温玲
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- 基于JAK2/STAT3通路探讨阿奇霉素对脂多糖诱导肺泡上皮细胞的保护作用
- 2024年
- 目的探究阿奇霉素(AZI)对脂多糖(LPS)诱导的人肺泡上皮细胞增殖生长、迁移的作用及相关机制。方法体外培养人肺泡上皮细胞A549,分为对照组(不做干预)、LPS组(10μg/ml LPS处理24 h)、低/中/高剂量实验组(10μg/ml LPS+2、4、8μg/ml AZI)、AZI组(10μg/ml LPS+4μg/ml AZI)、抑制剂组(10μg/ml LPS+50μmol/L JAK2/STAT3通路抑制剂AG490)、AZI+抑制剂组(10μg/ml LPS+4μg/ml AZI+50μmol/L AG490)、AZI+激活剂组(10μg/ml LPS+4μg/ml AZI+0.5μmol/L JAK2/STAT3通路激活剂Colivelin)。干预24 h后,采用细胞计数试剂盒-8(CCK-8)、酶联免疫吸附试验(ELISA)、倒置显微镜、划痕法、蛋白免疫印迹(WB)法检测炎症因子肿瘤坏死因子(TNF)-α、白细胞介素(IL)-1β和IL-6表达水平、细胞生长、迁移率、上皮间质转化(EMT)及JAK2/STAT3信号通路相关蛋白表达水平。结果LPS组细胞活力较对照组下降(P<0.05)。中/高剂量实验组细胞活力较LPS组上升(P<0.05)。因此选择有显著差异的较低浓度(4μg/ml AZI)作为AZI组进行后续实验。与对照组相比,LPS组细胞生长受抑制,TNF-α、IL-1β、IL-6、E-钙黏蛋白(E-cadherin)表达降低(P<0.05),细胞迁移率、N-钙黏蛋白(N-cadherin)、波形蛋白(Vimentin)、纤维粘连蛋白(FN)、p-JAK2、p-STAT3蛋白表达升高(P<0.05)。与LPS组相比,AZI组和抑制剂组显著扭转了上述指标的变化(P<0.05)。与AZI组相比,AZI+抑制剂组细胞生长状态较好,E-cadherin蛋白表达进一步升高(P<0.05),细胞迁移率、TNF-α、IL-1β、IL-6、N-cadherin、Vimentin、FN、p-JAK2、p-STAT3蛋白表达进一步降低(P<0.05),AZI+激活剂组则显著逆转了上述指标的变化(P<0.05)。结论阿奇霉素能够通过抑制JAK2/STAT3信号通路减轻对A549细胞的炎症损伤,促进细胞生长,并抑制其迁移与上皮间质转化(EMT)进程。
- 温玲李宝琪赵艳敏郑舒扬苏颖
- 关键词：阿奇霉素肺泡上皮细胞迁移上皮间质转化
- 阿奇霉素对脂多糖诱导肺泡上皮细胞炎症损伤的作用及机制研究
- 2024年
- 为了探究阿奇霉素对脂多糖(LPS)诱导的人肺泡上皮细胞增殖、凋亡及Janus激酶2(JAK2)/信号转导和转录启动因子3(STAT3)通路的调控作用,体外培养人肺泡上皮细胞A549,分为空白组(不做干预)、LPS组(10μg/m L LPS处理24 h)、低/中/高浓度试验组(10μg/mL LPS+1、2、4μg/mL阿奇霉素)、阿奇霉素组(10μg/mL LPS+4μg/mL阿奇霉素)、抑制剂组(10μg/mL LPS+50μmol/L JAK2/STAT3通路抑制剂AG490)、阿奇霉素+抑制剂组(10μg/mL LPS+4μg/m L阿奇霉素+50μmol/L AG490)、阿奇霉素+激活剂组(10μg/m L LPS+4μg/m L阿奇霉素+0.5μmol/L JAK2/STAT3通路激活剂Colivelin)。干预24 h后,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)、细胞计数试剂盒-8(CCK-8)、5-乙炔基-2’脱氧尿嘧啶核苷(EdU)、Hoechst 33258染色法、蛋白免疫印迹法检测炎症因子白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-8(IL-8)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的表达水平、细胞活力、增殖率、凋亡率、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)、细胞周期素D1(Cyclin D1)及JAK2/STAT3信号通路相关蛋白表达水平。结果显示:LPS组细胞炎症因子IL-6、IL-8和TNF-α表达水平高于空白组,细胞活力低于空白组;与LPS组相比,高浓度试验组炎症因子IL-6、IL-8、TNF-α表达水平显著降低,细胞活力显著升高。选择在LPS组基础上有差异的4μg/m L阿奇霉素作为阿奇霉素组进行后续试验。LPS组细胞增殖率、Cyclin D1蛋白表达水平低于空白组,细胞凋亡率、Caspase-3、p-JAK2、p-STAT3蛋白表达水平高于空白组。阿奇霉素组和抑制剂组显著扭转了LPS组上述指标的变化。与阿奇霉素组相比,阿奇霉素+抑制剂组细胞增殖率、Cyclin D1蛋白表达水平进一步显著升高,细胞凋亡率、IL-6、IL-8、TNF-α、Caspase-3、p-JAK2、p-STAT3蛋白表达水平进一步显著降低,阿奇霉素+激活剂组则显著逆转了上述指标的变化。本研究表明,阿奇霉素可通过抑制JAK2/STAT3信号通路减轻LPS诱导�
- 温玲李宝琪赵艳敏郑舒扬苏颖
- 关键词：阿奇霉素JANUS激酶2肺泡上皮细胞
- 早期微生态干预对早产儿的保护性作用及其机制研究
- 乔木张丽静李宝琪邱锐琴温玲杜志云姚文秀曹沐琳韩艳艳顾洪媛
- 该项目采用QIAamp DNA Stool Kit抽提入组低出生体重早产儿粪便内细菌基因组DNA，实时PCR法检测双歧杆菌含量。对INSURE策略治疗早产儿进行早期微生态干预，对其胃肠功能恢复、促进长发育、减少胆汁淤积并...
- 关键词：
- 关键词：早产儿微生态调节剂疾病治疗
