刘强
- 作品数：11 被引量：28H指数：4
- 供职机构：中国食品药品检定研究院更多>>
- 发文基金：国家科技重大专项艾滋病和病毒性肝炎等重大传染病防治专项国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 利用活体成像技术对5型腺病毒在小鼠体内生物分布和表达的研究被引量：2
- 2012年
- 目的研究5型腺病毒（Ad5）不同途径感染小鼠后体内代谢和组织分布特点，为Ad5载体疫苗的应用和改造提供参考。方法构建携带萤火虫荧光素酶基因的Ad5-Fluc病毒并利用活体成像技术分析其感染BALB／c小鼠后的蛋白表达和组织分布特点，以及与裸鼠的感染特点进行比较。结果Ad5-Fluc肌肉途径感染BALB／c小鼠后出现肝脾转移表达的特点，且肌肉途径表达周期最长（〉60d），表达水平最高（P〈0.01）。病毒感染裸鼠后分布特点与BALB／c小鼠一致但表达周期明显延长。另外，用Ad35的纤突蛋白替代Ad5的纤突蛋白后的5型腺病毒载体（Ad5F35）在保持相似表达效率的同时消除了肝嗜性的特点。结论肌肉途径可能为5型腺病毒载体疫苗理想的免疫方式，同时Ad5F35病毒是一种理想的替代性腺病毒疫苗载体。
- 刘强黄维金聂建辉赵晨燕孟淑芳李保卫邵荣光王佑春
- 关键词：腺病毒活体成像BALBC小鼠
- 痘苗病毒滴度测定用国家标准品的制备被引量：4
- 2012年
- 目的制备病毒载体疫苗滴度测定用国家标准品。方法以鸡胚成纤维细胞制备痘苗病毒,经密度梯度超速离心纯化后,加入天花疫苗保护剂,分装冻存,分发至我国4个不同实验室,按照统一的结晶紫染色蚀斑法实验方案进行协作标定,每次实验稀释后取2个稀释度,每个稀释度设5个平行孔,计算各实验室检测结果的几何均数,对标准品中痘苗病毒滴度进行赋值。检测病毒标准品于不同温度下保存不同时间的稳定性,并对病毒标准品的各项质量指标进行检定。结果 4个实验室共测定44次,4个实验室间的检测结果差异无统计学意义(P>0.05),各实验室检测结果的几何平均数为3.05×106PFU/ml,95%CI为2.00×106～4.65×106PFU/ml,标准差为0.09,总变异系数1.41%。制备的痘苗病毒标准品于4℃可稳定放置10 d,37℃放置稳定性较差。制备的痘苗病毒标准品装量检查合格(1 ml/支);pH值为6.9;无菌试验合格;分装重量精密性为0.95%。结论制备的痘苗病毒标准品可作为痘病毒载体疫苗滴度测定用标准品。
- 黄维金朱蓉赵晨燕徐静万延民齐影刘强王文波温智恒周艳孟淑芳俞永新王佑春
- 关键词：痘苗病毒标准品
- Merck Ad5艾滋病疫苗的研究进展被引量：2
- 2011年
- 安全有效的疫苗是艾滋病防治的有效手段。上世纪90年代,Merck公司开始研发腺病毒5型(Ad5)载体T细胞概念艾滋病疫苗。2007年9月,在Ⅱb期临床观察中宣告失败,给疫苗学界带来沉重打击。本文就Merck Ad5艾滋病疫苗的构建、临床前期和Ⅰ、Ⅱ期临床观察以及学术界对其失败原因的分析作一综述。
- 刘强王佑春
- 关键词：艾滋病疫苗腺病毒5型
- 趋势分析方法在HIV血液筛查诊断试剂评价中的应用被引量：4
- 2014年
- 目的评价趋势分析方法用于HIV血液筛查诊断试剂的质量稳定性。方法以国产3个厂家(A、B、C)的HIV血液筛查诊断试剂作为研究对象,采用各试剂连续批次检测灵敏度界值参考品S4、HIV-1型中等反应性样品(P18)、HIV-2型低反应性样品(P19)、阴性参考品的阴性符合比例,绘制Levey-Jennings趋势分析质控图,计算每个样品的检测平均值(mean)和标准差(SD),以mean±2 SD作为警戒限,mean±3 SD作为行动限,观察各厂家诊断试剂的检测指标变化趋势。结果试剂A质量稳定,S4、P18和P19样品的检测结果均未见超过行动限的批次;试剂B和C的阴性参考品阴性符合比例的变化均呈现在趋势分析中,试剂B检测P18样品出现2个批次检测结果超过行动限,试剂C连续8批S4、P18和P19样品的检测结果在均值同侧。在37℃加速稳定性试验中,32批试剂C分别检测P18、P19和S4样品的变化趋势一致;S4样品37℃加速稳定性及4℃稳定性检测结果差异有统计学意义(P<0.01);企业和中检院S4、P18和P19样品37℃加速稳定性结果差异均有统计学意义(P均<0.01)。结论我国血液筛查试剂质量稳定,趋势分析可发现试剂质量变化,可尝试用于HIV体外诊断试剂的稳定性评价。
- 宋爱京黄维金许四宏聂建辉李秀华赵晨燕刘强王佑春
- 关键词：人类免疫缺陷病毒血液筛查诊断试剂
- 国产第四代HIV血液筛查试剂的质量评价被引量：5
- 2013年
- 目的评价国产第四代HIV血液筛查试剂的质量。方法利用HIV-1 p24抗原国家参考品和HIV抗体国家参考品,对2012年3月~2013年3月间7个厂家(A^G)生产的33批第四代HIV血液筛查试剂进行评价。分析A(进口)、B、C试剂对HIV-1 p24抗原弱阳性国家参考品P5检测的S/CO值的变化趋势,及其对HIV-1 p24抗原弱阳性国家参考品P5、强阳性HIV-2型抗体国家参考品18号和中等强度阳性HIV-2型抗体国家参考品19号检测的批间变异系数,计算不同试剂的最低检出量理论值。结果各试剂均符合国家参考品的要求,除A(进口)和C试剂外均有非特异阳性出现。国内、外试剂检测结果均较稳定,未见超过±3 SD的异常结果。P5、18号、19号参考品的批间变异系数均不高于25%,A(进口)试剂的批间精密性优于国产同类试剂。p24抗原参考品最低检出量均值为3.2 IU/ml。82%(27/33)试剂优于HIV-1 p24抗原最低检出量国家标准要求,70%(23/33)的试剂优于HIV抗体最低检出量国家标准要求。结论 2012年3月~2013年3月期间国产第四代HIV血液筛查试剂均符合国家现行标准,但与进口试剂相比,国产第四代HIV血液筛查试剂在最低检出量和批间精密性上尚有提高的空间。
- 宋爱京许四宏李秀华聂建辉赵晨燕刘强黄维金王佑春
- 关键词：人类免疫缺陷病毒抗原酶联免疫试剂
- 不同人类免疫缺陷病毒感染途径群体中戊型肝炎病毒的流行情况被引量：5
- 2016年
- 本研究旨在了解不同人类免疫缺陷病毒（human immunodeficiency virus，HIV）感染途径群体中戊型肝炎病毒（hepatitis E virus，HEV）抗体情况，探讨HEV疫苗接种的必要性。采集HIV感染者的血清或血浆，利用酶联免疫吸附试验（enzyme—linked immunosorbent assay，ELISA）检测HEVIgG抗体、IgM抗体及抗原，荧光定量聚合酶链反应（polymerase chain reaction，PCR）检测HEV核酸，Roche高纯化HIV-1核酸定鼍检测试剂盒（PCR荧光法）检测HIV感染者的HIV载量。比较分析不同HIV感染途径群体中HEV流行率的差别。结果显示，HIV感染者中HEV IgG抗体的阳性率为37．4％，静脉吸毒、成分献血和传播途径不明HIV感染群体的HEVIgG抗体阳性率分别为49．3％、39．5％和30．4％。HEV核酸荧光PCR检测结果均为阴性。3种HIV感染群体之间HEV IgG抗体阳性率差异无统计学意义（x2=2．978，P〉0．05）。HEVIgG阳性与阴性感染者之间HIV载量差异无统计学意义（P〉0．05）。结果提示，为保护HIV感染者免受HEV感染，应考虑接种HFV疫苗。
- 黄维金宋爱京许四宏聂建辉刘强赵晨燕张黎王佑春
- 关键词：人类免疫缺陷病毒戊型肝炎病毒抗体
- 假病毒检测平台的建立以及应用被引量：5
- 2013年
- 传统的病毒学方法对病毒特性的分析以及相关检测发挥了重要的作用，但由于病毒某些特性的限制，使其应用也得到了相应的限制，如传统的HIV培养方法可以检测病毒所诱导的中和抗体以及分析病毒耐药表型等，但其传统的培养需要在Ⅲ级生物安全实验室进行，而且耗时且操作繁琐；人乳头瘤病毒（humanpapillomavirus，HPV）很难在体外进行培养，不能用细胞培养的方法检测中和抗体，而其他的检测方法所检测的抗体主要是结合抗体；其他一些病毒如痘病毒、腺病毒、腺相关病毒等虽然可以用传统的培养方法检测中和抗体，但比较繁琐，而且不能高通量进行检测。
- 王佑春聂建辉吴雪伶刘强
- 关键词：假病毒生物安全实验室中和抗体细胞培养人乳头瘤病毒腺相关病毒
- 利用活体成像术对痘苗病毒小鼠体内生物分布和表达的研究被引量：3
- 2013年
- 目的研究复制型天坛株痘苗病毒(rTV)和非复制型天坛株痘苗病毒(NTV)不同途径感染小鼠后体内代谢和组织分布特点,为两种痘苗病毒载体疫苗的应用和改造提供参考。方法构建携带萤火虫荧光素酶基因的rTV-Fluc和NTV-Fluc病毒,利用活体成像技术对两种病毒感染BALB/c小鼠后的蛋白表达水平和持续时间特点进行比较分析,并对rTV-Fluc多针感染中的抗病毒反应及其在BALB/c小鼠和裸鼠体内的分布和代谢特点进行比较。结果 rTV-Fluc和NTV-Fluc病毒肌内和皮内途径感染BALB/c小鼠后局限分布于接种部位,且rTV-Fluc的表达水平显著性高于NTV-Fluc病毒(P=0.015);rTV-Fluc感染小鼠后诱导较高水平的中和抗体,并显著降低了肌内途径第2针感染后的蛋白表达水平(P<0.05);rTV-Fluc感染裸鼠后分布特点与BALB/c小鼠一致但表达周期明显延长(120d比10d)。结论两株痘苗病毒表现出局限的组织分布、较高的表达水平并诱导较强的免疫反应等特点,为预防性痘苗病毒载体疫苗的应用提供了参考数据。
- 刘强齐香荣朱蓉黄维金阮力李保卫邵荣光王佑春
- 关键词：痘苗病毒活体成像BALBC小鼠
- 体内电穿孔对载体表达效率和人类免疫缺陷病毒1型DNA疫苗免疫反应效果的研究被引量：1
- 2013年
- 本文旨在分析体内电穿孔(EP)技术对DNA载体pDRVI1.0表达效率和人类免疫缺陷病毒1型(HIV-1)DNA疫苗免疫反应的辅助效果,为其在DNA疫苗中的应用提供参考数据。通过构建携带荧光素酶基因的pDRVI1.0-Fluc质粒,利用活体成像技术分析EP接种对荧光素酶蛋白的组织分布、表达水平和持续时间的影响;同时,构建携带我国HIV-1CRF07_BC流行毒株env基因的DNA疫苗pDRVI1.0-HIV,利用酶联免疫斑点法(ELISPOT)、酶联免疫吸附试验(ELISA)和中和抗体法对EP辅助免疫反应的特点进行分析。结果显示,EP接种后,pDRVI1.0-Fluc质粒未改变组织分布特点,但其体内表达效率显著提高,载体的饱和接种量降低。同时,EP技术提高了pDRVI1.0-HIV疫苗免疫小鼠后诱导的γ干扰素(IFN-γ)分泌型T细胞反应和Env特异性结合抗体效价。结果提示,EP技术可在DNA疫苗应用方面发挥作用。
- 刘强王文波黄维金邵荣光王佑春
- 关键词：DNA疫苗电穿孔活体成像
- ALVAC和AIDSVAX艾滋病联合疫苗研究进展
- 2010年
- 艾滋病流行形势日益严峻已成为严重的公共卫生问题,安全有效的疫苗是防治艾滋病最为有效的手段。2009年底,美国和泰国研究人员共同宣布基于有过失败"前科"的两种疫苗(ALVAC和AIDSVAX)的联合使用可以将人体感染艾滋病病毒的风险降低31.2%,这是人类首次获得具有一定免疫保护效果的艾滋病疫苗。本文就两种疫苗单独和联合免疫的临床试验进行综述。
- 刘强王佑春
- 关键词：艾滋病疫苗
