谢志宙
- 作品数：14 被引量：14H指数：3
- 供职机构：中国农业科学院兰州兽医研究所更多>>
- 发文基金：甘肃省科技重大专项计划教育部留学回国人员科研启动基金国家科技支撑计划更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生化学工程更多>>
- 一种多头带绦虫抗原基因及其重组蛋白与用途
- 本发明公开一种多头带绦虫抗原基因及其重组蛋白与用途。本发明的一种多头带绦虫绵羊脑多头蚴抗原基因是氨基酸序列为SEQ№1的Tm82。本发明的多头带绦虫抗原基因Tm82可用于制备脑多头蚴的免疫疫苗。
- 李文卉付宝权曲自刚盖文燕谢志宙刘静宜
- 文献传递
- 旋毛虫半胱氨酸蛋白酶基因TsCP1的克隆与序列分析被引量：3
- 2012年
- 为了研究旋毛虫半胱氨酸蛋白酶的功能,根据GenBank中旋毛虫EST数据库的半胱氨酸蛋白酶基因部分cDNA序列设计引物,以旋毛虫肌幼虫总RNA为模板,进行RT-PCR,克隆到旋毛虫半胱氨酸蛋白酶基因(TsCP1)的完整开放阅读框序列,利用生物信息学软件对其进行预测分析。结果表明,TsCP1cD-NA序列含有一个由1 101个核苷酸组成的开放阅读框,编码由366个氨基酸残基组成的多肽,蛋白质的分子质量理论值为41.9ku,理论等电点为7.46。TsCP1二级结构中α螺旋占31.4%,β折叠占15.3%。TsCP1第1～19位氨基酸残基为信号肽序列,具有3处N-糖基化位点,而且具有半胱氨酸蛋白酶的保守活性位点Cys173,His309及Asn333残基,另外在酶前体序列中有与组织蛋白酶F特征基序ERFNAQ相似的LKFNAQ序列,表明该蛋白属于半胱氨酸蛋白酶家族的组织蛋白酶F亚类。同源性分析表明与其他寄生性蠕虫组织蛋白酶F的一致性在40%以上,系统进化分析表明与吸虫的组织蛋白酶F属于不同的进化分支。
- 曲自刚李文卉谢志宙刘静宜王艳华张德林付宝权牛廷献
- 关键词：旋毛虫半胱氨酸蛋白酶克隆
- 幽门螺杆菌尿素酶B基因的克隆表达及活性测定被引量：2
- 2013年
- 为研究幽门螺杆菌(Hp)尿素酶B(UreB)的免疫学活性,采用PCR方法扩增Hp UreB基因,经双酶切构建表达载体pET28a-UreB,转化大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞,经过IPTG诱导进行表达,用纯化后的重组蛋白免疫BALB/c小鼠,ELISA检测血清抗体效价,并使用感染患者血清进行Western-blot鉴定。结果显示,扩增的Hp UreB基因序列与GenBank中的26 695标准株序列相比较核苷酸序列同源性达到96.73%,氨基酸序列同源性高达99.30%,SDS-PAGE分析发现表达的重组蛋白分子质量约为66ku,以可溶性形式存在。Western-blot结果显示重组UreB能被Hp感染患者血清特异性识别,同时,用纯化后的UreB蛋白免疫小鼠能诱导产生特异性体液免疫应答,表明UreB具有很好的免疫原性。试验证明表达出具有生物活性的UreB蛋白,为Hp快速检测方法的研究奠定了基础。
- 蔡靓李克生杜惠芬付宝权李文卉曲自刚谢志宙
- 关键词：幽门螺杆菌尿素酶B亚单位原核表达免疫原性
- 旋毛虫组织蛋白酶B基因TsCB1的克隆与生物信息学分析被引量：3
- 2013年
- 为了研究旋毛虫组织蛋白酶B的功能,对GenBank中旋毛虫基因组数据库和EST数据库进行检索,获得旋毛虫组织蛋白酶B的cDNA序列并设计引物。以旋毛虫肌幼虫总RNA为模板,进行RT-PCR,将PCR产物克隆到pMD18-T载体后测序并进行生物信息学分析。结果表明,成功克隆到旋毛虫组织蛋白酶B基因(TsCB1)的cDNA序列,TsCB1cDNA含有1个由1 449个核苷酸组成的完整的开放阅读框,编码482个氨基酸残基组成的多肽,蛋白质分子质量理论值为55.1ku,理论等电点为7.66。TsCB1第1～35位氨基酸残基为信号肽序列,有2个潜在的N-糖基化位点,具有1个生长调节素B结构域和半胱氨酸蛋白酶结构域,半胱氨酸残基活性位点被丝氨酸残基所替换,同源性分析表明与其他线虫组织蛋白酶B的一致性在60%左右。
- 谢志宙李文卉曲自刚刘静宜高小磊岳龙张德林付宝权
- 关键词：旋毛虫组织蛋白酶B克隆生物信息学分析
- 旋毛虫组织蛋白酶B基因家族的克隆、表达及鉴定
- 通过分析GenBank中旋毛虫基因组数据库和EST数据库序列，得到旋毛虫组织蛋白酶B基因家族序列4个（TsCB1～4），以此为模板设计引物，以旋毛虫肌幼虫总RNA为模板进行RT-PCR，克隆到旋毛虫组织蛋白酶B基因完整的...
- 谢志宙
- 关键词：旋毛虫组织蛋白酶B生物信息学克隆酶活性
- 文献传递
- 旋毛虫半胱氨酸蛋白酶抑制剂基因的克隆、表达及鉴定
- 旋毛虫是一种细胞内寄生性线虫,其生活史可以在同一宿主内完成,宿主感染谱极广,几乎所有的哺乳动物均可感染。半胱氨酸蛋白酶抑制剂是一类广泛存在于生物体的半胱氨酸蛋白酶高效内源性抑制剂。寄生虫半胱氨酸蛋白酶抑制剂在寄生虫逃避宿...
- 姚菊霞李文卉盖文燕曲自刚谢志宙王艳华张德林付宝权
- 文献传递
- 一种旋毛虫重组蛋白及应用
- 本发明公开一种重组蛋白的制备方法，特别是一种TsSerpin重组蛋白，以及这种蛋白和它的用途。本发明的TsSerpin重组蛋白的制备方法是：以猪旋毛虫肌幼虫中提取总RNA为模板，以Oligo(dT)<Sub>18</Su...
- 付宝权盖文燕李文卉曲自刚谢志宙刘静宜
- 文献传递
- 旋毛虫半胱氨酸蛋白酶抑制剂基因TsCystatin1的克隆及序列分析被引量：5
- 2011年
- 为了研究旋毛虫半胱氨酸蛋白酶抑制剂的功能,应用电子克隆的方法从GenBank EST数据库获得1个旋毛虫半胱氨酸蛋白酶抑制剂基因(TsCystatin1)的部分cDNA序列,据此设计引物,并以旋毛虫新生幼虫总RNA为模板,进行反转录及PCR,克隆到该基因的完整开放阅读框序列,利用生物信息学软件对其进行了预测分析。结果表明,TsCystatin1 cDNA序列含有一个由666个核苷酸组成的开放阅读框架,编码由221个氨基酸残基组成的多肽,蛋白分子质量理论值为24.3ku,理论等电点为4.44。TsCystatin1第1～25位氨基酸残基为信号肽序列,具有半胱氨酸蛋白酶抑制剂的保守序列QVVAG,其C末端具有3处N-糖基化位点以及4个链内二硫键所需的半胱氨酸残基。该蛋白的二级结构中α螺旋占18.6%,β折叠占23.5%,其余57.9%为转角。结构域分析表明,该蛋白具有一个半胱氨酸蛋白酶抑制剂样结构域,属于半胱氨酸蛋白酶抑制剂家族2,与其他线虫半胱氨酸蛋白酶抑制剂的同源性较高。
- 姚菊霞李文卉盖文燕曲自刚谢志宙王艳华张德林付宝权
- 关键词：旋毛虫半胱氨酸蛋白酶抑制剂克隆
- 旋毛虫半胱氨酸蛋白酶抑制剂基因的电子克隆及序列分析
- 毛虫感染引起的旋毛虫病是一种危害严重的食源性人兽共患寄生虫病,入主要因为生食或半生食含有旋毛虫肌幼虫包囊的猪肉或其它动物肉类而感染,严重时可以致人死亡.本研究通过电子克隆的方法从GenBank数据库获得旋毛虫新生幼虫期半...
- 姚菊霞李文卉盖文燕曲自刚谢志宙王艳华张德林付宝权
- 关键词：旋毛虫电子克隆
- 具有免疫保护性的脑多头带绦虫烯醇酶TmENO重组蛋白
- 本发明涉及脑多头带绦虫免疫保护性抗原烯醇酶TmENO重组蛋白及其制备方法及应用。本发明的重组蛋白其氨基酸序列是GenBank登录号JQ627651的ORF序列编码的氨基酸序列SEQNo.5，其编码基因序列按大肠杆菌偏爱密...
- 李文卉付宝权曲自刚谢志宙刘静宜
- 文献传递
