王圣明 作品数:10 被引量:31 H指数:4 供职机构: 第四军医大学 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 中国高等教育学会医学教育专业委员会医学教育研究立项课题 更多>> 相关领域: 医药卫生 文化科学 生物学 更多>>
京尼平通过线粒体动力学缓解氧化应激诱导的Neuro-2a细胞凋亡 被引量:5 2018年 目的:观察京尼平(genipin)对H2O2诱导Neuro-2a细胞凋亡的影响,并对其机制进行初步探讨。方法:体外培养Neuro-2a细胞,利用400μmol/L H2O2诱导6 h建立Neuro-2a凋亡模型。处于对数生长期的Neuro-2a细胞随机分为对照组、模型组、京尼平组、京尼平预处理后模型组。MTT法测定细胞存活率;倒置相差显微镜观察细胞形态;Annexin V-FITC/PI双染法流式细胞仪检测细胞凋亡率;DCFH-DA(2,7-二氯荧光素二乙酸酯)染色、流式细胞仪检测细胞内线粒体活性氧(ROS)的产生;qRT-PCR检测UCP2、UCP4、Mfn2、Drp1 mRNA表达;Western blot测定UCP2、UCP4、Mfn2、Drp1蛋白表达。结果:与对照组相比,模型组细胞存活率显著降低,细胞凋亡率增加,ROS生成量升高,同时UCP2、Drp1蛋白及mRNA表达增加,Mfn2蛋白及mRNA表达降低,UCP4及mRNA蛋白表达无明显变化。提前给予京尼平(40μmol/L)干预后,与模型组相比,细胞存活率提高,细胞凋亡率降低,ROS生成量减少,同时UCP2、Drp1蛋白及mRNA表达减少,Mfn2蛋白及mRNA表达升高,但UCP4蛋白及mRNA表达无明显变化。以上指标相比,差异均有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。结论:适宜浓度的京尼平能缓解氧化应激诱导的Neuro-2a细胞凋亡,其机制可能与抑制UCP2蛋白表达,促进线粒体融合进而改善线粒体功能有关。 谢祥军 吴菲菲 王圣明 拜云虎 王亚云 杨瑞华关键词:京尼平 氧化应激 凋亡 腹腔镜手术视频资料在人体解剖学实验教学中的应用探索 被引量:6 2017年 第四军医大学 2012 年级、2013 年级和 2014 年级八年制学生《人体解剖学》实验教学阶段,由基础医学院人体解剖学教研室和附属第一医院肝胆外科学教研室通力合作,连续三年将腹腔镜手术视频资料引入课堂教学,主要在腹腔镜下直示观察腹部脏器的解剖学要点,极大地激发了学生们的学习兴趣,教学更具“立体、动态、逼真”的效果. 杨雁灵 王亚云 王圣明 拜云虎 冯宇鹏 张明明 陈晶 寇珍珍 陶开山 李云庆 岳树强关键词:解剖学实验教学 腹腔镜手术 视频 解剖学教研室 《人体解剖学》 超声成像技术在解剖学实验教学中的新应用 被引量:3 2017年 人体解剖学是各专业、各层次医学生所接触的第一门基础医学课程,第四军医大学在解剖学实验教学一直坚持采用以学生为中心的 5R 式教学模式[1],同时辅助以 PBL(problem based learning)教学形式,取得了较好的教学效果,在 2012 年全校毕业学生无记名投票中,以第一名的成绩被学生评选为“最受欢迎的课程”.但是,我们清醒地认识到,人体解剖学课程的实施对象是大学一年级学生,而他们的医学知识尚是空白,因此,如何最大程度地调动学生积极性,始终激励他们牢固掌握繁杂浩大的解剖学知识,是解剖教学的重要课题.超声以无创、便捷、价廉和高效等优点在临床诊疗过程中被广泛应用.为弥补解剖学实验操作局限于尸体标本的不足,我们将超声便携式超声诊断仪引入 2014 年级八年制临床医学和口腔医学的人体解剖学实验课教学中,希望逐步构建超声成像应用于解剖实验教学的新模式,以有效提高教学效果. 王圣明 王亚云 冯宇鹏 张明明 陈晶 寇珍珍 李云庆 杨雁灵关键词:解剖学实验教学 超声成像技术 基础医学课程 人体解剖学 以学生为中心 急性肝损伤小鼠中线粒体解耦联蛋白2的表达变化及意义 被引量:1 2018年 目的:观察C57小鼠急性肝损伤(acute liver injury,ALI)中解偶联蛋白2(Uncouple Protein2,UCP2)的表达,探讨ALI与UCP2表达变化的意义。方法:领取36只小鼠,随机分为对照组、ALI 1 d组、ALI 4 d组、ALI 7 d组。分别检测血清谷氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)的变化;肝组织病理变化用HE染色观察;利用Western Blot方法分别检测全肝组织蛋白和肝细胞线粒体提纯蛋白中的UCP2蛋白水平的变化;Real Time quality PCR检测UCP2在mRNA水平的表达变化。结果:ALI组1 d、4 d组与对照组相比,ALT(160.69±22.11 vs 34.43±5.19;96.37±15.39 vs 34.43±5.19)、AST(306.54±68.09 vs 97.74±14.49;173.94±26.74 vs 97.74±14.49)表达差异具有统计学意义(P<0.05);肝组织病理学检查ALI组1 d和4 d组中肝细胞出现大面积坏死,7d组肝细胞坏死缓解;蛋白水平检测UCP2在ALI 1 d和4 d时全肝组织分别增加2.84倍和2.25倍,在肝线粒体中1 d、4 d和7 d时分别增加2.19倍、1.68倍和1.56倍,差异具有统计学意义(P<0.05);mRNA水平检测UCP2在ALI 1 d和4 d与对照组相比明显升高,相对增加3.79倍和1.46倍(P<0.05)。结论:急性肝损伤状态下UCP2在蛋白和mRNA水平高表达,UCP2可能对于治疗急性肝损伤具有重要意义。 拜云虎 王圣明 王东辉 王亚云 杨雁灵关键词:急性肝损伤 线粒体 解耦联蛋白2 小鼠 脊髓背角Ⅰ-Ⅲ层疼痛神经环路的研究进展 被引量:2 2017年 脊髓背角是痛信息传递的关键门户。大量研究结果证明,几乎没有来自于外周的痛信息仅在脊髓中继就简单地向上位脑结构传递。目前能够肯定的是,脊髓背角存在较为复杂的神经环路,该环路的传人是不同类型的初级传人纤维, 王嘉琪 王圣明 严育东 孔牧 罗世城 杨静 戴春秋 杨雁灵 王亚云关键词:脊髓 疼痛 神经环路 遗传学技术在神经科学中的使用策略 被引量:6 2017年 近年来,在神经科学领域,遗传学技术的兴起实现了选择性靶向操控细胞活性的革命性改变,其中,使用最普遍的技术是化学遗传学和光遗传学。两者的用途均是激活或抑制某一特殊类型神经元。通过观察该神经元生物学特性的改变,所在神经通路的可塑性改变以及动物行为学变化,综合分析明确某一类型神经元的生物学功能。二者的差异在于受体被激活的途径。本文对以上两种技术做以慨要介绍,考虑到二者相似性很大,因此,本文首先对化学遗传学进行详细介绍,然后采用对比的方式介绍光遗传学及其使用策略。 吴菲菲 谢祥军 罗婷婷 王圣明 拜云虎 王嘉琪 武胜昔 杨瑞华 杨雁灵 王亚云关键词:化学遗传学 神经科学 解偶联蛋白在肝性脑病小鼠黑质和前额叶皮层中表达变化 2018年 目的:观察不同时间内肝性脑病(Hepatic encephalopathy,HE)小鼠黑质和大脑前额叶皮层中线粒体解偶联蛋白2/4(Uncoupling Protein 2/4,UCP2/4)的变化及可能的关系。方法:取C57/BL小鼠,随机分为sham组、HE 1 d、4 d、7 d四组。HE组小鼠腹膜腔内注射硫代乙酰胺(TAA),sham组注射同等剂量的Na Cl。用Elisa检测小鼠血清中血清氨水平;随后分别运用Western Blot和RT-q PCR测定UCP2/4在黑质和前额叶皮层全组织蛋白和线粒体蛋白水平变化以及mRNA水平中的表达差异。结果:(1)肝性脑病组小鼠血氨水平较对照组小鼠明显升高(P<0.01);在蛋白水平检测发现,(2)肝性脑病黑质中UCP2在总组织和线粒体水平表达均明显增加(P<0.001),而UCP4却无明显变化(P>0.05);(3)在肝性脑病前额叶皮层中UCP2和UCP4在总蛋白水平和线粒体提纯蛋白水平中均明显增加(P<0.05);在RT-q PCR水平检测,(4)肝性脑病小鼠黑质中UCP2水平显著增加(P<0.01),而UCP4未见明显变化(P>0.05);(5)肝性脑病小鼠前额叶皮层发现UCP2(P<0.001)和(P<0.01)UCP4在mRNA水平均显著升高。结论:肝性脑病小鼠黑质和前额叶皮层中线粒体解偶联蛋白2和4发挥着重要的作用。 拜云虎 王圣明 谢祥军 吴菲菲 王亚云 杨雁灵关键词:解偶联蛋白 肝性脑病 黑质 前额叶皮层 小鼠 脑能量代谢与线粒体功能关系的研究进展 被引量:7 2018年 线粒体是人体内的能量代谢工厂,而脑是人体内能量代谢最活跃的部位。神经元和胶质细胞是脑内主要的细胞。本文对线粒体在能量产生的作用进行综述,同时比较神经元和星形胶质细胞能量代谢的异同及密切联系,并对神经退行性变中能量代谢障碍与线粒体可塑性改变进行了回顾。以三种神经退行性疾病帕金森、阿尔兹海默和脊髓侧索硬化症为例说明线粒体在神经系统疾病和脑能量代谢之间的重要作用。从而进一步系统的认识,脑内的线粒体在生理和病理状态下对能量代谢的影响。深入了解其机制,为研究神经系统退行性疾病提供新的治疗策略。 拜云虎 戴春秋 王嘉琪 王圣明 王亚云 杨雁灵关键词:能量代谢 线粒体 神经退行性变 急性肝衰竭小鼠线粒体分裂蛋白DRP1在肝脏和大脑皮层的表达变化 被引量:1 2017年 目的:观察C57小鼠急性肝衰竭(acute liver failure,ALF)过程中线粒体分裂蛋白(dynamic-related protein 1,DRP1)在肝脏和大脑皮层中的变化及与肝衰竭的相关性。方法:C57/BL小鼠,随机分为对照组、ALF1d、4 d、7 d组。腹膜腔内注射硫代乙酰胺(TAA)建立ALF模型,利用高架十字和旷场实验测定行为学,取血清检测谷氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)水平;之后取肝组织,HE染色观察肝组织的病理变化;用Western Blot和RT-q PCR检测DRP1在肝脏和大脑皮层中蛋白及mRNA水平的表达变化。结果:(1)行为学结果显示:ALF各组小鼠自发活动及探索行为均明显降低(P<0.05);(2)肝功检测ALF组ALT、AST表达水平明显升高(P<0.05);(3)肝组织病理学检查ALF组1 d时肝细胞出现大面积坏死,7 d时肝细胞坏死较1 d、4 d缓解;(4)Western Blot检测DRP1在ALF全肝组织和肝线粒体中明显降低(P<0.05);而在大脑皮层全组织蛋白中明显升高(P<0.05),但在提取的线粒体中则无明显改变(P>0.05);(5)RT-q PCR检测DRP1在肝组织中ALF各组中表达明显降低(P<0.05);而在大脑皮层组织中1 d时表达增多,持续到4 d,在7 d时恢复(P<0.05)。结论:DRP1在急性肝衰竭小鼠的肝脏和大脑皮层中对线粒体形态学发挥着重要的作用。 王圣明 拜云虎 吴菲菲 王东辉 王嘉琪 戴春秋 杨雁灵 王亚云关键词:急性肝衰竭 线粒体 肝脏 皮层 小鼠 基于FISH技术研究线粒体分裂蛋白Drp1 mRNA在小鼠杏仁复合体的分布 2017年 目的:最新研究表明,对线粒体的分裂进行精密调控的关键蛋白是Drp1(dynamin-related protein 1,Drp1)。杏仁复合体属于中枢神经系统边缘系统的一部分,功能重要但是非常复杂。本研究拟通过荧光原位杂交(fluorescence in situ hybridization,FISH)技术对Drp1在杏仁复合体的分布特点进行描述。方法:本实验通过自行设计Drp1基因的引物、合成探针,同时采用(FISH)进行染色观察,得到Drp1 mRNA在小鼠杏仁核复合体的分布特点。结果:研究发现,Drp1 mRNA几乎分布于全部杏仁核,且在内侧杏仁核、皮质杏仁核和基底杏仁核的表达水平非常高。亚细胞水平研究进一步表明,Drp1 mRNA全部位于神经元胞体,特别是核周区域,而在突起处未见其表达。结论:以上结果提示,Drp1可能通过调节杏仁复合体处神经元的线粒体的分裂状态,参与动物的内脏活动、防御功能以及情绪变化。但是具体机制尚需进一步研究。 罗婷婷 王嘉琪 王圣明 戴春秋 拜云虎 郭保霖 吴菲菲 谢祥军 罗世城 王东辉 杨雁灵 王亚云 武胜昔关键词:杏仁复合体 小鼠