代晓华
- 作品数:6 被引量:13H指数:2
- 供职机构:天津市口腔医院更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金国家教育部博士点基金天津市应用基础与前沿技术研究计划更多>>
- 相关领域:医药卫生更多>>
- 钙调素拮抗剂O-(4-乙氧基-丁基)-小檗胺对人白血病细胞K562和K562/A02生长的抑制作用被引量:7
- 2009年
- 目的研究钙调素拮抗剂O-(4-乙氧基-丁基)-小檗胺(EBB)体外抗白血病作用及机制。方法四唑盐(MTT)比色法评价EBB的细胞毒作用;流式细胞术检测细胞凋亡;荧光分光光度计检测细胞ROS水平;激光共聚焦显微镜检测[Ca2+]i含量。结果EBB明显抑制敏感K562和耐药K562/A02细胞增殖,IC50分别为(8.22±1.67)mol.L-1和(8.97±1.48)mol.L-1。EBB作用早期诱导凋亡,晚期引起坏死。K562/A02细胞的ROS静息值是K562细胞的2倍,EBB诱导两种细胞ROS生成呈浓度和时间依赖性,加入SOD明显降低坏死率。K562/A02细胞的[Ca2+]i低于K562细胞。EBB能明显增加两种细胞的[Ca2+]i。结论EBB明显抑制K562和K562/A02细胞增殖。信号分子Ca2+、ROS参与了EBB的细胞毒作用。
- 邹凌琳周圆杨铭代晓华齐静熊冬生范冬梅杨纯正朱惠芳
- 关键词:钙调素拮抗剂
- 人生存素survivin的克隆与分泌表达
- 2012年
- 旨在克隆人生存素(survivin)基因,并在原核系统中进行可溶性表达。采用RT-PCR方法从人乳腺癌细胞MCF-7中克隆survivin基因,将其重组到pAYZ表达载体中,构建带有六聚组氨酸纯化标记的人survivin基因原核表达载体pAYZ-survivin,将该载体转化大肠杆菌16C9进行表达。结果表明,成功克隆了survivin基因并构建了重组表达载体。融合蛋白主要以可溶性状态分泌到周质腔内存在。分离提取蛋白,HiTrap金属螯合柱进行亲和层析纯化,并经Western blot验证了高纯度survivin融合蛋白的表达。
- 代晓华姜琳琳程昕纪庆朱惠芳熊冬生周圆
- 关键词:生物医学工程生存素分泌表达大肠杆菌凋亡
- Survivin小分子抑制剂的计算机虚拟筛选及初步活性研究
- 2013年
- 目的通过计算机虚拟筛选,寻找生存素(survivin)的小分子抑制剂,并对其活性进行初步研究。方法基于sur-vivin与其抑制性配体Smac/Diablo复合物的三维结构,用分子对接的方法对含有149,214个小分子的三维结构数据库进行筛选。通过初步活性测定确定活性较高的化合物,进一步研究其对凋亡,细胞周期及活性氧产生的影响。利用分子图像学方法分析化合物与survivin之间的作用模式。结果通过能量打分并根据结构多样性和类药性原则,最终选择了35个化合物进行初步活性测定,其中有9个化合物显示出明显的抑制活性,3个化合物的半数抑制浓度在30μmol.L-1以下。选择其中活性最高的化合物1-19进行进一步研究,结果显示小剂量的1-19能够促进细胞的早期凋亡,诱导细胞内活性氧产生,导致细胞发生S和G2/M期阻滞。分子图像学分析显示活性最高的1-19能够与survivin配体结合区的71位天门冬氨酸形成两个稳定的氢键。结论通过计算机辅助药物设计、药理活性测试以及分子图像学分析,初步确定了一个针对survivin的全新的先导化合物,为今后survivin小分子抑制剂的研究奠定了基础。
- 张孝云纪庆代晓华姜琳琳熊冬生周圆
- 关键词:生存素小分子抑制剂药物设计先导化合物
- 过表达的细胞膜表面角蛋白8——乳腺癌多药耐药的一种新靶点被引量:5
- 2008年
- 目的研究细胞膜角蛋白8(CK8)过表达与乳腺癌多药耐药的相关性及其作为逆转乳腺癌耐药靶点的可行性。方法转染特异的CK8-siRNAs至人乳腺癌耐药细胞MCF-7/MX,用Western blot方法检测siRNAs对CK8蛋白表达的抑制,荧光染色用激光共聚焦显微镜观察细胞膜表面CK8表达量的改变,并用Sulforhodamine B的方法检测转染前后细胞对多种化疗药敏感性的变化。结果MCF-7/MX细胞导入CK8-siRNAs后,细胞膜CK8的表达水平明显抑制,同时对米托蒽醌等化疗药的敏感性明显提高,耐药表型明显逆转。结论CK8细胞内定位及表达水平的改变,在乳腺癌多药耐药表型的形成中起重要作用。作为一种新的耐药相关膜表面标志,细胞膜CK8有望成为逆转乳腺癌多药耐药诊断和治疗的新靶点。
- 刘芳高瀛岱郭红星张砚君代晓华师锐赞杨纯正熊冬生
- 关键词:多药耐药靶点RNAI乳腺癌
- 钙调素拮抗剂O-4-乙氧基-丁基-小檗胺对人乳腺癌细胞MCF-7生长的影响及相关作用机制被引量:2
- 2009年
- 目的探讨钙调素拮抗剂O-4-乙氧基-丁基-小檗胺(EBB)对人乳腺癌细胞系MCF-7生长的影响及其作用机制。方法采用不同浓度EBB作用于MCF-7,MTT法检测其对MCF-7细胞的作用,流式细胞仪检测细胞周期,激光扫描共聚焦显微镜检测细胞骨架、线粒体、内质网等亚细胞结构。结果EBB对MCF-7细胞的IC50为(13.0±3.7)μmol/L,并可使S期细胞显著增加(P<0.05)。EBB作用可导致MCF-7细胞出现微管解聚、微丝重排、线粒体破裂和内质网肿胀,且随剂量增加效应增强。结论EBB可将MCF-7细胞阻滞于S期,抑制其增殖,其机制可能与细胞骨架、线粒体和内质网的结构和功能改变有关。
- 代晓华刘荣周圆杨铭范冬梅熊冬生齐静杨纯正朱惠芳
- 小檗胺衍生物EBB抑制人乳腺癌细胞MCF-7生长及其相关机制的研究
- 目的探讨小檗胺衍生物EBB对人乳腺癌MCF-7细胞的增殖抑制作用及其相关作用机制。方法采用四唑盐(MTT)比色法检测EBB对MCF-7细胞的生长抑制作用,用流式细胞仪检测EBB对MCF-7细胞周期的影响,用激光扫描共聚焦...
- 代晓华刘荣周圆杨铭范冬梅熊冬生齐静杨纯正朱惠芳
- 关键词:钙调素拮抗剂MCF-7细胞微丝微管内质网
- 文献传递