李洪建
- 作品数：3 被引量：27H指数：2
- 供职机构：西北农林科技大学动物科技学院更多>>
- 发文基金：公益性行业(农业)科研专项国家现代农业产业技术体系建设项目中央级公益性科研院所基本科研业务费专项更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 家蚕细胞自噬相关蛋白BmATG8的多克隆抗体制备与组织表达分析被引量：2
- 2014年
- 自噬是细胞固有的一种降解机制,在生物体的生长、发育以及感染免疫、衰老、死亡等过程中发挥重要作用。进行家蚕细胞自噬相关蛋白基因的克隆和重组蛋白表达,分析细胞自噬相关蛋白在5龄幼虫不同组织的表达水平和同一组织中随5龄发育时间的表达变化,有助于从分子水平了解家蚕细胞自噬的功能。根据GenBank登录的家蚕细胞自噬相关蛋白基因Atg8（BmAtg8）的序列设计引物,以家蚕5龄幼虫中肠cDNA为模板克隆了BmAtg8的354 bp编码区序列,并成功将其连入pET32a（＋）质粒中。将重组质粒转化E.coli Rosseta菌株继而诱导表达重组BmATG8蛋白,将该蛋白质纯化后强化免疫新西兰大白兔3次,获得效价达1∶512 000的多克隆抗血清。以此多克隆抗体杂交家蚕组织总蛋白,检测到BmATG8及其与磷脂酰乙醇胺偶联的BmATG8-PE 2条免疫印迹条带。Western杂交表明BmATG8蛋白在家蚕5龄第2天幼虫丝腺、中肠和脂肪体中的表达水平较高,其中在5龄第1～2天和第7～8天丝腺组织的表达水平较高,说明家蚕5龄幼虫这3个组织尤其是这2个时间段的丝腺组织中细胞自噬活性极高,反映出家蚕变态发育前这些组织器官细胞内的代谢活动旺盛。
- 杨晓冰李洪建吴永鹏刘庆洪张敏娟钱永华焦锋
- 关键词：家蚕细胞自噬多克隆抗体
- 陕西省苜蓿茎点霉叶斑病病原菌的鉴定被引量：5
- 2015年
- 近期发现了陕西省紫花苜蓿(Medicago sativa)一种苜蓿茎点霉叶斑病,为了准确鉴定该病害,开展了一系列病原鉴定试验。病叶片典型症状为叶尖上的深褐色斑点融合扩大呈"轮纹状"病斑;病原物的分生孢子无色透明,圆柱形,无隔单胞,大小为7×1.25μm;以病原菌rDNA-ITS(核糖体DNA内转录间隔区)序列的系统发育树的分析表明,病原菌与Phoma medicaginis var.Medicaginis(DQ109960)亲缘关系最近,NJ法中的相似性达到99%,UPGMA法中的相似性为98%;离体叶片接种验证病原菌具有致病性,结果表明:苜蓿茎点霉叶斑病的病原菌为苜蓿茎点霉(Phoma medicaginis var.Medicaginis)。
- 李洪建李芳红史健呼天明程积民钱永华焦锋
- 关键词：苜蓿病原菌RDNA-ITS
- 采用EF-1α序列分析法对苜蓿根腐病病原菌——锐顶镰刀菌的鉴定被引量：20
- 2017年
- 苜蓿根腐病对苜蓿生长和产量造成严重影响,为了解引起根腐病病原真菌的种类,本文对从陕西省定边县牧草草场紫花苜蓿根部分离得到的根腐病病原菌进行形态学观察、EF-1α序列分析鉴定及接种试验。结果表明:通过对病原菌在PDA培养基中的分离、纯化得到的单菌落形态学观察及显微镜下菌丝、孢子的观察,该病原菌属于引起苜蓿根腐病的镰刀菌属(Fusarium);用CTAB法提取病原菌基因组DNA,并对EF-1α序列进行PCR扩增、回收纯化、克隆测序,将测序结果进行Blast比对,构建系统发育树,分析与Genbank已知近缘种属亲缘关系,结果显示与锐顶镰刀菌(F.acuminatum)亲缘关系最近,可信度达99%;最后通过根部接种试验,接种苜蓿根部发病症状与田间根腐病发病症状一致,鉴定结果显示本试验研究的引起紫花苜蓿根腐病的病原菌为镰刀菌属锐顶镰刀菌(F.acuminatum)。
- 易铭梁嘉俊史建李洪建程积民焦锋
- 关键词：紫花苜蓿根腐病
