谭志
- 作品数：3 被引量：9H指数：2
- 供职机构：中国海洋大学海洋生命学院海洋生物遗传育种教育部重点实验室更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学更多>>
- 单环刺螠硫醌氧化还原酶的表达、纯化和复性被引量：6
- 2010年
- 硫化物是1种广泛分布的有毒物质。硫醌氧化还原酶(SQR)是硫化物代谢的关键酶。单环刺螠是1种生活在潮间带下区及潮下带中的底栖生物。本研究为了获得具有活性的单环刺螠SQR,将其基因的开放阅读框cDNA克隆到原核表达载体pET28a中,转化大肠杆菌BL21(DE3)进行重组蛋白的表达,后采用稀释复性的方法对重组蛋白进行复性。经IPTG诱导后该重组蛋白主要以包涵体形式存在。用8 mol/L的尿素溶解包涵体后,通过镍离子金属螯合柱纯化获得重组蛋白。首次通过蛋白复性的方法获得具有活性的单环刺螠SQR,确定最佳稀释复性条件为pH=8.0,蛋白浓度20μg/mL,L-精氨酸浓度0.2 mol/L,还原型谷胱甘肽∶氧化型谷胱甘肽=10∶1,复性时间为96 h。
- 马玉彬谭志张志峰
- 关键词：单环刺螠稀释复性
- 单环刺螠硫醌氧化还原酶相互作用蛋白质的筛选被引量：5
- 2010年
- 硫化物是沿海水域中常见的有害物质,对于多数生物来讲,其在微摩尔级水平便可导致生物体中毒。硫醌氧化还原酶(SQR)是一种谷胱甘肽还原酶家族的膜结合黄素蛋白,为硫化物氧化解毒的一种关键酶。本研究以体外原核表达并复性的单环刺螠SQR为材料,采用His-pulldown技术和SDS-PAGE分析,从单环刺螠体壁细胞裂解液中筛选出两个可能与SQR结合的蛋白质,分子质量分别为40 ku和60 ku。通过毛细管液相色谱-离子肼质谱分析,初步判断其为细胞色素P450(cytochrome P450)和腺苷三磷酸结合盒转运蛋白(ATP-binding cassette transporter),并初步探讨了其可能的功能。
- 谭志马玉彬邵明瑜张志峰
- 关键词：单环刺螠质谱
- 单环刺螠硫醌氧化还原酶相互作用蛋白质的筛选
- 硫化物对于多数生物是有毒的,其主要表现为可以抑制线粒体电子传递链细胞色素氧化酶的活性,从而阻止有氧呼吸的进行。近年来,人们发现一些沿岸底栖生物可以氧化硫化物使之成为低毒或无毒的产物,以减低或解除硫化物毒性。硫醌氧化还原酶...
- 谭志
- 关键词：单环刺螠蛋白表达纯化质谱
- 文献传递
