刘天强
- 作品数：5 被引量：19H指数：3
- 供职机构：中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金中国农业科学院哈尔滨兽医研究所所长基金黑龙江省博士后基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 2005-2006人源H3N2亚型猪流感中国分离株分子演化的研究
- 本研究对黑龙江和广东省的四株H3N2亚型猪流感分离株进行了全基因组测序,主要对HA和NA基因进行了序列分析,并绘制了进化树.序列分析结果表明:SW/GD/164/06、SW/GD/165/06和SW/GD/166/06三...
- 于海张强刘天强华荣虹童光志
- 关键词：猪流感HA基因NA基因
- 文献传递网络资源链接
- 抗乙型脑炎病毒非结构蛋白NS1单克隆抗体的制备与鉴定被引量：6
- 2009年
- 本研究利用原核表达的乙型脑炎病毒(JEV)SA14-14-2株非结构蛋白NS1作为免疫原,免疫8周龄BALB/c小鼠,采用淋巴细胞杂交瘤技术进行融合,共获得4株特异性针对JEV NS1的杂交瘤细胞,分别命名为1H6、2C3、3A7、4C8,经测定1H6单抗亚类属于IgG2b,其他3株为IgG1,轻链均为κ链。4株杂交瘤细胞诱生小鼠腹水效价分别达1∶20480、1∶2560、1∶20480、1∶10240,western blot证实所得杂交瘤细胞分泌的抗体均可与JEV NS1蛋白发生特异性反应,间接免疫荧光试验表明1H6、3A7、4C83株单抗能够识别天然的JEV NS1蛋白。本研究为进一步探究JEV NS1蛋白结构及其功能奠定了基础。
- 王斌华荣虹赵付荣刘天强于海杜鹃童光志
- 关键词：乙型脑炎病毒非结构蛋白单克隆抗体
- H3N2亚型猪流感病毒血凝素基因的原核表达及间接ELISA诊断方法的建立被引量：5
- 2008年
- 采用RT-PCR扩增H3N2亚型猪流感病毒HA1基因。将该片段插入到原核表达载体pET-30a(+)中,构建原核表达载体pET-HA1。阳性质粒转化宿主菌BL21,经IPTG诱导,HA1基因获得表达,其重组蛋白以包涵体的形式存在。通过改变IPTG的浓度和诱导时间,确定表达HA1基因的最佳诱导条件。Western blot分析表明表达产物具有良好的抗原活性。用纯化的表达产物作为包被抗原建立了检测H3亚型猪流感病毒抗体的间接ELISA方法,确定抗原最佳包被浓度为4μg/mL,血清最佳稀释度为1∶100,阳性标准初步判定为:待检血清OD值>0.4,而且待检血清OD值/阴性血清OD值>2。应用此方法对309份临床血清样品进行了检测,并与HI方法进行了比较,结果表明基于重组HA蛋白的间接ELISA方法可用于H3N2亚型猪流感病毒感染的初步诊断。
- 刘天强于海张强李国新王斌童光志
- 关键词：H3N2亚型猪流感病毒血凝素基因原核表达
- H3N2亚型猪流感病毒HA1蛋白间接ELISA方法的建立及NP蛋白单克隆抗体的制备
- 本研究根据GenBank已收录的A/Swine/Heilongjiang/1/05(H3N2)分离株血凝素基因序列，设计一对引物，用RT-PCR扩增H3N2亚型猪流感病毒HA1基因。将该片段定向插入到原核表达载体pET-...
- 刘天强
- 关键词：猪流感病毒H3N2亚型单克隆抗体间接ELISA方法
- 文献传递
- 乙型脑炎病毒E蛋白抗原表位E39特异性单克隆抗体的制备被引量：7
- 2008年
- 为了制备乙型脑炎病毒E蛋白抗原表位特异性单克隆抗体,将编码乙型脑炎病毒E蛋白抗原表位E39的DNA序列进行人工合成,随后插入表达载体pGEX-6p-1的限制性酶切位点BamHⅠ与XhoⅠ之间,构建了表位肽与GST的融合表达质粒。该表位融合蛋白经亲和层析纯化后免疫BALB/c小鼠,按常规方法进行细胞融合。以化学合成的E39表位多肽为抗原,对融合细胞上清进行间接ELISA筛选。结果,筛选出1株分泌E39表位特异性抗体的杂交瘤细胞株,该杂交瘤细胞分泌抗体能力稳定。经鉴定,该单克隆抗体亚型为IgG2b,轻链类型为κ链。结果表明,用表位融合蛋白为抗原可以制备表位特异性单克隆抗体。
- 华荣虹王斌陈娜莎于海刘天强马红刘娣童光志
- 关键词：乙型脑炎病毒E蛋白单克隆抗体表位
