李佳娟
- 作品数：6 被引量：4H指数：1
- 供职机构：山西医科大学第二医院更多>>
- 发文基金：山西省回国留学人员科研经费资助项目山西省青年科技研究基金国家杰出青年科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 含PxIxIT模序烟曲霉KpsF基因作用初探
- 背景：烟曲霉是一种常见的腐生真菌，侵袭性曲霉病（Invasive aspergillosis,IA）约90％由烟曲霉引起，其病死率呈上升趋势，其治疗成为当前临床常见的疑难问题。钙调磷酸酶（Calcineurin,CaN）...
- 李佳娟
- 关键词：皮肤感染细胞病理学
- 烟曲霉Bem46基因敲除株构建及其功能初步研究被引量：3
- 2017年
- 目的构建烟曲霉Bem46基因敲除株,初步明确Bem46基因在烟曲霉生长出芽和各种压力传导中的作用,以及对细胞壁形成的影响。方法采用生物信息学方法查找烟曲霉中Bem46基因,设计引物,并以pyrG作为筛选标记构建烟曲霉Bem46基因敲除株(ΔBem46)。观察含不同压力物质培养基上对照菌株和ΔBem46径向生长速度,观察两菌株发芽状况以及在含有细胞壁抑制剂培养基上的生长状况。结果通过序列比对在烟曲霉基因组中找到了Bem46基因,其编号为Afu7g04660,由1 116bp碱基组成,编码311个氨基酸。使用原生质体法得到烟曲霉ΔBem46并经PCR和Southernblot确认。经观察在含有山梨醇作为渗透压力来源的培养基上ΔBem46生长明显较对照菌株快。显微镜下观察到在GMM液体培养基中,ΔBem46发芽速度慢于对照株。结论烟曲霉Bem46基因涉及由山梨醇引起的渗透压压力传导,并且该基因对促进孢子发芽可能有作用。
- 李雯李佳娟冯文莉马彦
- 关键词：烟曲霉发芽率信号传导
- 含PxIxIT模序烟曲霉KpsF基因作用初探被引量：1
- 2017年
- 目的构建烟曲霉KpsF基因缺陷株,初步了解KpsF基因在烟曲霉生长及与钙调磷酸酶相互作用关系。方法PCR扩增烟曲霉KpsF基因及其上、下游各约1.0kb的DNA片段,以pyrG为筛选标记,原生质体法构建KpsF基因缺陷株ΔKpsF;观察ΔKpsF一般生长状况;实时荧光定量PCR方法检测Ku80(对照组)和ΔKpsF(实验组)在含有不同浓度CaCl_2的液体GMM培养基中钙调磷酸酶催化亚基(CnaA)相对表达水平。结果烟曲霉ΔKpsF和Ku80径向生长差异无统计学意义(P>0.05);表型未见明显差别;ΔKpsF在10mmol/L CaCl_2GMM液体培养基的CnaA相对表达量显著高于对照组Ku80(P<0.01),而100mmol/L CaCl_2的CnaA相对表达量却没有明显变化(P>0.05)。结论 KpsF基因缺陷对烟曲霉的径向和表型生长没有明显影响,对CnaA表达量的影响与Ca^(2+)浓度有关。在低浓度Ca^(2+)条件下,KpsF可能参与对钙调磷酸酶的负反馈调节作用,而在高浓度的Ca^(2+)条件下,这种负反馈调节作用受到抑制。
- 李佳娟李雯马彦
- 关键词：烟曲霉钙调磷酸酶
- 具有PxIxIT模序的钙调磷酸酶底物或靶蛋白的研究进展
- 2017年
- 钙调磷酸酶(CaN)广泛存在于真核生物中并且在进化上相对保守,是临床常用的免疫抑制剂环孢素A(CsA)和他克莫司(FK506)的靶蛋白,它能识别各种底物,并且控制真核细胞中的各种发育和生理功能相关的传导路径。在CaN的多种底物中有类似PxIxIT模序存在,并且该模序内任何一个氨基酸的精细变动可以同各底物相应的生理信号传导相对应。由此可见,PxIxIT模序在真核生物生理功能的正常发挥中有着重要的作用。该文对与CaN相互作用并且具有类似PxIxIT模序的底物与靶蛋白进行了综述。
- 李佳娟马彦
- 关键词：活化T细胞核因子真核生物
- KpsF基因对烟曲霉生长的影响以及抗真菌药物作用下的生长变化
- 2021年
- 目的KpsF基因在烟曲霉生长中的作用目前还未明确。文中旨在构建烟曲霉KpsF基因荧光定位菌株和过表达菌株,明确该基因对烟曲霉生长和在抗真菌药物作用下的生长变化情况。方法构建烟曲霉KpsF基因敲除株(ΔKpsF)、KpsF过表达菌株。光学显微镜观察菌落特征,利用激光共聚焦显微镜观察绿色荧光在烟曲霉生长中的定位变化;采用斑点法观察菌株在抗真菌药物作用下生长变化情况。结果同Ku80和△KpsF相比,烟曲霉KpsF基因过表达株菌落直径显著缩小(P<0.05)。低倍显微镜下观察可见:△KpsF和Ku80菌丝细长,排列整齐,舒展,菌丝分支角度多为45°;而KpsF过表达菌株菌丝生长较致密,分枝繁多,且菌丝短小,分支角度相对较大。高倍显微镜下观察可见:△KpsF和Ku80的分生孢子头规整,呈短柱状,梗壁光滑;KpsF过表达菌株分生孢子头明显发育不良,孢子头欠饱满,顶囊单层小梗不清晰。激光共聚焦显微镜观察示烟曲霉孢子状态下绿色荧光弥漫分布于整个细胞中,而在菌丝状态下可见荧光在隔膜处有明显聚集。KpsF过表达株菌菌落直径分别和卡泊芬净、伊曲康唑、两性霉素B浓度呈负相关(r=-0.568、-0.743、-0.813,P<0.05)。卡泊芬净浓度>1.0μg/mL时,△KpsF、Ku80菌株菌落直径分别和卡泊芬净浓度呈正相关(r=0.927、0.915,P<0.05),卡泊芬净浓度<1.0μg/mL时,△KpsF、Ku80菌株菌落直径分别和卡泊芬净浓度呈负相关(r=-0.929、-0.923,P<0.05)。△KpsF、Ku80菌株菌落直径同伊曲康唑、两性霉素B浓度均呈负相关(P<0.05)。结论烟曲霉KpsF基因过表达会影响烟曲霉的生长,且该基因可能参与烟曲霉生长形成分隔过程。KpsF基因缺陷在含卡泊芬净培养基上存在矛盾生长现象,过表达菌株无此现象。
- 马彦冀英杨静岑雯曹雪李佳娟冯文莉
- 关键词：烟曲霉过表达
