由田
- 作品数：13 被引量：21H指数：3
- 供职机构：黑龙江大学生命科学学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金黑龙江省科技攻关计划黑龙江省博士后基金更多>>
- 相关领域：生物学化学工程轻工技术与工程医药卫生更多>>
- 副干酪乳杆菌HD1.7遗传转化体系的初步建立被引量：3
- 2011年
- 优化副干酪乳杆菌(Lactobacillus paracasei)HD1.7的电转化条件,为构建L.paracasei HD1.7prcR基因敲除突变株奠定基础。通过电转化方法将自杀质粒pUC18-prcR-tet导入L.paracasei HD1.7内,对影响L.paracasei HD1.7电转化的几个主要因素进行了初步研究。当L.paracasei HD1.7生长8h时,加入青霉素使终浓度为12.5μg/mL,再培养1h。经AEB1电转缓冲液(蔗糖浓度为0.3mol/L)处理后,在1.8～2.0KV电压下完成电击,并迅速加入MRS培养基中,复苏5h,成功地将自杀质粒pUC18-prcR-tet转入L.paracasei HD1.7内,并发生了部分同源重组。本研究得到了副干酪乳杆菌(Lactobacillus paracasei)HD1.7较优电转化条件,为继续研究L.paracasei HD1.7的群体感应调控因子prcR奠定了基础。
- 葛菁萍高先军由田平文祥
- 关键词：副干酪乳杆菌电转化
- 不同感受态细胞制备方法对副干酪乳杆菌转化效率的影响被引量：2
- 2014年
- 目的:研究不同感受态细胞制备方法对副干酪乳杆菌转化效率的影响。方法:优化并比较未处理、青霉素处理法、溶菌酶处理法及NaCl处理法制备的感受态细胞的转化效果。结果:优化各处理法获得的条件分别为:未处理法OD600为0.8,甘氨酸质量浓度为3 g/mL,青霉素终质量浓度为12.5μg/mL,溶菌酶质量浓度为10 mg/mL,NaCl浓度为0.7 mol/L。不同处理方法获得的感受态细胞转化效率差异显著(P<0.05),转化效率由高到低依次为青霉素处理法【(1.64±0.05)×103cfu/μg质粒】、甘氨酸处理法【(1.51±0.03)×103 cfu/μg质粒】、NaCl处理法【(1.20±0.04)×103cfu/μg质粒】、溶酶菌处理法【(0.56±0.02)×103 cfu/μg质粒】、未处理法【(0.43±0.01)×103 cfu/μg质粒】。结论:青霉素、甘氨酸及NaCl处理法制备的感受态细胞能够有效提高副干酪乳杆菌转化效率,为副干酪乳杆菌遗传转化体系的建立奠定基础。
- 王洋由田潘超果马葛菁萍平文祥
- 关键词：副干酪乳杆菌感受态细胞
- 同源片段长度对副干酪乳杆菌同源重组频率的影响
- 2017年
- 目的:探索同源片段大小与副干酪乳杆菌同源重组率之间的关系。方法:分别构建以氨苄青霉素和四环素抗性标记基因为遗传转化筛选标记的,用于敲除prc K,prc R基因的4个同源重组质粒p2NIL-KA(625 bp,650bp),pUC18-KT(1 350 bp,1 350 bp),p2NIL-RT(433 bp,474 bp),pUC18-RT(1 350 bp,1 350 bp),并分别电转化于副干酪乳杆菌HD1.7感受态细胞中,检测筛选同源重组转化子,计算发生同源重组的频率。结果:成功构建同源重组质粒,p2NIL-KA(625 bp,650 bp),pUC18-KT(1 350 bp,1 350 bp),p2NIL-RT(433 bp,474 bp),pUC18-RT(1 350 bp,1 350 bp)同源重组频率分别为0,1.85%,0,1.78%。结论:当同源片段长度为1 350 bp或更长时,可与副干酪乳杆菌染色体进行同源重组。
- 李兴霖孙艳阳王洋由田葛菁萍平文祥
- 关键词：副干酪乳杆菌同源重组
- 一种敲除prcK基因的自杀质粒pYTKLKRT及其构建方法
- 一种敲除prcK基因的自杀质粒pYTKLKRT及其构建方法，它涉及一种自杀质粒及其构建方法。敲除prcK基因的自杀质粒pYTKLKRT由prcK基因左侧片段prcKL、prcK基因右侧片段prcKR、四环素抗性基因和质粒...
- 葛菁萍王洋由田平文祥
- 文献传递
- Lactobacillus paracasei HD1.7 prcR、prcK基因缺失突变株的构建
- 本实验室于2003年从乳酸酸菜发酵液中分离出一株乳酸菌,并将其命名为Lactobacillus paracasei HD1.7。经研究发现,该菌发酵液中含有一种肽类物质,可以有效抑制多种革兰氏阳性菌、革兰氏阴性菌和酿酒酵...
- 由田
- 关键词：PRCA生物信息学基因敲除电转化
- 文献传递
- 副干酪乳杆菌prcA基因克隆及生物信息学分析被引量：2
- 2014年
- 旨在了解副干酪乳杆菌prcA基因的结构和功能,探明prcA基因与副干酪乳杆菌拟群体效应相关基因—自诱导肽编码基因之间的联系。通过PCR方法对副干酪乳杆菌中prcA进行扩增,并通过生物信息学方法对该基因的核苷酸组成、蛋白质构象等方面进行预测和分析。克隆得到的prcA基因全长为416 bp,包括一个138 bp的开放阅读框,编码45个氨基酸,蛋白分子量为5326.83 Da,等电点为4.85,是一种稳定蛋白,不含跨膜区,蛋白质的二级结构以α-螺旋、不规则卷曲和延伸主链组成,亚细胞定位预测显示该蛋白主要位于细胞外;prcA基因为副干酪乳杆菌拟群体效应相关基因—自诱导肽编码基因,负责细菌素生成的调控。
- 王洋葛菁萍由田平文祥
- 关键词：副干酪乳杆菌生物信息学
- 响应面法优化副干酪乳杆菌HD1.7产Paracin1.7发酵培养基被引量：3
- 2011年
- 目的:优化副干酪乳杆菌(Lactobacillus paracasei)HD1.7发酵产抗菌肽Paracin1.7培养基。方法:采用Plackett-Burman设计,从8个因素中筛选显著的影响因素,然后通过最陡爬坡和Box-Behnken设计进行优化,并用JMP7.01软件分析。结果:用Plackett-Burman设计筛选出影响显著的3个因素——葡萄糖、MgSO4、Mn-SO4,其最佳质量浓度分别为6.5685、0.454、0.01052g/L。在优化后的培养基下,抗菌肽效价达141.648IU/mL,产量比优化前(74.13IU/mL)提高了1.91倍。结论:副干酪乳杆菌HD1.7产生的抗菌肽Paracin1.7对多种革兰氏阳性细菌、革兰氏阴性细菌及酵母菌都有抑制作用,可作为新型食品防腐剂。本研究结果为抗菌肽Paracin1.7的工业化生产奠定了基础。
- 葛菁萍由田高先军苑婷婷孙红兵平文祥
- 关键词：响应面法抗菌肽
- 一种敲除prcR基因的自杀质粒pYTRLRRT及其构建方法
- 一种敲除prcR基因的自杀质粒pYTRLRRT及其构建方法，它涉及一种自杀质粒及其构建方法。敲除prcR基因的自杀质粒pYTRLRRT由prcR基因左侧片段prcRL、prcR基因右侧片段prcRR、四环素抗性基因和质粒...
- 葛菁萍孙育新王洋由田李兴霖孙艳阳平文祥
- 文献传递
- 果胶酶高产菌株的紫外线及硫酸二乙酯的诱变育种被引量：5
- 2011年
- 以HDYM-02为出发菌株,用紫外线及硫酸二乙酯进行诱变,从大量突变株中进行筛选,选育出2株产果胶酶性质稳定且酶活明显提高的突变株UV-21和DES-1,株相比其产酶期提前,前者在24 h时的酶活力为出发菌株的1.6倍,后者在12 h的酶活力为出发菌株的1.44倍。
- 由田宋刚凌红志葛菁萍
- 关键词：果胶酶紫外线硫酸二乙酯诱变
- 一种敲除prcR基因的自杀质粒pYTRLRRT及其构建方法
- 一种敲除prcR基因的自杀质粒pYTRLRRT及其构建方法，它涉及一种自杀质粒及其构建方法。敲除prcR基因的自杀质粒pYTRLRRT由prcR基因左侧片段prcRL、prcR基因右侧片段prcRR、四环素抗性基因和质粒...
- 葛菁萍王洋由田平文祥
