蒋海芹
- 作品数：5 被引量：9H指数：2
- 供职机构：吉林农业大学食品科学与工程学院更多>>
- 发文基金：吉林省科技厅科研基金吉林省自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生轻工技术与工程更多>>
- 一种嗜热梭菌β-1，4-葡聚糖内切酶基因的克隆和表达
- 纤维素是植物生物质的重要组成部分,在当今资源和能源日益枯竭的情况下,大力开发、转化、利用木质纤维素,将其转化成可发酵糖、饲料或是生物燃料,以应用于人类急需的能源、食物、化工原料,这对解决人类社会的食物短缺和能源危机具有重...
- 蒋海芹
- 关键词：克隆原核表达基因
- 文献传递
- 黄多孔菌产漆酶最佳培养条件的优化被引量：1
- 2012年
- 采用Plackett-Burman设计法,对影响黄多孔菌生产漆酶的9个因素进行了筛选。结果表明,影响该菌产生漆酶的主要营养因素为碳氮比、铜离子浓度和pH值。在此基础上,采用响应面法对其中3个显著因子的最佳水平范围进行研究,利用统计软件Design-Expert进行二次回归分析。当碳氮比、铜离子浓度和pH值分别为4∶1、0.1 mmol/L和5.5时,漆酶产量从178 U/mL提高到446 U/mL,是优化前的2.5倍。
- 徐雪霏毕云枫蒋海芹沈明浩
- 关键词：PLACKETT-BURMAN漆酶响应面
- 一株嗜热梭菌β-1,4-葡聚糖内切酶基因的克隆及表达
- 2012年
- 以嗜热梭菌(Symbiobacterium thermophilum IAM 14863)基因组DNA为模板克隆了编码葡聚糖内切酶的基因,同时将该酶基因构建于表达载体pET32a(+)中,获得重组表达载体pET32a-Glu,转化至E.coli BL21(DE3)PLYS中并进行表达。结果表明:该基因大小为1 101 bp,共编码366个氨基酸;SDS-PAGE电泳结果表明该基因在E.coli BL21(DE3)PLYS中得到了有效表达,相对分子质量约为60 kDa,纯化后重组酶活力为103 U/mL;酶学性质实验结果表明:酶最适pH值为5左右,最适反应温度为55℃,且此酶具有良好的耐热性(75℃左右)和pH值稳定性。
- 蒋海芹毕云枫华欣春陈丽丽徐雪霏沈明浩
- 关键词：纤维素克隆原核表达
- Thermotoga neapolitana α-葡萄糖苷酶基因克隆及表达被引量：4
- 2011年
- 本文拟克隆新阿波罗栖热袍菌(Thermotoga neapolitana DSM 4359)的一种α-葡萄糖苷酶基因(TNAG),其GenBank注册号为lcl27401。首先以T.neapolitana DSM 4359基因组DNA为模板,通过PCR扩增目的基因并完成T克隆,在NCBI数据库中比对结果表明:目的基因与Thermotoqa sp.RQ2等氨基酸序列相似度高于99%。再将目的基因连接至表达载体pET-32a(+),并导入大肠杆菌Rosetta中用IPTG诱导表达。SDS-PAGE显示表达蛋白的大小约为72KDa。热纯化后酶液测活反应的最适温度为80℃,最适pH在5.0左右。
- 陈丽丽陈萍华欣春蒋海芹刘琼毕云枫
- 关键词：Α-葡萄糖苷酶克隆
- 越橘叶超氧化物歧化酶的分离纯化与定性研究被引量：3
- 2011年
- 采用超声波辅助提取越橘叶超氧化物歧化酶得粗酶液,经选择性热变性、Sephadex G-75柱层析、透析、冷冻干燥,得到纯度较高的越橘叶超氧化物歧化酶。聚丙烯酰胺凝胶电泳显示在32kD和42kD左右有2条清晰条带;紫外-可见光谱扫描在波长258nm和280nm处有吸收峰;原子吸收光谱也测定出越橘叶超氧化物歧化酶中含有铁、锰、锌离子。结果表明越橘叶超氧化物歧化酶有3种类型:Fe-SOD、Mn-SOD和Cu/Zn-SOD。
- 贺阳文连奎路鑫蒋海芹李倩倩
- 关键词：超氧化物歧化酶分离纯化
