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鸭新城疫病毒HN蛋白原核表达及初步应用: 鸭源ND又称鸭副黏病毒病,是由禽1型副黏病毒(APMV-1)引起的一种急性、高度接触性传染病.所有鸭群均易感,且日龄越小,易感性与死亡率越高.以往水禽对NDV具有较强的抵抗力,多呈隐性感染,但近年来,鸭感染NDV后表现出...; 刘俊贾宁方梅; 关键词：NDV HN基因 ELISA

鸭肝炎病毒Ⅰ型VP35'端截短基因的原核表达: 2014年; 鸭病毒性肝炎（ Duck viral hepatitit,DVH）是一种由鸭肝炎病毒（ Duck hepatitis virus,DHV）感染导致的急性和高度致死性传染病,可引起21日龄以下的雏鸭发生急性肝炎,有的可能腹泻,病死率高达100%,是严重危害养鸭业的疫病之一。 DHV 主要包括3个血清型,即Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型。3个血清型有明显的差异,无交叉免疫性。目前中国发生和流行的主要是Ⅰ型鸭肝炎病毒（ DHV-Ⅰ）[1]。该病毒属于小 RNA病毒科,为无囊膜的单股正链RNA病毒[2-3],其基因组大小约为7690 nt,具有1个开放阅读框,编码2249个氨基酸的聚合蛋白质。该聚合蛋白质经蛋白酶水解可产生11种蛋白质,即 VP0、VP1、VP3、2A1、2A2、2B、2C、3A、3B、3C、3D[4]；其中 VP3蛋白质位于衣壳表面,是 DHV 重要的结构蛋白质之一。DHV-1和人肠道病毒（ Human parechovirus,HPeV）同属于小RNA病毒科,其中HPeV VP3蛋白质的N-末端约20个氨基酸的区域具有很强的免疫原性[5],有文献报道 DHV-ⅠVP3蛋白质在该区域有较高的表面可及性、亲水性值和抗原指数,同样具有较强的免疫原性[6]。; 张继玲朱善元王安平刘俊王岑左为勇洪伟明; 关键词：VP3基因原核表达 DUCK HEPATITIS VIRUS

鸭新城疫病毒HN蛋白原核表达及初步应用: 鸭源ND是一种急性、高度接触性传染病。以往水禽对NDV具有较强的抵抗力，多呈隐性感染，但近年来，鸭感染NDV后表现出不同程度的临床症状，严重影响养鸭业经济。本试验目的以获得鸭源NDV ELISA抗体检测方法将目的...; 刘俊; 关键词：NDV HN基因 ELISA; 文献传递

Survivin和active-caspase3在健康成年牦牛免疫器官内的表达与分析: survivin和active-caspase3是凋亡通路的重要调节因子,主要参与肿瘤抑制,也见于许多健康组织器官。为了解survivin和active-caspase3在健康牦牛免疫器官中的功能,本文采用RT-qPCR...; 刘俊崔燕余四九何俊峰; 关键词：SURVIVIN 免疫器官胸腺脾脏; 文献传递

兰州地区NDV的分离鉴定及M蛋白的原核表达: 2016年; 为了分离出兰州地区鸡群新城疫病毒(NDV,Newcastle disease virus)并将M蛋白进行原核表达。通过鸡胚尿囊腔接种培养分离得到的兰州地区NDV,采用血凝及血凝抑制实验和Western bolt对病毒进行鉴定。利用分子克隆方法将NDV M蛋白进行原核表达,用Western blot技术分析其反应原性。根据NCBI发表的NDV M基因构建进化树。结果表明,成功分离的NDV悬液经RT-PCR技术扩增出M基因片段,重组菌p ET-M经SDS-PAGE分析,在约42 k Da处有一明显的蛋白条带,Western blot技术证明其具有良好的反应原性。M基因进化树分析,分离毒株与La-Sota具有极高同源性。本研究成功分离出兰州地区NDV并将M蛋白进行原核表达,同时确定分离毒株与La-Sota毒株的同源性极高。为后续针对兰州地区新城疫流行病学调查和综合防控技术提供实验依据。; 何智博刘俊胡永浩; 关键词：NDV M蛋白 WESTERN BLOT

Survivin在不同年龄牦牛组织器官内表达检测及其多克隆抗体的制备: 研究目的牦牛是高原特有物种,依据其自身的解剖学和生理学特性能够很好地适应高原的特殊环境。存活素(Survivin)作为凋亡抑制蛋白(IAP)家族最小成员既能参与细胞的增殖分化也能参与细胞的凋亡代谢。Caspase-3作...; 刘俊; 关键词：牦牛不同年龄组织器官 SURVIVIN CASPASE-3 多克隆抗体; 文献传递

Survivin和active-caspase3在健康成年牦牛免疫器官内的表达与分析: survivin和active-caspase3是凋亡通路的重要调节因子,主要参与肿瘤抑制,也见于许多健康组织器官。为了解survivin和active-caspase3在健康牦牛免疫器官中的功能,本文采用RT-qPCR...; 刘俊崔燕余四九何俊峰; 关键词：SURVIVIN 免疫器官胸腺脾脏

NDV HN基因在pET-30a中的表达与表达产物的鉴定: 2015年; 将新城疫病毒(newcastle disease virus,NDV)感染健康鸭胚,采用尿囊液方法提取总RNA,根据GenBank已发表的新城疫病毒HN基因序列设计一对引物,以一株鸭源NDV的总RNA为模板,经RT-PCR扩增出约1.7kb的HN基因片段.将其克隆到原核表达载体pET-30a,获得重组质粒pET-HN后,转化大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞.重组菌经IPTG诱导表达后,裂解产物进行SDS-PAGE分析,结果发现在约64ku处可见预期条带.Western-blot结果表明:表达的HN蛋白可与NDV阳性血清发生特异性结合,具有良好的反应原性,本结果为鸭源NDV抗体检测提供了理论依据.; 刘俊张继玲王岑何智博贾宁; 关键词：HN基因原核表达 WESTERN-BLOT

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刘俊