赵嘉伟
- 作品数:2 被引量:6H指数:1
- 供职机构:厦门大学医学院临床医学系更多>>
- 发文基金:山西省自然科学基金博士科研启动基金山西省高等学校大学生创新创业训练项目更多>>
- 相关领域:医药卫生更多>>
- HCV NS4B表达载体的构建及其对细胞凋亡的影响被引量:1
- 2017年
- 目的构建丙型肝炎病毒(HCV)2a型非结构蛋白4B(NS4B)的真核表达载体,并观察其对骨肉瘤细胞U2OS凋亡的影响。方法以质粒PJFH1为模板,通过PCR反应扩增NS4B目的基因片段,采用同源重组法与PCMV-tag2b载体相连,转化大肠杆菌感受态DH5α,筛选正确的克隆。以脂质体为介导转染U2OS细胞,通过Western blot检测NS4B蛋白的表达,免疫荧光检测细胞的凋亡。结果构建p CMV-tag2b-NS4B重组质粒,经测序其与NCBI公布的序列完全一致,并可在U2OS细胞中表达,DAPI检测显示细胞凋亡率为(17.25±2.95)%,对照组凋亡率为(6.53±2.36)%。结论成功构建NS4B的真核表达载体,并可在U2OS细胞中表达,诱导细胞凋亡。
- 宋彬妤赵嘉伟宋静陈思思胡志廷韩昕王敏敏任来峰
- 关键词:丙型肝炎病毒重组质粒凋亡
- 氯喹抑制自噬增强宫颈癌细胞SiHa对CPT处理的敏感性被引量:5
- 2016年
- 自噬诱导是肿瘤细胞对化疗药物抵抗性的原因之一,该研究探讨溶酶体抑制剂氯喹对喜树碱(camptothecin,CPT)诱导的宫颈癌细胞Si Ha死亡的增敏效果。CPT和/或氯喹处理宫颈癌Si Ha细胞,MTT法检测细胞增殖,DAPI和TUNEL染色观察细胞凋亡,Western blot和免疫荧光检测自噬及凋亡相关蛋白。结果发现,CPT处理后,Si Ha细胞MAP1LC3B荧光点和LC3II(microtubuleassociated protein light chain 3II)蛋白水平增加,p62荧光点和蛋白质水平则减少;而采用氯喹特异抑制自噬后,可明显提高CPT诱导的细胞凋亡、caspase-9的激活和PARP(poly ADP-ribose polymerase)的切割,而全长caspase-2水平显著下降。以上结果提示,氯喹可通过抑制细胞自噬而增强宫颈癌细胞株Si Ha对CPT诱导细胞凋亡的敏感性。
- 王晓娜任云青吴惠文赵嘉伟游荷花宋彬妤杨赛任来峰
- 关键词:氯喹喜树碱自噬SIHA细胞