朱俊峰
- 作品数：4 被引量：6H指数：2
- 供职机构：辽宁大学生命科学院更多>>
- 发文基金：辽宁省教育厅高校重点实验室项目病毒学国家重点实验室开放研究基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学自然科学总论医药卫生更多>>
- 人核仁磷酸化蛋白NOLC1的原核表达和纯化方法
- 本发明公开了一种人核仁磷酸化蛋白NOLC1的原核表达和纯化方法。涉及基因工程技术领域。本发明中构建pET28a-NOLC1原核表达载体，并将其转化于BL21菌株中，经诱导产生His-NOLC1融合蛋白，使用镍离子螯合柱(...
- 刘宏生朱春玉郑方亮佘晓双朱俊峰张力
- 文献传递
- H5N1亚型禽流感病毒NS1基因的克隆及原核表达被引量：3
- 2011年
- 克隆、表达和纯化禽流感病毒H5N1 NS1基因序列,为筛选与NS1相互作用的宿主蛋白以及深入研究NS1蛋白的功能打下基础.根据GenBank中收录的H5N1亚型禽流感病毒NS1基因序列,设计并合成一对特异性引物,利用RT-PCR方法扩增AIV NS1基因,将酶切处理后的基因片段定向克隆到原核表达载体pET-28a载体上,经酶切分析及序列测定正确后,鉴定出NS1基因的阳性重组子.阳性质粒转化大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞,用1 mmol/L IPTG诱导表达,表达产物进行SDS-PAGE检测,获得预期蛋白的表达,通过Ni-NTA树脂蛋白纯化系统对NS1蛋白进行纯化.结果成功克隆H5N1亚型AIV的NSl基因,其核苷酸序列长度为678 bp,重组蛋白在大肠杆菌中可以高效表达,SDS-PAGE显示其相对分子质量与预计大小一致,表达产物在上清及包涵体中均有表达.经纯化,目的蛋白纯度高达90%,成功表达纯化出28KD的NS1融合蛋白并鉴定其免疫学活性.成功克隆和表达了禽流感病毒H5N1 NS1基因序列,为进一步研究NS1蛋白的生物学功能奠定了坚实基础.
- 朱春玉孙婷婷郑方亮艾海新朱俊峰王宁商玲玲刘宏生
- 关键词：NS1蛋白原核表达纯化
- CarcinoPred-EL:使用分子指纹和集成学习方法预测化学物质致癌性的新模型
- <正>化合物的致癌性作为一种严重的毒性效应,已经成为药物开发过程中的重要问题。化合物的致癌性通常使用长期动物实验来检验,而这些实验不仅耗时耗力,成本很高,且不能对大量化合物进行检验。因此,使用计算机方法依据化合物的结构预...
- 张力艾海新陈稳尹子墨胡桓朱俊峰赵健赵琪刘宏生
- 文献传递
- H5N1亚型禽流感病毒NS1基因截短体的克隆与原核表达被引量：3
- 2012年
- 禽流感病毒H5N1 NS1蛋白是一种非结构蛋白,在病毒感染过程中发挥着重要的作用。构建基因截短的重组蛋白,可为进一步研究NS1不同结构域与宿主蛋白间的相互作用奠定基础。在成功克隆禽流感病毒H5N1全长NS1基因并测序的基础上,将部分截短基因序列克隆到表达载体pET28a(+)上,构建基因截短的重组表达质粒pET28a-NS1-RBD和pET28a-NS1-ED,转化大肠埃希菌BL21(DE3),阳性重组质粒经IPTG诱导表达后进行SDS-PAGE检测,获得预期蛋白的表达,然后利用Ni-NTA树脂蛋白纯化系统对重组蛋白进行纯化,并通过Western Blotting进一步确认NS1及截短体蛋白的表达。结果表明,实验成功构建禽流感病毒H5N1亚型的NS1蛋白截短体,并在大肠埃希菌中高效表达,这为进一步研究NS1蛋白不同结构域与宿主蛋白的相互作用提供了实验材料,为深入研究NS1蛋白的生物学功能奠定了坚实基础。
- 郑方亮朱春玉商玲玲马杰良孙婷婷艾海新朱俊峰段艳婷朱应刘宏生
- 关键词：NS1原核表达纯化
