吴菲菲 作品数:4 被引量:12 H指数:2 供职机构: 第四军医大学基础医学部人体解剖学教研室暨梁銶琚脑研究中心 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 更多>>
京尼平通过线粒体动力学缓解氧化应激诱导的Neuro-2a细胞凋亡 被引量:5 2018年 目的:观察京尼平(genipin)对H2O2诱导Neuro-2a细胞凋亡的影响,并对其机制进行初步探讨。方法:体外培养Neuro-2a细胞,利用400μmol/L H2O2诱导6 h建立Neuro-2a凋亡模型。处于对数生长期的Neuro-2a细胞随机分为对照组、模型组、京尼平组、京尼平预处理后模型组。MTT法测定细胞存活率;倒置相差显微镜观察细胞形态;Annexin V-FITC/PI双染法流式细胞仪检测细胞凋亡率;DCFH-DA(2,7-二氯荧光素二乙酸酯)染色、流式细胞仪检测细胞内线粒体活性氧(ROS)的产生;qRT-PCR检测UCP2、UCP4、Mfn2、Drp1 mRNA表达;Western blot测定UCP2、UCP4、Mfn2、Drp1蛋白表达。结果:与对照组相比,模型组细胞存活率显著降低,细胞凋亡率增加,ROS生成量升高,同时UCP2、Drp1蛋白及mRNA表达增加,Mfn2蛋白及mRNA表达降低,UCP4及mRNA蛋白表达无明显变化。提前给予京尼平(40μmol/L)干预后,与模型组相比,细胞存活率提高,细胞凋亡率降低,ROS生成量减少,同时UCP2、Drp1蛋白及mRNA表达减少,Mfn2蛋白及mRNA表达升高,但UCP4蛋白及mRNA表达无明显变化。以上指标相比,差异均有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。结论:适宜浓度的京尼平能缓解氧化应激诱导的Neuro-2a细胞凋亡,其机制可能与抑制UCP2蛋白表达,促进线粒体融合进而改善线粒体功能有关。 谢祥军 吴菲菲 王圣明 拜云虎 王亚云 杨瑞华关键词:京尼平 氧化应激 凋亡 遗传学技术在神经科学中的使用策略 被引量:6 2017年 近年来,在神经科学领域,遗传学技术的兴起实现了选择性靶向操控细胞活性的革命性改变,其中,使用最普遍的技术是化学遗传学和光遗传学。两者的用途均是激活或抑制某一特殊类型神经元。通过观察该神经元生物学特性的改变,所在神经通路的可塑性改变以及动物行为学变化,综合分析明确某一类型神经元的生物学功能。二者的差异在于受体被激活的途径。本文对以上两种技术做以慨要介绍,考虑到二者相似性很大,因此,本文首先对化学遗传学进行详细介绍,然后采用对比的方式介绍光遗传学及其使用策略。 吴菲菲 谢祥军 罗婷婷 王圣明 拜云虎 王嘉琪 武胜昔 杨瑞华 杨雁灵 王亚云关键词:化学遗传学 神经科学 急性肝衰竭小鼠线粒体分裂蛋白DRP1在肝脏和大脑皮层的表达变化 被引量:1 2017年 目的:观察C57小鼠急性肝衰竭(acute liver failure,ALF)过程中线粒体分裂蛋白(dynamic-related protein 1,DRP1)在肝脏和大脑皮层中的变化及与肝衰竭的相关性。方法:C57/BL小鼠,随机分为对照组、ALF1d、4 d、7 d组。腹膜腔内注射硫代乙酰胺(TAA)建立ALF模型,利用高架十字和旷场实验测定行为学,取血清检测谷氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)水平;之后取肝组织,HE染色观察肝组织的病理变化;用Western Blot和RT-q PCR检测DRP1在肝脏和大脑皮层中蛋白及mRNA水平的表达变化。结果:(1)行为学结果显示:ALF各组小鼠自发活动及探索行为均明显降低(P<0.05);(2)肝功检测ALF组ALT、AST表达水平明显升高(P<0.05);(3)肝组织病理学检查ALF组1 d时肝细胞出现大面积坏死,7 d时肝细胞坏死较1 d、4 d缓解;(4)Western Blot检测DRP1在ALF全肝组织和肝线粒体中明显降低(P<0.05);而在大脑皮层全组织蛋白中明显升高(P<0.05),但在提取的线粒体中则无明显改变(P>0.05);(5)RT-q PCR检测DRP1在肝组织中ALF各组中表达明显降低(P<0.05);而在大脑皮层组织中1 d时表达增多,持续到4 d,在7 d时恢复(P<0.05)。结论:DRP1在急性肝衰竭小鼠的肝脏和大脑皮层中对线粒体形态学发挥着重要的作用。 王圣明 拜云虎 吴菲菲 王东辉 王嘉琪 戴春秋 杨雁灵 王亚云关键词:急性肝衰竭 线粒体 肝脏 皮层 小鼠 基于FISH技术研究线粒体分裂蛋白Drp1 mRNA在小鼠杏仁复合体的分布 2017年 目的:最新研究表明,对线粒体的分裂进行精密调控的关键蛋白是Drp1(dynamin-related protein 1,Drp1)。杏仁复合体属于中枢神经系统边缘系统的一部分,功能重要但是非常复杂。本研究拟通过荧光原位杂交(fluorescence in situ hybridization,FISH)技术对Drp1在杏仁复合体的分布特点进行描述。方法:本实验通过自行设计Drp1基因的引物、合成探针,同时采用(FISH)进行染色观察,得到Drp1 mRNA在小鼠杏仁核复合体的分布特点。结果:研究发现,Drp1 mRNA几乎分布于全部杏仁核,且在内侧杏仁核、皮质杏仁核和基底杏仁核的表达水平非常高。亚细胞水平研究进一步表明,Drp1 mRNA全部位于神经元胞体,特别是核周区域,而在突起处未见其表达。结论:以上结果提示,Drp1可能通过调节杏仁复合体处神经元的线粒体的分裂状态,参与动物的内脏活动、防御功能以及情绪变化。但是具体机制尚需进一步研究。 罗婷婷 王嘉琪 王圣明 戴春秋 拜云虎 郭保霖 吴菲菲 谢祥军 罗世城 王东辉 杨雁灵 王亚云 武胜昔关键词:杏仁复合体 小鼠