谷跃峰
- 作品数:5 被引量:7H指数:2
- 供职机构:大连工业大学更多>>
- 发文基金:辽宁省高校创新团队支持计划大连市科技计划项目国家自然科学基金更多>>
- 相关领域:生物学轻工技术与工程农业科学更多>>
- 重组海参溶菌酶的生产方法及由其制得的重组海参溶菌酶
- 一种重组海参溶菌酶的生产方法及由其制得的重组海参溶菌酶,该方法是将海参溶菌酶基因(SEQ ID NO.1)连接到真核表达载体pPIC9K中构建重组质粒,并将所形成的重组质粒转化到毕赤酵母SMD1168中,经甲醇诱导表达,...
- 丛丽娜朱蓓薇王秀霞谷跃峰杨冠科郝明董秀萍
- 文献传递
- 海参溶菌酶在毕赤酵母中的表达及生物活性研究
- 本论文旨在构建并筛选出具有抑菌活性的海参溶菌酶(Stichopus japonicusLysozyme,SJL)的毕赤酵母工程菌,并对表达产物进行纯化,研究了其理化特性及生物活性。利用Trizol试剂法从海参肠组织中提取...
- 谷跃峰
- 关键词:毕赤酵母纯化理化特性生物活性
- 文献传递
- 重组海参溶菌酶理化特性及生物活性的初步研究被引量:2
- 2010年
- 将构建好的重组海参溶菌酶毕赤酵母菌株进行诱导表达,用CM52-纤维素阳离子交换柱分离得到电泳纯的重组海参溶菌酶。利用浊度法测定该酶的活性,滤纸片液体扩散法测定其抑菌谱。结果显示,重组海参溶菌酶的最适pH值为6.5,最适温度为35℃,在pH5.0~7.5、50qC以下有较好的稳定性。抑菌谱测定结果显示重组海参溶菌酶对6种指示菌均表现出抑菌性,尤其对副溶血弧菌的抑制作用最强。上述结果均与天然海参溶菌酶一致。
- 谷跃峰丛丽娜骆宁
- 关键词:理化特性生物活性
- 重组海参溶菌酶的生产方法及由其制得的重组海参溶菌酶
- 一种重组海参溶菌酶的生产方法及由其制得的重组海参溶菌酶,该方法是将海参溶菌酶基因(SEQ ID NO.1)连接到真核表达载体pPIC9K中构建重组质粒,并将所形成的重组质粒转化到毕赤酵母SMD1168中,经甲醇诱导表达,...
- 丛丽娜朱蓓薇王秀霞谷跃峰杨冠科郝明董秀萍
- 文献传递
- 海参溶菌酶基因克隆及在毕赤酵母中的表达与纯化被引量:5
- 2010年
- 研究构建并筛选了具有抑菌活性的重组海参溶菌酶(Stichopus japonicuslysozyme,SJL)的毕赤酵母工程菌。从海参肠组织中提取总RNA,根据已经测得的SJL的基因序列(GenBank accession No.EF036468)设计引物,以总RNA为模板经RT-PCR获得目的基因,并将该基因与表达载体pPIC9K连接,构建重组质粒pPIC9K-SJL,再转化至毕赤酵母GS115中。利用MD、MM和含抗生素G418的YPD平板培养基筛选出表型为His+Muts的高拷贝阳性菌株。挑选具有抑菌活性的菌株进行甲醇诱导表达液体发酵,其上清液经硫酸铵沉淀、透析后得到溶菌酶粗品,再经CM52-纤维素阳离子交换柱进一步纯化,得到电泳纯的溶菌酶。结果显示,共筛选到7株有抑菌活性的重组酵母菌株,诱导72 h时表达量最高。SJL在毕赤酵母中得到成功表达。
- 谷跃峰丛丽娜骆宁
- 关键词:毕赤酵母纯化