背景:远程医疗在整形外科,烧伤科,皮肤科等科室应用很多,但远程医疗在骨科应用的效果还较少见报道。目的:利用SCI数据库文献检索和深度分析功能,对远程医疗在骨科领域应用的研究文献资料趋势进行多角度的探讨分析。方法:由第一作者以"tele*medicine(远程医疗)""orthopaedic(骨科)"为关键词检索SCI数据库相关文献,并将分析结果及资料导出,以文字和图表的形式进行统计和计量分析,描述其分布特征。纳入标准:经同行评议的远程医疗在骨科应用的已发表的研究原著类文章。排除标准:①与骨科相关性较差的单纯远程医疗的文章。②需采用手工检索和电话检索方式收集的文章。③未正式出版的文章。④在收录数量之内的综述,评论,勘误类文献。结果与结论:SCI数据库收录的文献中共检索到165篇远程医疗在骨科领域应用研究相关的文献,研究原著126篇位居首位,其中有6篇文献总被引次数超过50次,被确定为经典文献。在时间分布上,文献数量总体呈上升趋势,来源出版物呈分散分布,其中Journal of Telemedicine and Telecare(《远程医疗与远程护理杂志》)发表文献量39篇,占全部文献的30.95%。其次为Telemedicine and E Health(《远程医疗杂志与电子保健》)8篇。远程医疗在骨科的应用是21世纪以来最新的研究热点领域。通过文献计量学方法对来源于SCI数据库关于远程医疗在骨科领域研究的文献进行分析,可为了解该领域的概貌、现状,为研究者进一步确定该领域研究的热点难点提供有价值的参考。
目的:探讨插入甘氨酸(G ly)对H IV Tat-TK融合蛋白功能的影响。方法:利用基因重叠(gene sp lic ing by overlap ex-tension,gene SOE ing)PCR技术,将不同长度的甘氨酸密码子(0、2、4、6个)插入H IV Tat-TK融合基因,经转染、鉴定证实后诱导表达,并经偶联Tat单克隆抗体的Sepharose CL-4B亲和层析柱纯化。4种H IV Tat-(G ly)n-TK系列融合蛋白(n=0、2、4、6)、H IV Tat蛋白、TK蛋白(1μg/m l)分别与HepG2细胞在普通培养基共培养24 h后,间接免疫荧光检测各自透过细胞膜效率;在加入更昔洛韦的培养基培养3 d后,锥虫蓝染色计算细胞死亡率,流式细胞仪检测细胞凋亡率。结果:精确克隆出H IV Tat-(G ly)n-TK系列融合基因,成功表达H IV Tat-(G ly)n-TK系列融合蛋白以及H IV Tat和TK蛋白。H IV Tat-(G ly)n-TK系列融合蛋白与H IV Tat蛋白透过细胞膜的效率相似,但单独TK蛋白无法进入细胞;在含有更昔洛韦的培养基中H IV Tat-(G ly)4-TK融合蛋白致HepG2细胞凋亡率最高(14.77%),其余依次为H IV Tat-(G ly)2-TK融合蛋白(12.69%)、H IV Tat-TK(8.31%)、H IV Tat-(G ly)6-TK(4.36%)和H IV Tat组(1.03%),组间均有显著性差异(P<0.05);细胞死亡率也发现类似的结果(分别为80.2%、65.4%、58.4%、56.7%、9.1%,组间有显著差异,P<0.05)。结论:插入2、4、6个甘氨酸对H IV Tat-TK融合蛋白上游Tat蛋白的细胞融合穿透功能不产生影响,而对融合蛋白下游TK蛋白介导的更昔洛韦的细胞毒作用干扰较大,其中插入4个甘氨酸对TK蛋白介导的更昔洛韦的细胞毒作用影响最小。
