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甲型流感病毒核蛋白单克隆抗体制备及其初步应用被引量：1: 2017年; 目的制备甲型流感病毒核蛋白（NP）单克隆抗体,为甲型流感病毒诊断试剂盒以及相关研究提供材料.方法大肠埃希菌BL21 （DE3）表达NP作为免疫原,免疫Balb/c小鼠后取脾脏细胞与SP2/0细胞融合,筛选获得阳性细胞株,注射小鼠腹腔得到单克隆抗体,纯化后进行Western印迹法、ELISA法、细胞免疫染色和荧光法、双抗夹心ELISA法确定NP抗体的生物学特性,探索应用范围.结果从Western印迹法、ELISA和细胞免疫染色法的结果可得知,抗NP单克隆抗体可以与免疫原特异性结合,也可以与H1N1、H3N2亚型流感病毒的NP特异性结合,具备检测流感病毒的能力.双抗夹心ELISA法进一步提升了抗体对抗原的检测灵敏度至128 pg.同时,通过细胞免疫荧光法观察到抗体可在细胞内显示NP从细胞核扩散到细胞质的过程.结论制备的抗体成功检测H1N1、H3N2两种亚型的流感病毒,可作为用于流感防治的流感病毒诊断试剂盒的材料.; 张儒轩沃恩康丁建祖方迪陈帅帅杨新燕郭潮潭; 关键词：流感病毒A型核蛋白单克隆抗体

基于流感病毒血凝素茎部结构域的通用疫苗研究进展被引量：2: 2018年; 流感病毒因其变异快、传播速度快、感染性和致病性强等特点严重威胁着人类健康,通用流感疫苗的制备迫在眉睫,流感病毒血凝素茎部结构域因其保守性和诱导广泛保护性免疫的潜能,成为通用疫苗的研究重点,本文就流感病毒血凝素茎部通用疫苗的最新研究进展进行综述。; 杨新燕沃恩康张儒轩方迪刘亚辉郭潮潭; 关键词：甲型流感病毒血凝素

H3N2亚型流感病毒分离株遗传进化分析及其生物特性被引量：3: 2017年; 目的明确人流感分离株A/Guangdong/SKLRD01/2017（简写为SKLRD01）株的序列特征、分子进化及生物学特性.方法从全球倡议分享流感数据库（GISAD）和美国国立生物信息中心（NCBI）数据库中获取研究所需的流感毒株基因组全序列,通过BioEdit7.0.9软件对比SKLRD01各节段基因与其他相关毒株序列比.用Mega 5.0软件Neighbor-Joining法绘制毒株血凝素（HA）和神经氨酸酶（NA）基因进化树,并全面分析毒株的基因组序列特征、进化、传染性、致病性、药物敏感性和抗原性等.结果 SKLRD01属于典型的H3N2季节性流感病毒,其HA基因属于H3亚型的3C.2a进化分支,此分支毒株已在我国华南地区广泛流行.其NA基因与在全球范围内流行的人H3N2毒株遗传关系接近,此类NA基因在流行株中占主导地位.SKLRD01具备人际间传播的能力,呈现部分高致病性病毒特征,对奥司他韦敏感,对金刚烷胺类耐药.与疫苗株相比,SKLRD01在抗原区仅出现涉及A、C两个表位区的3个氨基酸突变,提示现有疫苗依然有效.结论 SKLRD01属于H3N2亚型季节性流感病毒,未出现较大变异.抗原性有较小漂移,注射现有疫苗依然是最好的预防手段.同时需加强对这类病毒变异的监测,用来及时更新疫苗株,防止流感大流行的暴发.; 沃恩康杨新燕徐琦方迪刘亚辉郭潮潭; 关键词：流感病毒A型 H3N2亚型遗传进化分子特性

H5N6人禽流感病毒分离株序列分析及其生物学特日期究被引量：1: 2017年; 目的分析研究H5N6人禽流感病毒基因组序列特征，明确该病毒的分子进化及生物学特性。方法从GenBank和GISAI中获取人H5N6分离株全序列，通过软件BioEdit7．0．9对各节段基因与其他相关毒株序列进行比对。用软件Mega5．0，Neighbor—Joining法绘制血凝素（HA）和神经氨酸酶（NA）基因进化树，并全面分析病毒株的基因组序列特征、病毒进化及来源、传染性、致病性和药物敏感等。结果H5N6病毒的基因组完全属于禽源特征，根据病毒进化及来源可分为两大类。HA基因都属于H5亚型的2．3．4．4进化支，NA基因都来源于H6N6亚型毒株，属于欧亚谱系。其余6段内部基因分别来自于H9N2亚型或H5亚型2.3.2．1进化支毒株。该病毒尚不能在人与人之间有效传播，呈现高致病性病毒特征，对奥斯他韦敏感，但部分毒株对金刚烷胺类药物耐药。结论H5N6人禽流感分离株并不属于同一毒株，是由H5N1、H5N2、H6N6、H9N2等亚型毒株通过不同组合而重配产生，需加强对这类病毒及其宿主的监控。; 沃恩康王怡婷杨新燕张儒轩方迪刘亚辉郭潮潭; 关键词：流感病毒A型基因组分子特性

核输出蛋白在流感病毒感染与传播中的作用被引量：1: 2017年; 核输出蛋白(NEP)是一个由甲型流感病毒第8段基因编码的约为14 k D的蛋白。NEP最初被认为参与病毒核糖核蛋白复合体的出核。相对于流感病毒的其他几个蛋白,关于NEP的研究很少被报道。近年来,随着蛋白立体结构的确定、研究的不断深入,NEP在流感病毒活动中很多意想不到的作用不断被发现。这些研究显示NEP参与病毒的转录和复制,促进H5N1禽流感病毒在哺乳动物体内的适应以及参与病毒的出芽。本文系统总结了NEP的功能,包括参与病毒核糖核蛋白复合体的出核的过程、调节病毒聚合酶的活性以及帮助H5N1禽流感病毒实现跨种间传播等,为进一步研究NEP奠定基础。; 方迪郭潮潭; 关键词：流感病毒蛋白结构生物特性

甲型流感病毒核输出蛋白的原核表达及其抗体制备: 研究背景:甲型流感病毒属于正粘病毒科,可以引起人畜共患疾病。甲型流感病毒可以通过抗原漂移不断地变异来逃避免疫系统的攻击,引起小范围的流行;或通过抗原更换产生新的毒株引起全球性的流感大流行。目前的流感疫苗作用有限,同时伴随...; 方迪; 关键词：甲型流感病毒单克隆抗体; 文献传递

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