袁建龙
- 作品数：21 被引量：15H指数：2
- 供职机构：内蒙古医科大学附属医院更多>>
- 发文基金：内蒙古自治区自然科学基金国家自然科学基金国家科技重大专项更多>>
- 相关领域：医药卫生农业科学生物学文化科学更多>>
- STAT3-siRNA表达载体对肝癌细胞pim-2基因表达的影响被引量：1
- 2021年
- 目的:探讨STAT3-siRNA对肝癌细胞pim-2基因表达的影响。方法:设计靶向stat3基因的siRNASECs,构建重组表达质粒,在体外基于脂质体来实现介导,对SMMC-7721转染,在对转染效果进行分析的过程中所采用的主要方法为Western blot和半定量RT-PCR分析。结果:转染STAT3-siRNA表达载体后,肝癌SMMC-7721细胞株pim-2 mRNA表达和蛋白表达均明显下降,对照组各指标均无明显变化。结论:siRNA明显抑制了pim-2的表达,并抑制肿瘤生长。作为一个重要的基因沉默工具,未来siRNA有希望变成肝癌治疗的一种新的方法。
- 刘洋陈立军靳秋月袁建龙
- 关键词：RNA干扰肝癌STAT3PIM-2
- BDH2基因在代谢与肿瘤发生发展中的作用与机制
- 2022年
- 肿瘤中的细胞代谢是促进肿瘤发生发展的重要生物学过程,代谢相关的基因正逐渐成为肿瘤治疗的靶点,但对肿瘤进展中的异常代谢及其预后价值仍需要大量研究挖掘。BDH2基因是一种多功能基因,参与多种代谢途径,在铁代谢中起重要的催化合成作用,同时参与酮体代谢并与脂代谢相关。近年来,研究者发现BDH2在不同类型的肿瘤中发挥的作用并不相同,多种肿瘤的发生发展与BDH2密切相关,本文对BDH2在代谢与肿瘤发生中的作用与机制进行分析、总结与展望。
- 刘秉春李康袁建龙
- 关键词：铁代谢肿瘤发生
- 基于诊断试剂研发的产学研结合教学改革在临床检验诊断学见习中的探索
- 2022年
- 以服务国家发展为导向的“十四五”规划对提升教育供给水平做出了明确要求:包括提升人才供给水平和提高高校科技创新水平。随着现代医疗事业的蓬勃发展,临床检验诊断学人才的培养面临着新的要求和挑战。立足于学科深化人才培养模式改革、构建高校创新体系、推动产学研深度融合等政策导向,临床检验诊断学由从前的强调基础和理论的培养模式向培养具有创新意识和科研思维应用转化能力的目标转变。
- 刘秉春袁建龙
- 关键词：临床检验诊断学医学教育诊断试剂产学研结合
- 以体细胞核移植技术制备IGF1转基因白绒山羊的研究
- 究拟利用毛囊特异表达IGF1(Insulin like growth factor I)的真核表达载体pCDsR-KI转染绒山羊胎儿成纤维细胞(Caprine Fetal Fibroblast Cells, CFFCs)...
- 郭旭东朱兵仓明刘东军袁建龙王玮金永任宇温建勋肖红梁伟吴海青
- 关键词：体细胞核移植白绒山羊
- 构建骨骼肌特异表达人FS基因载体及其稳定转染绵羊胎儿成纤维细胞被引量：1
- 2011年
- 旨在构建骨骼肌特异表达人卵泡抑制素(follistatin,FS)基因载体并得到其稳定转染的蒙古绵羊胎儿成纤维细胞系,为后期通过体细胞核移植方法制作转FS基因克隆绵羊奠定基础。首先通过RT-PCR方法克隆得到人FS基因cDNA序列,然后与猪骨骼肌特异表达启动子α-actin以及红色荧光蛋白表达元件连接,构建成FS基因骨骼肌特异表达载体pCFCDS。脂质体介导外源表达载体转染绵羊胎儿成纤维细胞,经G418筛选后得到稳定转染的绵羊转基因细胞克隆。PCR鉴定外源基因在细胞基因组中的整合,分析转基因细胞系的核型和生长状况。结果显示,成功构建得到绵羊骨骼肌特异表达人FS基因的真核表达载体,并得到其稳定转染的转基因绵羊胎儿成纤维细胞系,为后期通过体细胞核移植方法制作转FS基因克隆绵羊奠定基础。
- 王玮袁建龙金永朱兵岳群华梁浩郭旭东刘东军仓明
- 关键词：卵泡抑制素
- 多重PCR结合毛细管电泳检测骨髓增殖性肿瘤患者JAK2V617F及CALR基因突变被引量：4
- 2020年
- 目的:应用多重PCR与毛细管DNA电泳法检测骨髓增殖性肿瘤(MPN)主要致病基因中的JAK2V617F及CALR第九外显子突变,并对该方法的检测性能进行评价。方法:同时设计特异性的JAK2617F等位基因突变PCR引物以及CALR基因第九外显子扩增引物,对引物进行Cy5荧光标记,所有引物在同一PCR反应管中进行扩增,并将PCR产物进行毛细管电泳分析,同时验证该方法的检测限、灵敏度,并与商品化试剂盒进行对比。结果:多重PCR与毛细管电泳技术结合可在一个PCR反应中同时检测JAK2V617F与CALR基因突变,可以在0.01 ng的基因组DNA中检测出JAK2V617F突变,可在0.1 ng的基因组DNA检测出JAK2V617F与CALR双阳性突变,至少可检测出0.1%的JAK2V617F阳性突变,该方法与商品化诊断试剂盒进行对比结果相一致。结论:基于多重PCR与毛细管电泳技术,可在外周血中同时检测JAK2V617F与CLAR基因第九外显子突变,该方法为MPN的诊断提供了新的分子检测手段。
- 袁建龙师迎旭杜华王颖君王颖君赵子玲韩艳秋
- 关键词：多重PCR毛细管电泳骨髓增殖性肿瘤JAK2V617F
- 成体神经干细胞诱导方案研究进展被引量：1
- 2020年
- 近年来,研究人员致力于构建遗传和表型稳定的神经干细胞系,旨在恢复神经组织不可逆转的功能丧失从而满足临床需求。其中,成人体内维持其多能状态的干细胞也成为研究的焦点之一。随着诱导多能干细胞和体细胞直接转分化为所需细胞类型等技术的发展,基于使用来自胚胎或胎儿神经组织的同种异体神经干细胞的研究方法逐渐成为过去。本文围绕诱导干细胞和重编程体细胞的多能状态维持及诱导神经干细胞的实验方案做一综述。
- 刘秉春袁建龙邱英云升
- 关键词：成体干细胞多能干细胞细胞培养技术神经系统
- 天然产物对树突状细胞免疫调节作用的研究进展被引量：1
- 2018年
- 树突状细胞(dendritic cells,DCs)是连接先天免疫和获得性免疫的关键。在感染和过敏反应中,DCs作为专职抗原递呈细胞引起T细胞免疫应答,并维持自身抗原免疫耐受。DCs介导的T细胞免疫应答有益于感染性疾病以及癌症等的治疗,同时DCs诱导的免疫耐受在控制自身免疫疾病、过敏或炎性疾病中发挥作用。研究表明多种天然产物能够调控DCs的表型与功能,并在免疫疗法的临床应用中被证明有效。因此,利用天然产物调控DCs免疫功能将为开发有效且低成本的细胞治疗方法提供新的思路。对近年来关于天然产物调控DCs功能的研究进行综述,总结天然产物对DCs表型变化的影响及其对免疫应答和免疫抑制的调控作用。
- 刘秉春袁建龙邱英云升
- 关键词：树突状细胞免疫激活免疫抑制
- 胶质瘤U251细胞外源基因瞬时转染方法的选择被引量：1
- 2017年
- 目的选择一种将外源基因瞬时转入胶质瘤细胞的高效转染方法。方法以去内毒素真核表达载体DsRed2为外源基因,分别采用脂质体Lipofectamine2000转染法、脂质体Viafect转染法以及电转染法,将不同浓度的DsRed2质粒(0.25、0.5、1.0μg)转染入胶质瘤U251细胞(以下称胶质瘤细胞,细胞数量均为1.0×105个)。荧光显微镜下采用可见光、红色荧光滤镜观察细胞形态及红色荧光蛋白表达,紫外光滤镜下观察细胞核Hocest33342染色情况,计算转染效率。结果三种方法均能将质粒转染至胶质瘤细胞中,红色荧光蛋白表达效果均良好。转染后的细胞形态基本正常,但表达红色荧光蛋白与未表达红色荧光蛋白的细胞形态差异较大。相同质粒浓度下,电转染法转染后表达红色荧光蛋白的细胞数量多于脂质体Lipofectamine2000转染法、脂质体Viafect转染法。随着质粒浓度的升高,脂质体Viafect转染法和电转染法对胶质瘤细胞的转染效率逐渐升高。相同质粒浓度下,电转染法对胶质瘤细胞的转染效率均高于脂质体Lipofectamine2000转染法和脂质体Viafect转染法(P均<0.01)。结论电转染法对外源基因瞬时转染胶质瘤细胞的转染效率较高,并呈质粒浓度依赖性。
- 呼格吉乐高乃康刘秉春袁建龙
- 关键词：胶质瘤细胞质粒转染效率
- 转卵泡抑制素基因对绵羊肌源性细胞中肌肉抑制素基因的调控被引量：2
- 2013年
- 【目的】构建骨骼肌特异表达目的基因卵泡抑制素(follistatin,FST)的真核表达载体pCFCDs-red和pSPFCDs-red,分别转染到不同细胞系中,检测FST及下游基因在RNA和蛋白水平的表达情况,同时测定骨骼肌特异启动子SP和α-actin的启动效率,以研究FST的特异表达对肌肉发育的影响。【方法】利用脂质体分别将真核表达载体pCFCDs-red和pSPFCDs-red转染到绵羊胎儿成纤维细胞(SFFCs)、骨骼肌卫星细胞(SMSCs)和SMSCs诱导肌管中,获得转基因细胞;对获得细胞的生长状况、细胞周期、细胞形态大小以及目的基因和下游基因的表达情况,分别用流式细胞仪、实时定量PCR和western blotting等方法进行检测分析。【结果】①转基因细胞系的生长趋势与非转基因细胞相似,转基因SMSCs细胞增殖的速度高于转基因SFFCs细胞;②流式细胞仪分析表明,转基因细胞系转染后70%以上细胞均处于G0/G1期,保持旺盛的分裂能力、具有单一峰值、细胞的整倍性好、细胞电子体积显著增大;③实时定量PCR及western blotting检测结果表明,转基因细胞系中FST的RNA及蛋白水平相比非转基因细胞系均上调;④转基因SMSCs和肌管相比转基因SFFCs细胞的FST表达量高,转pSPFCDs-red转基因细胞中FST的表达水平比转pCFCDs-red细胞系高。【结论】骨骼肌特异性启动子SP及α-actin能够在SMSCs及肌管中有效启动FST目的基因的表达,且在肌管中具有较高的表达量,SP启动子的启动效率较高于α-actin。在肌源性细胞中,FST的上调可以引起MSTN蛋白水平的下调,FST对骨骼肌细胞的生长发育具有一定促进作用。
- 岳群华袁建龙郝斐靳木子王景园杨文亮刘东军仓明
- 关键词：FST骨骼肌卫星细胞肌管
