何冬梅
- 作品数：118 被引量：310H指数：11
- 供职机构：暨南大学更多>>
- 发文基金：广东省自然科学基金广州市科技计划项目国务院侨办重点学科基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 脂质体转染Bcl-2反义寡核苷酸诱导Raji细胞凋亡的研究
- ＜正＞ 目的Bcl-2基因不仅与绝大多数恶性肿瘤（包括淋巴瘤）的发生密切相关,而且也能抑制细胞凋亡而致肿瘤耐药。有效地抑制bcl-2基因在细胞中的过度表达,已成为人们研究的热点。美国Genta公司开发的靶向bcl-2 m...
- 何冬梅张洹
- 文献传递
- 低氧条件小鼠胎肝间质细胞血管内皮生长因子的表达:对侧支和新血管生成的促进作用被引量：4
- 2005年
- 目的:观察低氧培养条件下小鼠胎肝间质细胞中血管内皮生长因子的表达情况。方法:实验于2004-08/12在暨南大学医学院血液病研究所完成。取孕14.5d小鼠胚胎肝细胞进行贴壁培养及传代。生长至次融合状态的第5代细胞分别在体积分数0.95氮气和体积分数0.05二氧化碳混合气和常规条件下培养。在低氧和常氧培养后2,8,16,32h应用半定量反转录聚合酶链反应和蛋白质印迹技术检测其血管内皮生长因子基因mRNA和蛋白表达。结果:低氧培养2h时聚合酶链反应产物血管内皮生长因子与β-肌动蛋白信号比明显高于常氧培养犤(9.83±3.41)%,(5.47±2.78)%,F=12.33,P<0.01犦;低氧培养8h时血管内皮生长因子mRNA水平达到高峰,为常氧培养的6.17倍;16h后血管内皮生长因子mRNA表达水平开始下降;32h时血管内皮生长因子mRNA表达水平进一步下降,血管内皮生长因子与β-肌动蛋白信号比明显高于常氧培养组犤(18.95±6.23)%,F=22.76,P<0.01犦。低氧培养4h时血管内皮生长因子蛋白已显著增加,血管内皮生长因子与β-肌动蛋白信号比明显高于常氧培养组犤(8.38±3.24)%,F=10.87,P<0.01犦;16h时达到高峰水平,β-肌动;32h时血管内皮生长因子水平显著下降,血管内皮生长因子与β-肌动蛋白信号比仍明显高于常氧培养组犤(17.27±6.35)%,F=19.38,P<0.01犦。结论:低氧可诱导血管内皮生长因子在小鼠胎肝间质细胞中表达,提示低氧预处理间质细胞在组织缺血损伤如心肌缺血等疾病可能产生治疗作用。
- 刘革修张洹何冬梅
- 关键词：细胞低氧间质细胞内皮生长因子
- 人骨髓间充质细胞在低氧培养条件下脑源性神经营养因子的表达被引量：2
- 2006年
- 目的:观察低氧培养条件下人骨髓间充质细胞中脑源性神经营养因子的表达情况,为其用于脑缺血治疗提供依据。方法:实验于2005-09/12在暨南大学医学院血液病研究所完成。生长至次融合状态的第5代人骨髓间充质细胞在低氧混合气(体积分数0.90氮气、体积分数0.05二氧化碳和体积分数0.05氧气)条件下培养,应用半定量反转录聚合酶链反应和酶联免疫技术检测其脑源性神经营养因子基因表达。结果:①骨髓间充质细胞常氧压培养时表达脑源性神经营养因子mRNA和蛋白水平低:半定量反转录聚合酶链反应检测脑源性神经营养因子mRNA与β-肌动蛋白mRNA信号百分比为(6.35±2.39)%,酶联免疫法检测脑源性神经营养因子蛋白为(137.6±12.3)ng/L。②低氧培养显著增加骨髓间充质细胞表达脑源性神经营养因子mRNA和蛋白水平:低氧培养2h时脑源性神经营养因子mRNA与β-肌动蛋白mRNA信号百分比明显高于常氧压培养时表达水平,8h时达到高峰水平[低氧培养2h:(13.94±3.07)%,F=14.66,P<0.01;8h:(27.49±7.18)%]。低氧培养4h时脑源性神经营养因子蛋白显著增高,明显高于常氧培养组,16h时达到高峰水平[低氧培养4h:(165.6±13.9)ng/L,F=11.70,P<0.01;16h:(237.4±15.1)ng/L]。结论:合适低氧条件可增强骨髓间充质细胞表达脑源性神经营养因子,提示其在脑缺血组织等低氧环境下可能产生脑源性神经营养因子样生物学作用,可用于治疗脑缺血等疾病。
- 刘革修张洹何冬梅
- 关键词：脑源性神经营养因子基因表达
- 端粒酶活性的调控与白血病被引量：2
- 1999年
- 端粒酶的活化在肿瘤发生中具有重要的作用。端粒酶已作为一种新的肿瘤标志。为了使端粒酶抑制剂能成为有效的抗肿瘤药物,端粒酶活性调控的研究已受到越来越多的关注。本文综述了端粒酶活性的调节及其与造血系统、白血病的关系。
- 何冬梅
- 关键词：端粒酶白血病
- 胎鼠间充质干细胞移植缓解小鼠体力疲劳的研究被引量：1
- 2012年
- 目的:观察胎鼠间充质干细胞(MSCs)缓解体力疲劳的作用,探讨其改善肌无力患者或者中老年体弱者生活质量的意义。方法:取孕13.5 d的BALB/c胎鼠,分离纯化得到胎鼠MSCs。6月龄BALB/c雌性小鼠随机分为安静对照组、单纯运动组和MSCs+运动组。MSCs+运动组尾静脉输注第5代MSCs,其余2组输注同体积生理盐水。24 h后进行负重游泳试验,测定血尿素氮(BUN)、血乳酸、肝糖原和肌糖原,以及肝、肌肉、脑组织中超氧化物歧化酶(SOD)活性和丙二醛(MDA)含量,心脏超声检查评价心功能。结果:(1)原代细胞呈梭形、多角形,散在、集落式分布;第5代细胞均匀平行排列或者漩涡状排列,表达CD44和CD105,不表达CD34和CD45,能向成骨细胞或脂肪细胞分化,具备MSCs基本特点。(2)MSCs缓解体力疲劳作用:MSCs+运动组与单纯运动组比较,负重游泳时间明显延长,BUN和血乳酸水平降低,肝糖原和肌糖原储备增加,肝脏和肌肉组织SOD活性升高,MDA水平降低,以上差异均显著(P<0.05)。(3)心功能增强:MSCs+运动组与单纯运动组比较,每搏输出量、心输出量和左室舒张期容积均增加。结论:胎鼠间充质干细胞移植具有缓解小鼠体力疲劳作用。
- 刘成成祝爱珍周艳华刘革修何冬梅谭广销陈卓铭
- 关键词：间充质干细胞心功能
- Bcl-2短发夹样RNA对HL-60细胞生长的抑制作用
- ＜正＞目的 RNA干涉（RNA interference,RNAi）是双链小干涉RNA（small interfering RNA,siR NA）引起特异性靶mRNA裂解的过程。研究发现,21-23nt的短片断双链RNA...
- 何冬梅张洹刘革修邹飞雁
- 文献传递
- bcl-2反义寡核苷酸增强NCI-H460细胞对紫杉特尔和放射线的敏感性被引量：4
- 2005年
- 目的研究bcl2反义寡核苷酸作用于非小细胞肺癌细胞株NCI H460后,细胞对紫杉特尔、放射线敏感性的变化。方法紫杉特尔与bcl2反义寡核苷酸或无义寡核苷酸联合作用NCI H460细胞后,MTT法测紫杉特尔半数抑制率(IC50);NCI H460经bcl2反义寡核苷酸或无义寡核苷酸作用后,再用放射线照射,MTT法测定细胞生长抑制率;免疫荧光标记观测细胞Bcl2蛋白水平。结果靶向bcl2mRNA蛋白编码区反义寡核苷酸与紫杉特尔联合作用于NCI H460细胞后紫杉特尔的IC50值为(0.101±0.009)μmol/L,与不加寡核苷酸组紫杉特尔的IC50值[(0.183±0.018)μmol/L]或无义寡核苷酸联用紫杉特尔的IC50值[(0.179±0.016)μmol/L]相比,统计学上具有显著性差异(P<0.05)。bcl2反义寡核苷酸与放射线联合作用NCI H460细胞,显著抑制细胞的生长,并呈时间依赖性,分别与单用放射线及bcl2无义寡核苷酸联合放射线组相比,统计学上有显著性差异(P<0.05)。bcl2反义寡核苷酸分别与紫杉特尔、放射线作用于NCI H460细胞后显著抑制Bcl2蛋白表达,分别与单用紫杉特尔、放射线或无义寡核苷酸联用紫杉特尔、放射线相比,统计学上具有显著性差异(P<0.05)。结论靶向bcl2mRNA的反义寡核苷酸能增强NCI H460细胞对紫杉特尔、放射线的敏感性。
- 何冬梅张洹
- 关键词：反义寡核苷酸NCI-H460细胞紫杉特尔放射线敏感性
- hTERT基因反义核酸促进顺铂诱导原代急性淋巴细胞白血病细胞凋亡的研究被引量：1
- 2003年
- 目的 :利用人类端粒酶逆转录酶 (hTERT)基因的反义寡核苷酸 (ASPS -ODN)抑制人原代急性淋巴细胞白血病 (ALL)细胞hTERT基因表达后 ,观察顺铂对ALL细胞凋亡的影响。方法 :采用间接免疫荧光标记法通过流式细胞仪检测hTERT蛋白表达量的变化 ;以台盼蓝拒染法计数细胞数 ,确定细胞的增殖情况 ;Hoechst 332 5 8和PI双染色法观察凋亡细胞的形态变化 ;通过流式细胞仪对细胞凋亡峰进行定量分析。结果 :hTERT反义核酸作用于ALL细胞 72hhTERT蛋白表达阳性率为 (32 17± 3 0 0 ) % ,与空白对照组 (6 6 31± 2 84 ) %及正义核酸作用组 (6 2 5 6± 6 11) %比有显著差异 (P <0 0 5 ) ;而正义核酸作用组与空白对照组比无显著差异 (P >0 0 5 )。hTERT反义核酸作用于ALL细胞 2 4h加入顺铂 ,再共同作用 4 8h ,ALL活细胞均数为 1 75 0× 10 8cells/L ,与单用顺铂组 (2 0 90× 10 8cells/L)及hTERT正义核酸联用顺铂组 (1 990× 10 8cells/L)相比 ,对细胞抑制明显增强 (P <0 0 5 )。hTERTASPS -ODN作用于ALL细胞 2 4h再加入顺铂作用 4 8h ,细胞出现典型的凋亡形态学改变。hTERTASPS -ODN与 2 5 μmol/L顺铂联合作用于ALL细胞 4 8h的凋亡细胞百分率 (37 85± 2 4 4 ) %分别同SPS -ODN与顺铂联合作用组 (15 16±2
- 李文瑜张洹何冬梅
- 关键词：HTERT基因顺铂细胞凋亡
- hTERT基因反义核酸对K562细胞端粒酶活性的影响被引量：17
- 2000年
- 目的：探讨人类端粒酶逆转录酶（humantelomerasereversetranscriptase,hTERT）基因的反义寡核苷酸（antisenseoligodeoxynucleotide，ASODN）对K562细胞端粒酶活性的影响。方法：采用多聚酶链反应-酶联免疫测定（PCR－ELISA）方法检测人工合成的反义脱氧寡核苷酸处理K562细胞前后端粒酶活性的改变，以逆转录PCR（RT－PCR）分析hTERT基因mRNA表达水平。结果：hTERT基因的ASODN作用于K562细胞后，hTERTmRNA表达水平显著下调，其端粒酶活性明显受到抑制。结论：hTERT基因的ASODN可以在翻译水平显著抑制K562细胞的端粒酶活性，hTERT基因与端粒酶的活性密切相关。
- 何冬梅张洹jnu.edu.cn
- 关键词：HTERT基因K562细胞端粒酶ASODN
- Bcl-2反义核酸的设计及对K562细胞凋亡的研究被引量：6
- 2002年
- 目的 :探讨bcl 2不同靶点的反义寡核苷酸 (ASODN)对白血病细胞株K5 6 2细胞凋亡的影响。方法 :用RNA二级结构预测程序预测bcl 2mRNA的二级结构 ;免疫荧光标记观察细胞bcl 2蛋白水平 ;细胞记数观察细胞的生存情况 ;用流式细胞仪观察细胞凋亡。结果 :在 5个初选的反义序列中 ,靶向bcl 2mRNA蛋白编码区和翻译起始区的ASODN能明显地下调bcl 2蛋白的表达 ,并且两个不同靶点的ASODN能有效地抑制K5 6 2细胞的生长活性、促进细胞凋亡 ;靶向bcl 2mRNA蛋白编码区的ASODN降低细胞bcl 2蛋白、促进细胞凋亡的作用较靶向翻译起始区的ASODN强。随机的无义寡核苷酸对K5 6 2细胞的生长活性、bcl 2蛋白水平及细胞凋亡率均无影响。结论 :分别在bcl 2mRNA翻译起始区和蛋白编码区发现了两个有效的反义作用靶点 ,针对这两个靶点的ASODN能特异性促进K5 6
- 雷小勇张洹何冬梅
- 关键词：BCL-2反义寡核苷酸K562细胞细胞凋亡
