刘海英
- 作品数：5 被引量：12H指数：2
- 供职机构：哈尔滨医科大学药学院更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划黑龙江省教育厅振兴老工业基地项目黑龙江省自然科学基金更多>>
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- 三种抗人细胞色素P450酶合成肽抗体的制备及应用研究
- 2007年
- 目的制备兔抗人细胞色素P450酶1A2、3A4及4A11的特异性抗体,对其在药物代谢方面的应用进行研究。方法①利用生物信息学方法分析CYP1A2、CYP3A4及CYP4A11蛋白的序列,利用DNAstar软件中蛋白质的亲水性结构、柔韧区、抗原指数及表面概率结构指标选择多肽序列,应用Blast软件对所选序列进行同源性分析并合成多肽,与载体蛋白钥孔戚血蓝素(KLH)偶联,免疫大耳白兔制备抗CYP1A2、3A4及4A11抗体。抗体纯化后经酶联免疫吸附(ELISA)、免疫印迹(Western blot)鉴定其特异性;②通过制备大鼠给药模型利用Western blot评价上述抗体在药物代谢酶分析方面的作用。结果获得抗CYP1A2、CYP3A4及CYP4A11合成肽的抗体。Western blot结果显示,三种抗体均可与其合成肽及天然CYP1A2、CYP3A4及CYP4A11蛋白出现特异性反应,识别的相应抗原的相对分子质量(Mr)分别为63 000、59 000及53 000。同时,Western blot结果显示,所制备的抗体能识别药物诱导后大鼠天然CYP1A2、CYP3A4及CYP4A11。结论合成的多肽-KLH复合物具有免疫原性,可用于制备相应的抗体。制备的抗体特异性良好,可应用于药物代谢酶方面的研究。
- 杨微刘海英朱大岭徐东花唐晓波
- 关键词：合成肽多克隆抗体药物代谢
- 兔抗人细胞色素P450 1A2多克隆抗体的制备及鉴定被引量：1
- 2007年
- 目的：制备兔抗人细胞色素P4501A2（CYP1A2）抗体及其特性鉴定。方法：利用生物信息学方法分析CYP1A2蛋白的序列，根据亲水性、抗原性、柔韧性及表面性等指标选择多肽序列，合成CYP1A2多肽，与载体蛋白钥孔戚血蓝素（Keyhole limpet hemocyanin，KLH）偶联，免疫日本大耳白兔制备抗CYP1A2抗体。辛酸-硫酸铵法纯化抗体，间接ELISA法测定抗体的效价及相对亲和力常数，Western blot鉴定其特异性，免疫组化进行定位。结果：获得针对小分子CYP1A2的抗体。该抗体效价为1∶16000；相对亲和力常数在10^5-10^6/M，具有实用价值；可与CYP1A2合成肽及天然CYP1A2出现特异性反应；可识别正常人肝脏组织CYP1A2；Western blot的结果显示，该抗体识别的相应抗原的相对分子质量为58000。结论：合成的多肽-KLH复合物具有免疫原性，可用于制备相应的抗体。制备的兔抗CYP1A2合成肽抗体可应用于酶联免疫吸附试验、免疫印迹、免疫组化实验。
- 刘海英杨微李郁梅郭蕾吴春玲徐东花唐晓波朱大岭
- 关键词：CYP1A2合成肽多克隆抗体
- 在PASMCs中内源性15-HETE参与亚急性缺氧对Kv3．4表达和Ik的抑制
- ＜正＞缺氧诱导产生的15-羟二十碳四烯酸（15-HETE）是肺动脉收缩过程中一个重要的调节因子。我们首次报道,在新生期家兔的．肺动脉中,亚急性缺氧能够活化15-脂质氧化酶（15-LO）,它能够催化花生四烯酸 （AA）产生...
- 郭蕾田华刘晔王晶刘海英郭守利朱大岭
- 文献传递
- 兔抗人细胞色素P4504A11合成肽抗体的制备与鉴定被引量：3
- 2007年
- 目的制备兔抗人细胞色素P4504A11(CYP4A11)抗体,并对其特性进行初步鉴定。方法利用生物信息学方法分析CYP4A11蛋白的序列,根据亲水性结构、柔韧区、抗原指数及表面概率结构等指标选择多肽序列、合成CYP4A11多肽,与载体蛋白钥孔戚血蓝素(KLH)偶联,免疫大耳白兔制备抗CYP4A11抗体。辛酸-硫酸铵法纯化抗体,对纯化的抗体进行ELISA、Westernblot、免疫组化等鉴定。结果获得抗CYP4A11合成肽的抗体。该抗体效价为1∶32000。可与CYP4A11合成肽及天然CYP4A11出现特异性反应,该抗体识别的相应抗原的相对分子质量(Mr)为53000,可识别正常肝脏的CYP4A11。结论合成的多肽-KLH复合物具有免疫原性,可用于制备相应的抗体。制备的兔抗CYP4A11合成肽抗体可应用于ELISA、Westernblot、免疫组化等实验。
- 杨微刘海英武正华唐晓波朱大岭
- 关键词：合成肽多克隆抗体
- 细胞色素P450 3A4抗原表位的分析及其抗体的制备与鉴定被引量：8
- 2007年
- 目的：制备兔抗人细胞色素P450 3A4（CYP3A4）抗体及其特性鉴定。方法：利用生物信息学方法分析CYP3A4蛋白的序列,根据亲水性、抗原性、柔韧性及表面性等指标选择多肽序列,合成CYP3A4多肽,与载体蛋白钥孔戚血蓝素（KLH）偶联,免疫日本大耳白兔制备抗CYP3A4抗体。辛酸-硫酸铵法纯化抗体,间接ELISA测定抗体的效价及相对亲和力常数,Western blot鉴定其特异性,免疫组化进行定位。结果：获得针对小分子CYP3A4的抗体。该抗体效价为1∶16000;相对亲和力常数在10^5～10^6M^-1,具有实用价值;可与CYP3A4合成肽及天然CYP3A4出现特异性反应;可识别正常人肝脏组织CYP3A4;Western blot的结果显示,该抗体识别的相应抗原的相对分子质量（Mr）为46000。结论：合成的多肽-KLH复合物具有免疫原性,可用于制备相应的抗体。制备的兔抗CYP3A4合成肽抗体可应用于ELISA、Western blot和免疫组化实验。
- 刘海英杨微武正华唐晓波朱大岭
- 关键词：CYP3A4合成肽多克隆抗体
