吴永鹏
- 作品数：3 被引量：2H指数：1
- 供职机构：西北农林科技大学动物科技学院蚕桑丝绸研究所更多>>
- 发文基金：国家现代农业产业技术体系建设项目中央级公益性科研院所基本科研业务费专项更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 家蚕细胞自噬相关蛋白BmATG8的多克隆抗体制备与组织表达分析被引量：2
- 2014年
- 自噬是细胞固有的一种降解机制,在生物体的生长、发育以及感染免疫、衰老、死亡等过程中发挥重要作用。进行家蚕细胞自噬相关蛋白基因的克隆和重组蛋白表达,分析细胞自噬相关蛋白在5龄幼虫不同组织的表达水平和同一组织中随5龄发育时间的表达变化,有助于从分子水平了解家蚕细胞自噬的功能。根据GenBank登录的家蚕细胞自噬相关蛋白基因Atg8（BmAtg8）的序列设计引物,以家蚕5龄幼虫中肠cDNA为模板克隆了BmAtg8的354 bp编码区序列,并成功将其连入pET32a（＋）质粒中。将重组质粒转化E.coli Rosseta菌株继而诱导表达重组BmATG8蛋白,将该蛋白质纯化后强化免疫新西兰大白兔3次,获得效价达1∶512 000的多克隆抗血清。以此多克隆抗体杂交家蚕组织总蛋白,检测到BmATG8及其与磷脂酰乙醇胺偶联的BmATG8-PE 2条免疫印迹条带。Western杂交表明BmATG8蛋白在家蚕5龄第2天幼虫丝腺、中肠和脂肪体中的表达水平较高,其中在5龄第1～2天和第7～8天丝腺组织的表达水平较高,说明家蚕5龄幼虫这3个组织尤其是这2个时间段的丝腺组织中细胞自噬活性极高,反映出家蚕变态发育前这些组织器官细胞内的代谢活动旺盛。
- 杨晓冰李洪建吴永鹏刘庆洪张敏娟钱永华焦锋
- 关键词：家蚕细胞自噬多克隆抗体
- 家蚕感染BmCPV后对中肠自噬的影响
- 家蚕质型多角体病毒（BmCPV）感染家蚕幼虫中肠上皮细胞而引起中肠型脓病，对其致病机理的研究有助于制定科学的预防策略，减少病害给蚕业生产造成的损失。细胞自噬是细胞内物质的一种降解途径，参与多种生理反应。在哺乳动物细胞中发...
- 吴永鹏
- 关键词：家蚕自噬
- 文献传递
- 家蚕感染BmCPV后中肠自噬相关蛋白ATG8的表达变化
- 2014年
- 家蚕质型多角体病毒（BmCPV）感染家蚕幼虫中肠上皮细胞而引起中肠型脓病,对病毒致病机理的研究有助于制定科学的预防策略。细胞自噬作为机体的一种免疫机制在抵抗微生物的感染中发挥作用。利用免疫组织化学法,检测BmCPV感染家蚕4龄幼虫中肠组织中的细胞自噬相关蛋白ATG8（autophagy-related gene 8）的表达变化：家蚕幼虫在感染BmCPV1-8 h内,中肠ATG8蛋白的表达显著高于正常水平;感染8-35 h,中肠ATP8蛋白的表达下降至正常水平;感染51 h,该蛋白质在中肠的表达又显著升高,至99 h达到高峰,且感染后62 h可以观察到中肠上皮层柱状细胞内有病毒多角体的产生。研究结果显示BmCPV感染家蚕幼虫的过程与中肠细胞自噬存在一定的关系。
- 吴永鹏刘立群朱大鹏杨晓冰张敏娟钱永华焦锋
- 关键词：家蚕质型多角体病毒细胞自噬免疫组织化学法
