张艳
- 作品数：12 被引量：45H指数：5
- 供职机构：石河子大学动物科技学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生生物学更多>>
- 维药新疆阿魏的生药鉴定被引量：4
- 2011年
- 目的:研究维药新疆阿魏的生药鉴定特征。方法:利用性状、显微和薄层鉴别法为该药进行初步鉴定研究,并确立其鉴别特征。结果:该品根、茎及叶的横切面中均存在不规则树脂道,尤见茎中树脂道最多;粉末中观察到非腺毛、淀粉粒、螺纹和网纹导管、石细胞及方晶等;全株具有特殊的葱蒜样臭味。薄层色谱中,供试品与阿魏酸对照品相应的位置上,显相同颜色的斑点。结论:本研究可为新疆阿魏的鉴别、开发利用及质量标准提供依据。
- 丁旭谭勇张艳李鹏赵文彬
- 关键词：新疆阿魏性状鉴别显微鉴别薄层鉴别
- 布鲁氏菌磷酸葡萄糖变位酶基因的原核表达与鉴定被引量：5
- 2013年
- 对布鲁氏菌磷酸葡萄糖变位酶(pgm)蛋白进行了表达与纯化,为研究该基因的功能提供了物质基础。首先利用PCR方法从羊种布鲁氏菌基因组DNA中PCR法扩增pgm基因,并将该基因亚克隆至pET-28a(+)载体中,转化入大肠杆菌(DE3),诱导表达融合蛋白;表达产物经Ni-NTA Agarose亲和层析纯化后,进行SDS-PAGE和Western blot分析。结果显示:扩增了pgm的全基因,成功构建了布鲁氏菌pgm基因的原核表达载体pET-28a(+)-pgm,并且在大肠杆菌中进行了表达,经Western blot鉴定,该蛋白可以与布鲁氏菌免疫血清产生特异性结合反应,且具有良好的免疫反应性。本研究为进一步研究布鲁氏菌pgm蛋白的生物学功能提供基础物质,也为进一步开发基因工程疫苗提供理论基础。
- 张豫张辉张艳陈瑞花王震桂丹孙志华陈创夫
- 关键词：布鲁氏菌原核表达
- 布鲁菌糖基转移酶对细胞炎症反应的影响被引量：1
- 2012年
- 本研究旨在研究布鲁菌糖基转移酶(WboA)在诱发胚胎滋养层细胞(HTP-8)炎症反应中的作用。以羊种布鲁菌M5-90为模板,扩增WboA基因,构建pET28a(+)-WboA重组表达质粒,转化重组质粒在BL21(DE3)中表达,通过SDS-PAGE和Western blot鉴定,并对重组WboA蛋白进行纯化。构建自杀载体pGEM-7zf-ΔWboA-SacB,通过同源重组的方法,筛选布鲁菌WboA基因缺失株ΔWboA,并进行PCR鉴定和遗传稳定性检测。然后将纯化的WboA蛋白与ΔWboA分别作用于胚胎滋养层细胞,ELISA检测IL-6、IL-10、TNF-α和乳酸脱氢酶(LDH)的相对变化量。结果成功纯化了WboA蛋白,构建了ΔWboA,ΔWboA侵染胚胎滋养层细胞诱导产生炎症细胞因子IL-6、IL-10和TNF-α均低于M5-90对照组,差异显著(P<0.05),WboA蛋白作用胚胎滋养层细胞时,炎症细胞因子IL-6、TNF-α和LDH均高于PBS对照组,差异极显著(P<0.01)。本研究表明WboA蛋白具有细胞毒作用,布鲁菌的致炎作用与脂多糖O链相关,为进一步阐明布鲁菌感染宿主细胞的发病机制奠定了基础。
- 张豫张辉张艳孟茹王震陈瑞花张俊波鲁芝子陈创夫
- 关键词：布鲁菌糖基转移酶炎症细胞因子LPS
- 布鲁氏菌M5-90ΔWboA基因缺失株的构建及免疫效果的初步评价被引量：11
- 2011年
- 为获得毒力较弱并能区分自然感染和疫苗免疫的布鲁氏菌候选疫苗株,本研究用PCR方法扩增WboA基因的上下游同源臂序列,构建重组质粒pGEM-7zf-Δ WboA-Sac,电转化布鲁氏菌M5-90感受态细胞,筛选布鲁氏菌疫苗株M5-90的WboA基因缺失株,并对获得的M5-90Δ WboA遗传稳定性、毒力、免疫保护性、抗体水平等指标进行检测。实验结果表明M5-90Δ WboA株的毒力比M5-90株明显减弱,差异极显著(p<0.01),体液免疫和细胞免疫结果表明M5-90Δ WboA株与亲本M5-90株相比差异不显著(p<0.05),M5-90Δ WboA株和亲本株的保护率分别为10%和20%,表明M5-90Δ WboA株与M5-90株具有相似的保护性。凝集试验和western blot试验显示M5-90Δ WboA株免疫小鼠的血清反应结果为阴性。本研究构建的布鲁氏菌基因缺失株M5-90Δ WboA具有较好的遗传稳定性,毒力比亲本株更弱,免疫保护性与亲本株相当,并能以血清学检测方法区分野毒株感染和缺失疫苗株免疫的动物。
- 张艳陈创夫张辉张沾李志强张俊波孟仁王震
- 关键词：布鲁氏菌基因同源重组免疫原性
- 布鲁氏菌磷酸葡萄糖变位酶对胚胎滋养层细胞的致炎作用被引量：5
- 2012年
- 【目的】本文研究布鲁氏菌磷酸葡萄糖变位酶(pgm)基因缺失株和PGM蛋白对胚胎滋养层细胞(HPT-8)的损伤作用及其引起炎症反应时细胞因子的变化,探讨布鲁氏菌pgm基因的生物学功能。【方法】本文分别用布鲁氏菌pgm基因缺失株和纯化的PGM蛋白感染胚胎滋养层细胞,通过细胞形态学的观察和酶联免疫反应检测其对细胞的损伤作用以及细胞因子的变化。【结果】本实验获得了纯化的PGM蛋白,成功构建了pgm基因缺失株,采用该基因缺失株免疫小鼠后,采集血液分离血清,虎红平板实验和试管凝集实验结果显示为阴性;pgm缺失株和PGM蛋白感染HPT-8细胞均能诱发贴壁细胞脱落;而且pgm基因缺失株侵袭HPT-8细胞的能力较M5-90明显降低。pgm基因缺失株侵袭HPT-8细胞诱导产生的细胞因子IL-6、TNF-α和LDH均高于M5-90对照组,差异极显著(P<0.01),而细胞因子IL-10的分泌变化不明显,PGM蛋白感染HPT-8细胞时,其细胞因子LDH表达水平高于PBS对照组,差异极显著(P<0.01),而IL-6、IL-10和TNF-α的表达水平明显低于PBS对照组,差异显著(P<0.05)。【结论】本研究表明,PGM蛋白和pgm缺失株可致胚胎滋养层细胞损伤,且引发滋养层细胞细胞因子的表达变化,为进一步研究布鲁氏菌感染宿主细胞的分子机制奠定了基础。
- 王震张辉张艳郭飞张豫陈瑞花孟茹李志强张倩陈创夫
- 关键词：布鲁氏菌
- 贝氏、扩展莫尼茨绦虫组织结构形态学观察
- 本研究采用压片和德氏苏木素染色法,光学显微镜下观察贝氏、扩展莫尼茨绦虫的节间腺、排泄管和生殖器官的组织形态结构。结果表明:两种莫尼茨绦虫的纵排泄管从颈节开始至孕节都存在,且逐渐变粗;节间腺从分节处开始出现发育,节片前后缘...
- 田晶华刘继荣柳建新朱腾川张艳张言召
- 关键词：莫尼茨绦虫生殖系统
- 文献传递
- 布鲁氏菌Ⅳ型分泌系统效应子VceC功能的初步研究被引量：17
- 2011年
- 为研究布鲁氏菌(Brucella)Ⅳ型分泌系统效应子VceC的功能,本研究从羊种布鲁氏菌16M株基因组中克隆vceC基因片段,插入pEGFP-N1中,构建真核表达重组pEGFP-vceC。经脂质体转染HPT-8细胞,荧光显微镜观察、western blot鉴定目的蛋白在HPT-8细胞中表达情况,检测细胞凋亡、NO释放量及LDH活力。Western blot检测显示VceC在细胞中表达,转染pEGFP-vceC后的细胞凋亡、细胞上清液中NO释放量及LDH活力比对照组显著增加(p<0.05)。本研究初步表明VceC蛋白具有细胞毒性作用,为进一步研究VceC的功能奠定了基础。
- 张沾陈创夫张辉张艳张娜李臻陈瑞花张豫
- 关键词：羊种布鲁氏菌
- 布鲁氏菌PGM蛋白对细胞炎症反应的影响
- 本文研究布鲁氏菌磷酸葡萄糖变位酶(pgm)基因缺失株和PGM蛋白对胚胎滋养层细胞(HPT-8)的损伤作用及其引起炎症反应时细胞因子的变化，探讨布鲁氏菌pgm基因的生物学功能。本文分别用布鲁氏菌pgm基因缺失株和纯化的PG...
- 张辉王震张艳张豫陈瑞花孟茹张倩陈创夫
- 关键词：布鲁氏菌细胞炎症
- 文献传递
- 布鲁氏菌WboA基因的原核表达与鉴定被引量：7
- 2011年
- 为了在大肠杆菌中表达布鲁氏菌的WboA蛋白,并对其进行纯化和鉴定,采用PCR方法扩增得到WboA基因DNA片段,将其克隆于pET-28a(+)载体中,构建重组表达载体pET-WboA,转化E.coliBL21,IPTG诱导表达。表达产物经Ni-NTA Agarose亲和层析纯化后,进行Western blot鉴定及测序。结果显示:重组表达质粒pET-WboA经双酶切及测序鉴定证明构建正确。经IPTG诱导后,进行SDS-PAGE、western blot分析鉴定,可见约45 ku的外源蛋白带,表明WboA基因在大肠杆菌中得到了表达。用Ni-NTA Agarose试剂盒进行蛋白纯化,获得纯化的WboA蛋白。
- 张艳陈创夫张辉张沾陈瑞花张钰李志强张俊波
- 关键词：布鲁氏菌原核表达
- 布鲁氏菌糖基转移酶对细胞炎症反应的影响
- 羊种布鲁氏菌糖基转移酶(WboA)在诱发胚胎滋养层细胞炎症反应中的作用.研究表明WboA蛋白具有细胞毒作用,布鲁氏菌的致炎作用与脂多糖O链相关,为进一步阐明布鲁氏菌感染宿主细胞的发病机制奠定了基础. 布鲁氏菌是兼性...
- 张豫张辉张艳孟茹王震陈瑞花张俊波鲁芝子陈创夫
- 关键词：布鲁氏菌糖基转移酶宿主细胞炎症反应
