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周期性张应变对椎间盘纤维环细胞内游离钙离子浓度的影响被引量：5: 2006年; 目的探讨周期性张应变对培养的大鼠椎间盘纤维环细胞内Ca2+浓度([Ca2+])的影响及其可能机制。方法采用激光扫描共聚焦显微镜和F luo-3/AM荧光探针标记技术,测定周期性张应变对纤维环细胞内[Ca2+]的影响,并分析了EGTA、维拉帕米和氯化钆预处理对此作用的影响。结果应变为10%、频率为1 Hz的周期性张应变1 m in使细胞内[Ca2+]增加1.13倍;EGTA可以阻断此作用;而维拉帕米和氯化钆仅可部分阻断。结论周期性张应变使纤维环细胞内[Ca2+]升高,细胞外钙内流起主要作用,且有不同的钙离子通道参与。; 郭志良周跃成敏李华壮曹国永张伟李兴鑫; 关键词：周期性张应变纤维环细胞细胞内钙激光扫描共聚焦显微镜

TAT//CT-1，TAT//EGFP融合蛋白的表达，纯化及其在小鼠体内分布的初步观察: 当今社会,脊髓损伤/(spinal cord injury, SCI/)呈现出高发生率、高致残率、高耗费、低死亡率、青壮年患者居多的特点,加强SCI救治有十分重要的意义。而其中,神经营养因子在SCI后明显促进神经元的存活...; 李兴鑫; 关键词：心肌营养素-1 蛋白转导域小鼠; 文献传递

TAT/CT-1及TAT/EGFP融合蛋白的表达与纯化及其在小鼠体内分布的观察: 2006年; 目的分别构建含蛋白转导域(protein transduction domain,PTD)TAT与小鼠心肌营养素-1(CT-1)及TAT与增强绿色荧光蛋白(enhanced green fluorescent protein,EGFP)融合基因片断的原核表达质粒TAT/CT-1及TAT/EGFP,利用大肠杆菌进行表达并纯化;观察融合蛋白在小鼠体内的分布。方法采用PCR及克隆技术将CT-1编码区基因以及EGFP基因分别与TAT连接到原核表达载体pGEX-4T3上。用IPTG诱导表达融合蛋白,谷胱甘肽琼脂糖4B纯化融合蛋白。小鼠尾静脉注射融合蛋白,脑、脊髓、肝、心肌等器官冰冻切片,免疫荧光观察融合蛋白的存在。结果目的片断CT-1及EGFP被有效的扩增,构建后质粒测序表明无PCR引起的突变,TAT/CT-1及TAT/EGFP在转化的大肠杆菌中获得高效表达,并成功纯化。脑、脊髓、肝、心肌等组织切片免疫荧光检测呈阳性。结论成功获得了有活性的TAT/CT-1及TAT/EGFP的基因表达产物;TAT可介导CT-1及EGFP由细胞外跨膜转导进入细胞内;为CT-1功能的进一步研究打下了基础。; 李兴鑫周跃张正丰; 关键词：心肌营养素-1 蛋白转导域小鼠

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李兴鑫