质量早产儿生长代谢及预后的影响。方法选取2015年6月至2016年12月南京医科大学第一附属医院收治的早产儿191例，按照氨基酸首剂量用法不同分为2组：研究组（110例）氨基酸起始剂量为1.8～2.5 g/（kg·d），逐日增加1.0 g/（kg·d），直至达到最大剂量4.0 g/（kg·d）；对照组（81例）氨基酸起始剂量为1.0～1.5 g/（kg·d），逐日增加0.5 g/（kg·d），直至达到最大剂量3.5 g/（kg·d）。脂肪乳、葡萄糖及电解质等应用按标准静脉营养方案执行。比较2组患儿住院期间的开奶时间、达完全肠内营养时间、静脉营养时间、恢复出生体质量时间、住院时间、呼吸窘迫综合征的发生率、人工通气时间、低钾血症的发生率等临床指标。结果研究组早产儿住院期间的开奶时间、达完全肠内营养时间、静脉营养时间、恢复出生体质量时间均较对照组显著缩短[（3.83±3.15） d比（5.53±5.63） d，（15.47±10.54） d比（19.47±14.57） d，（16.46±10.33） d比（21.41±18.00） d，（6.36±4.88） d比（8.48±9.27） d]，差异均有统计学意义（t＝2.455、2.097、2.217、2.041，P＝0.016、0.038、0.029、0.043）。研究组住院时间较对照组缩短，住院费用也相应减少，但差异均无统计学意义（均P〉0.05）。研究组呼吸窘迫综合征的发生率明显低于对照组[20.91%（23/110例）比35.80%（29/81例）]，且人工通气时间较对照组缩短[（1.12±2.62） d比（3.31±8.13） d]，差异均有统计学意义（χ^2＝5.223，P＝0.022；t＝2.231，P＝0.028）。研究组低钾血症的发生率高于对照组[30.91%（34/110例）比17.28%（14/81例）]，差异有统计学意义（χ^2＝4.603，P＝0.032）；研究组脓毒症、胆汁淤积、宫外生长发育迟缓、坏死性小肠结肠炎、院内感染、动脉导管未闭、其他代谢紊乱等并发症发生率与对照组比较，�
- 孙中怡李悦李冰洁卜欣欣罗妍妍李淑君胡毓华陈筱青
- 关键词：静脉营养氨基酸婴儿早产
- 脂氧素A4对小鼠肺上皮细胞高体积分数氧损伤的保护作用被引量：2
- 2017年
- 目的探讨脂氧素A4（lipoxin A4，LXA4）在小鼠肺上皮细胞（MLE－12）高体积分数氧（高氧）损伤中的保护作用。方法体外培养MLE－12细胞，分为空气组、空气＋LXA4组、高氧组、高氧＋LXA4组。采用反转录PCR （RT－PCR）验证LXA4受体（ALX） 。设置终浓度为1 nmol/L、10 nmol/L、50 nmol/L的LXA4预处理MLE－12细胞1 h、6 h、12 h、24 h，将细胞置〉850 mL/L的高氧定制容器中培养12 h，采用实时荧光定量PCR（qRT－PCR）检测血红蛋白加氧酶1（HO－1）表达量的变化，以确定LXA4的最佳实验浓度和最佳预处理时间；采用倒置相差显微镜观察细胞形态学变化；台盼蓝染色检测细胞存活率；细胞增殖与毒性检测试剂盒（CCK－8）法检测细胞活力水平；羟胺法检测超氧化物歧化酶（SOD）水平；qRT－PCR检测HO－1 mRNA表达；免疫荧光、Western blot检测HO－1蛋白表达；酶联免疫吸附测定单核细胞趋化蛋白1（MCP－1）、白细胞介素6（IL－6）的表达。结果MLE－12细胞表达ALX；LXA4的最佳干预浓度为10 nmol/L，最佳干预时间为12 h；高氧组细胞的存活率、细胞活力和SOD水平[（66±8）%、0.67±0.21、（2.38±0.65） kU/L]明显低于空气组[（84±5）%、1.22±0.27、（5.33±1.16） kU/L]，差异均有统计学意义（t＝3.98、2.55、4.86, P＝0.01、0.03、0.00），高氧＋LXA4组[（88±5）%、1.43±0.05、（6.50±0.19） kU/L]明显高于高氧组，差异均有统计学意义（t＝4.83、3.52、6.78，P＝0.01、0.02、0.00）；高氧组HO－1 mRNA和蛋白表达（0.57±0.03、1.31±0.11）高于空气组（0.13±0.03、0.24±0.10），差异均有统计学意义（t＝8.00、10.10，均P＝0.00），高氧＋LXA4组（0.78±0.08、1.82±0.09）明显高于高氧组，差异均有统计学意义（t＝3.94、4.82，均P＝0.00）；高氧组炎性因子MCP－1和IL－6水平[（1 025.18±35.51） ng/L、（1 136.65±160.01） ng/L]高于空气组[（467.63±13.69） ng/L�
- 罗妍妍陈筱青吴升华李冰洁李淑君卢红艳
- 关键词：脂氧素A4支气管肺发育不良
- 脂氧素A4对高氧损伤肺泡Ⅱ型细胞系MLE-12的保护作用
- 李淑君李冰洁罗妍妍卢红艳吴升华陈筱青
- 脂氧素A4对高氧损伤小鼠肺上皮细胞的保护机制研究
- 李淑君吴升华李冰洁罗妍妍陈筱青
- 脂氧素A4对高氧损伤小鼠肺上皮细胞的保护机制研究被引量：3
- 2017年
- 目的 探讨脂氧素A4（lipoxin A4,LXA4）通过let-7c基因/转化生长因子 β1（transforming growth factor-β1,TGF-β1）信号通路保护高氧损伤小鼠肺上皮细胞MLE-12的作用机制.方法 体外传代培养MLE-12细胞,待其生长至接近融合状态时,随机分为高氧空白组、LXA4组、let-7c过表达组、let-7c沉默组、let-7c沉默＋LXA4组.各实验组均暴露于85%氧气中,LXA4组给予LXA4干预,let-7c过表达组和let-7c沉默组分别利用脂质体3000转染建立let-7c过表达或let-7c沉默细胞株.let-7c沉默＋LXA4组给予LXA4干预let-7c沉默细胞株.实时荧光定量聚合酶链反应检测细胞外基质,包括 α-平滑肌肌动蛋白（α-smooth muscle actin,α-SMA）、Ⅰ型胶原（collagenⅠ,COL-Ⅰ）、TGF-β1信号通路及相关下游基因Smad 2、Smad 3、Smad 4、转化生长因子β1受体（TGF-βR1）、转化生长因子 β2受体（TGF-βR2）mRNA水平.Western blot检测TGF-β1信号蛋白Smad 2、Smad 3、Smad 4、p-Smad 2、p-Smad 3和TGF-βR1的表达.结果 LXA4组和let-7c过表达组细胞α-SMA、COL-Ⅰ、Smad 3、Smad 4、TGF-βR1、TGF-βR2 mRNA（＆#215;10-4）[LXA4组：（24.3±2.1）、（14.6±0.2）、（17.0±0.0）、（14.9±0.1）、（20.8±0.1）、（9.0±0.0）,let-7c过表达组：（12.2±0.5）、（3.0±0.0）、（3.1±0.0）、（9.6±0.4）、（28.5±0.2）、（7.6±0.1）]低于高氧空白组[（51.4±0.5）、（32.0±0.1）、（40.6±0.2）、（16.3±0.1）、（89.1±1.1）、（19.3±0.2）],let-7c沉默组和let-7c沉默＋LXA4组[let-7c沉默组：（87.3±7.0）、（38.5±0.3）、（48.0±0.2）、（56.5±0.2）、（126.0±0.9）、（33.1±1.0）,let-7c沉默＋LXA4组：（144.5±12.9）、（86.3±3.0）、（91.5±4.7）、（86.5±3.3）、（109.0±4.5）、（45.6±1.6）]高于高氧空白组;LXA4组和let-7c过表达组细胞Smad 2、Smad 3、Smad 4、p-Smad 2、p-Smad 3、TGF-βR1蛋白低于高氧空白组,let-7c沉默＋LXA4组p-Smad 2、p-Smad 3高于高氧空白组,差异�
- 李淑君吴升华李冰洁卢红艳罗妍妍陈筱青
- 关键词：脂氧素类转化生长因子Β1肺损伤高氧症
- hsa_circ_0005389在新生儿急性呼吸窘迫综合征细胞炎症模型中的作用研究
- 2023年
- 目的:基于人环状RNA(circular RNA,circRNA)高通量测序和生物信息学分析结果,研究hsa_circ_0005389与新生儿急性呼吸窘迫综合征(neonatal acuterespiratorydistresssyndrome,NARDS)的关系,以期为NARDS的诊断和治疗提供新的方向。方法:建立脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导急性肺损伤细胞模型。通过RT⁃qPCR及Western blot检测炎性标志物及相关通路指标在阴性对照组和敲低hsa_circ_0005389表达的干预组中的表达变化情况,同时用CCK⁃8与流式细胞仪检测正常A549细胞与建立急性肺损伤模型的A549细胞敲低或者过表达hsa_circ_0005389后的增殖与凋亡情况。结果:RT⁃qPCR及Western blot结果显示,A549细胞暴露于10μg/cm^(2)LPS 48 h时,各炎性标志物及相关通路指标高表达(P<0.05)。与阴性对照组相比,敲低hsa_circ_0005389表达后,A549细胞中可溶性肿瘤坏死因子受体1(soluble tumornecrosisfactorreceptor 1,sTNFR1)mRNA相对表达量和肿瘤坏死因子⁃α(tumor necrosisfactorα,TNF⁃α)蛋白表达量显著降低(P<0.05);在急性肺损伤模型中,敲低hsa_circ_0005389表达后,各炎性标志物及相关通路指标mRNA相对表达量均下降(P<0.001)。CCK⁃8与流式细胞仪检测结果显示,与阴性对照组相比,敲低hsa_circ_0005389表达的A549细胞增殖加快,凋亡率降低(P<0.05),而过表达hsa_circ_0005389后A549细胞增殖减慢,凋亡率增加(P<0.05)。结论:急性肺损伤细胞模型中,hsa_circ_0005389促进肺损伤炎性标志物的表达,并且影响肺上皮细胞的增殖和凋亡,提示hsa_circ_0005389参与NARDS的炎症过程,可能是NARDS潜在的干预靶标。
- 游铭钰周欢张宇涵李冰洁陈筱青
- 关键词：新生儿急性呼吸窘迫综合征炎症肺损伤
- 脂氧素A4对高氧损伤肺泡Ⅱ型细胞系MLE-12的保护作用
- 目的 探讨脂氧素A4(LipoxinA4,LXA4)对高氧损伤肺泡Ⅱ型细胞系MLE-12的保护作用及机制。方法 体外传代培养MLE-12细胞,随机分为：Ⅰ：空气组、Ⅱ：高氧组、Ⅲ：高氧+LXA4组、Ⅳ：高氧+TGF-β1...
- 李淑君李冰洁罗妍妍吴升华陈筱青
- 脂氧素A_4调控转化生长因子-β_1干预小鼠支气管肺发育不良的机制研究被引量：1
- 2016年
- 目的 :探讨脂氧素A4(lipoxin A4,LXA4)对新生小鼠高氧诱导所致的支气管发育不良(bronchopulmonary dysplasia,BPD)的保护作用及可能机制。方法 :利用高氧损伤诱导BPD动物模型,将新生C57BL/6J小鼠随机分成:空气对照组、模型组、LXA4干预组、转化生长因子-β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)中和抗体(1D11)干预组,记录仔鼠体重和生存情况,HE染色观察出生后肺组织病理改变,q PCR法检测肺纤维化指标及转化生长因子-βⅠ型受体(transforming growth factor-βreceptor1,TGF-βR1)和转化生长因子-βⅡ型受体(transforming growth factor-βreceptor 2,TGF-βR2)的表达水平。结果 :1模型组新生小鼠较空气对照组体重减低且活力差。2肺组织大体标本观察:与空气对照组相比,各组小鼠肺体积减小,色泽暗淡。与空气对照组(d13)相比,LXA4干预组和1D11干预组小鼠肺外观与之相仿。3HE染色:除空气对照组外,各组肺组织均产生类似BPD的病理损伤。较模型组(d13)相比,LXA4干预组与1D11干预组的肺泡结构趋于正常化。4q PCR:与空气对照组相比,各组肺纤维化指标:纤维连接蛋白、平滑肌肌动蛋白-α、弹性蛋白、肌腱蛋白C、组织金属蛋白抑制剂-1及TGF-βR1、TGF-βR2的表达量均增加(P<0.05)。与空气对照组相比,各组基质金属蛋白酶1相对表达量减少(P<0.05);其中与模型组相比,LXA4干预组和1D11干预组基质金属蛋白酶1表达量上调(P<0.05),且LXA4干预组上调更为显著(P<0.05)。与空气组对照比较,模型组、LXA4干预组和1D11干预组Ⅰ型胶原表达量增高(P<0.05);其中与模型组相比,LXA4干预组和1D11干预组Ⅰ型胶原表达减少(P<0.05)。结论:LXA4可能是通过抑制TGF-β1信号通路下调肺纤维化相关因子,实现对高氧诱导BPD的保护作用。
- 李冰洁李淑君罗妍妍卢红艳陈筱青吴升华
- 关键词：脂氧素A4转化生长因子-Β1支气管肺发育不良
