杨红
- 作品数:3 被引量:5H指数:1
- 供职机构:福建医科大学更多>>
- 发文基金:福建省科技厅青年人才基金更多>>
- 相关领域:生物学医药卫生更多>>
- 人DEPDC7基因启动子的转录活性分析
- 2015年
- 目的对人DEPDC7基因近端启动子进行生物信息学分析并构建该启动子的荧光素酶报告系统,初步探讨该启动子的活性。方法采用生物信息学方法对人DEPDC7基因的启动子和转录因子进行分析和预测,通过PCR法扩增DEPDC7基因近端启动子序列,PCR产物经HindⅢ和XhoⅠ双酶切后定向克隆到p GL2-Basic载体,构建一系列的启动子区域荧光素酶报告基因载体,随后经脂质体转染入293T细胞并检测各缺失片段萤光素酶活性。结果人DEPDC7基因位于11p13,翻译起始位点上游1 300 bp左右可能为启动子区域。经双荧光素酶报告基因检测后发现,所有的重组质粒均表现出荧光素酶活性,其中p GL2-DEPDC7P3活性最强。结论初步证明人DEPDC7基因启动子在-879 bp^+100 bp区域具有较强转录活性,为进一步揭示该基因生物学功能和其分子调控机制奠定基础。
- 王心睿杨红曾也婷廖之君
- 关键词:启动子转录因子生物信息学活性分析
- DEP结构域的结构与功能被引量:4
- 2015年
- DEP结构域首次在Dishevelled、EGL-10和Pleckstrin三种蛋白质中发现,是一个高度保守的蛋白结构域。过去20年的研究表明,DEP结构域存在于许多信号蛋白中,并参与了信号转导、细胞极性确立和小分子信号激活等生命活动过程,特别是在GPCR信号转导和Wnt信号通路中起着至关重要的作用。本文将结合最新研究进展,以及通过生物信息学的数据挖掘,对DEP结构域的结构和功能进行简要概述。
- 王心睿杨红廖之君
- 关键词:WNT信号通路
- shRNA介导DEPDC7基因沉默对肝癌HepG2细胞增殖、侵袭及迁移能力影响的研究被引量:1
- 2015年
- 功能未知基因DEPDC7(DEP domain containing 7)是从基因芯片数据挖掘得到的,基因表达谱提示只在肝组织中选择性高表达,但是关于DEPDC7在肝癌细胞内参与的生命活动及其分子机制的相关研究报道较少。该研究应用RNAi技术构建DEPDC7慢病毒载体并感染人肝癌细胞株HepG2,利用RT-q PCR和Western blot方法检测DEPDC7干扰效果。运用噻唑蓝(MTT)比色法和克隆形成方法检测细胞增殖能力,流式细胞术检测细胞周期变化,Transwell小室检测细胞侵袭迁移能力。结果显示,成功构建的DEPDC7慢病毒载体可以有效干扰DEPDC7 m RNA和蛋白的表达(P<0.05)。此外,DEPDC7被沉默后,可以有效促进细胞周期从G1期向S期转变,细胞增殖和侵袭迁移能力均显著提高(P<0.05)。该研究提示,肝癌细胞HepG2中DEPDC7低表达能有效提高细胞增殖、克隆形成和侵袭迁移能力,为后续研究DEPDC7转录调控机制等指明了方向。
- 廖之君王心睿杨红曾也婷
- 关键词:RNA干扰肝癌增殖